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申请/专利权人：华熙生物科技股份有限公司;中国计量科学研究院
摘要：本申请提供一种确定交联透明质酸的修饰位点和交联方式的方法，包括以下步骤：将修饰的透明质酸寡糖与还原剂混合，得到还原产物；将还原产物进行液相色谱串联质谱检测，以得到分离的修饰寡糖；将分离的修饰寡糖进行二级或三级串联质谱检测，以得到检测结果；基于检测结果确定所述交联透明质酸的修饰位点和交联方式。本申请的方法可以将各种修饰的透明质酸寡糖充分分离，并进一步对分离的修饰的透明质酸寡糖进行质谱检测并解析，从而确定交联透明质酸的修饰位点和交联方式。
主权项：1.一种确定交联透明质酸的修饰位点和交联方式的方法，其特征在于，包括以下步骤：将修饰的透明质酸寡糖与还原剂混合，得到还原产物；将所述还原产物进行液相色谱串联质谱分析，以得到分离的修饰寡糖；将所述分离的修饰寡糖进行二级或三级串联质谱检测，以得到检测结果；基于所述检测结果确定所述交联透明质酸的修饰位点和交联方式；其中，所述修饰的透明质酸寡糖通过酶解交联透明质酸得到，所述交联透明质酸是通过1,4-丁二醇二缩水甘油醚交联的透明质酸；所述二级或三级串联质谱检测的碎裂模式包含碰撞诱导解离CID、高能碎裂解离HCD中的一种或两种；碰撞诱导解离CID的碰撞能量为15-40，高能碎裂解离HCD的碰撞能量为40-80；所述液相色谱串联质谱检测的色谱条件为：使用多孔石墨化碳色谱柱，以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，流动相A为甲酸铵或乙酸铵水溶液，流动相B为甲酸铵或乙酸铵的乙腈水溶液；基于所述检测结果确定所述交联透明质酸的修饰位点和交联方式是指基于所述检测结果，确定透明质酸二糖单元与1,4-丁二醇二缩水甘油醚发生交联反应的糖单元或特定羟基位点，从而确定透明质酸和1,4-丁二醇二缩水甘油醚的交联方式。
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权利要求：
百度查询： 华熙生物科技股份有限公司 中国计量科学研究院 一种确定交联透明质酸的修饰位点和交联方式的方法
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