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一种体外高效扩增人黏膜相关恒定T细胞的方法 

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申请/专利权人:清华大学深圳国际研究生院

摘要:本发明公开了一种体外高效扩增人黏膜相关恒定T细胞的方法,包括:1将人外周血单个核细胞或人MAIT细胞重悬于不含外源物质及血清的T细胞扩增培养基中,同时培养体系中添加免疫细胞血清补充物、IL‑12或IL‑1b和IL‑23,进行培养;2在第0、5和10天,加入5‑OP‑RU进行刺激,每2~3天更换培养基,并补充与步骤1相同浓度的免疫细胞血清补充物、IL‑12或IL‑1b和IL‑23,在扩增第11天时,去除死细胞,流式细胞术检测MAIT细胞比率,当MAIT细胞比率70%时,收集细胞。本发明对于MAIT细胞比率小于5%的受试者同样可有效进行体外扩增,第10天MAIT细胞比率即可超过70%。

主权项:1.一种体外高效扩增人黏膜相关恒定T细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)将人外周血单个核细胞重悬于不含外源物质及血清的T细胞扩增培养基中,同时培养体系中添加①或②,进行培养,所述①为免疫细胞血清补充物、重组人白介素-12和重组人白介素-23,所述②为免疫细胞血清补充物、重组人白介素-1b和重组人白介素-23;2)在第0、5和10天,向培养体系中加入5-OP-RU进行刺激,每2~3天更换T细胞扩增培养基,并补充与步骤1)相同浓度的①或②,在扩增第11天时,去除死细胞,流式细胞术检测MAIT细胞比率,当人黏膜相关恒定T细胞的细胞比率70%时,收集细胞。

全文数据:

权利要求:

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