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申请/专利权人:重庆市江津区中心医院
摘要:本发明提供了一种基因改造D29噬菌体及在MTB检测中的应用,涉及细菌检测技术领域。该噬菌体采用pNZ123构建系列用于同源重组的模板质粒,通过同源重组介导噬菌体基因组的无义突变与基因引入,获取噬菌体系列重组因子;其中,LysA在第25个氨基酸处无义突变,TGC突变为TGA,lysB在第22个氨基酸处无义突变,TGG突变为TGA,Holin在第18个氨基酸处无义突变,TCG突变为TAG,壳体蛋白前666bp长DNA片段引入启动子L5,壳体蛋白后2000bp长DNA片段引入P2A‑iRFP。其得到一种长时间存活的噬菌体,延缓噬菌体对于MTB的降解速度,提高MTB检测的灵敏度,实现MTB原位检测。
主权项:1.一种基因改造D29噬菌体,其特征在于:采用pNZ123构建系列用于同源重组的模板质粒,通过同源重组介导噬菌体基因组的无义突变与基因引入,获取噬菌体系列重组因子;其中,LysA在第25个氨基酸处无义突变,TGC突变为TGA,lysB在第22个氨基酸处无义突变,TGG突变为TGA,Holin在第18个氨基酸处无义突变,TCG突变为TAG,壳体蛋白前666bp长DNA片段引入启动子L5,壳体蛋白后2000bp长DNA片段引入P2A-iRFP。
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