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一种基于ELISA的透明质酸酶活性的检测方法 

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申请/专利权人:湖北天勤鑫圣生物科技有限公司

摘要:本发明公开了一种基于ELISA的透明质酸酶活性的检测方法,涉及酶活性检测技术领域。本方法利用包被液和封闭液包被和封闭酶标孔板;包被液采用乙酸、透明质酸生物素钠盐和CBS缓冲液配制而成;使用分析液配制透明质酸酶标准品工作液;使用分析缓冲液稀释待测样品配制待测工作液;分析液为pH值为4.5‑7.5的甲酸铵水溶液;向酶标孔板中加入标准品工作液和待测工作液,孵育;再加入二抗,孵育;最后依次加入显色液和终止液,测定吸光度值;利用标准品工作液的OD450值绘制标准曲线;根据待测工作液的OD450值和标准曲线定量待测样品中透明质酸酶活性。

主权项:1.一种基于ELISA的透明质酸酶活性的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:利用包被液和封闭液依次对酶标孔板的每个孔进行包被处理和封闭处理;所述包被液采用乙酸、透明质酸生物素钠盐和CBS缓冲液配制而成;使用分析液梯度稀释透明质酸酶标准品,配制若干标准品工作液;使用分析缓冲液稀释待测样品配制待测工作液;所述分析液为pH值为4.5-7.5的甲酸铵水溶液;向酶标孔板的每个孔中加入若干所述标准品工作液和待测工作液,第一次孵育,洗板;每个孔中加入二抗,第二次孵育,洗板;加入显色液进行显色;加入终止液,测定吸光度值OD450;利用梯度稀释的若干所述标准品工作液对应的OD450值绘制标准曲线;根据待测工作液对应的OD450值和所述标准曲线定量待测样品中透明质酸酶活性。

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