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申请/专利权人：北京电子科技职业学院;北京化工大学
摘要：本发明公开了一种壳聚糖修饰磁性纳米颗粒固定糖苷酶的制备方法及应用，涉及生物催化剂的技术领域，其技术方案要点包括以下步骤：S1、糖苷酶的表达：将至少一种糖苷酶在毕赤酵母中表达，得到发酵液；S2、制备羧基化磁性纳米颗粒；S3、壳聚糖包覆磁性纳米颗粒的合成；S4、以壳聚糖包覆磁性纳米颗粒为载体固定糖苷酶：将步骤S1制备得到的发酵液与步骤S3制备得到的壳聚糖包覆的磁性纳米颗粒混合，加入小分子交联剂进行交联，用磁铁分离沉淀物，洗涤后保存，即得MNPs@CS@酶。
主权项：1.一种壳聚糖修饰磁性纳米颗粒固定糖苷酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、糖苷酶的表达：将至少一种糖苷酶在毕赤酵母中表达，得到发酵液；S2、制备羧基化磁性纳米颗粒：将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O溶于水中，加热并持续搅拌，当温度升高至75℃时，向体系中加入NH3·H2O，持续搅拌1h；当体系温度升高至85℃时，添加柠檬酸三钠，继续反应直至制备完成；分离、洗涤，得到羧基化磁性纳米颗粒；S3、壳聚糖包覆磁性纳米颗粒的合成：将步骤S2制备的羧基化磁性纳米颗粒与EDC、NHS混匀，孵育活化1-2h，活化结束后，用磷酸盐缓冲液洗涤磁性纳米颗粒；配制壳聚糖溶液，随后在磁性纳米颗粒中加入体积比例1：1的壳聚糖溶液，孵育1.5h，孵育结束后将磁性纳米颗粒用磷酸盐缓冲液洗涤三次，得到的MNPs@CS于低温储存；S4、以壳聚糖包覆磁性纳米颗粒为载体固定糖苷酶：将步骤S1制备得到的发酵液与步骤S3制备得到的壳聚糖包覆的磁性纳米颗粒混合，加入小分子交联剂进行交联，用磁铁分离沉淀物，洗涤后保存，即得MNPs@CS@酶。
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百度查询： 北京电子科技职业学院 北京化工大学 一种壳聚糖修饰磁性纳米颗粒固定糖苷酶的制备方法及应用
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