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申请/专利权人:上海珀原医用材料有限公司
摘要:本发明提供一种脱细胞基质凝胶海绵及其制备方法,所述脱细胞基质凝胶海绵的制备方法包括以下步骤:脱细胞基质被蛋白酶溶液消化获得预备液;调节预备液的pH值,将预备液与缓冲液混合得脱细胞基质凝胶液;脱细胞基质凝胶液进行冷冻干燥获得疏松多孔的脱细胞基质凝胶冻干物;脱细胞基质凝胶冻干产品进行气态交联,干燥得所述脱细胞基质凝胶海绵。本发明优先优化脱细胞基质凝胶海绵的冷冻干燥参数以获得孔径符合细胞生长要求且均匀的支架,再通过引入气态交联剂的方式对海绵进行交联,这种交联方式无需使用溶剂洗脱,既提高了脱细胞基质凝胶海绵的机械性能,又避免了因多次冷冻干燥引起孔径减小的问题。
主权项:1.一种脱细胞基质凝胶海绵的制备方法,其特征在于,所述脱细胞基质凝胶海绵的制备方法包括以下步骤:(1)脱细胞基质被蛋白酶溶液消化获得预备液;调节预备液的pH值,将预备液与PBS缓冲液混合得脱细胞基质凝胶液;(2)脱细胞基质凝胶液进行冷冻干燥获得疏松多孔的脱细胞基质凝胶冻干物;(3)脱细胞基质凝胶冻干物进行气态交联,干燥得所述脱细胞基质凝胶海绵;步骤(2)所述冷冻干燥包括:(S1)将脱细胞基质凝胶液置于容器内,静置凝固得脱细胞基质凝胶;(S2)按预设的脱细胞基质凝胶预冻程序对脱细胞基质凝胶进行预冻;其中,步骤(S2)所述预冻程序包括以下步骤:(T1)将温度调节至≤-30℃,过渡时间≥0.2h,恒温时间≥1h;(T2)升温,再将温度升温至此范围:下限温度高于步骤(T1)目标温度至少7℃,上限温度≤-20℃;过渡时间0.2-0.5h,恒温时间1-2h;(T3)降温,将温度再次降温至≤-30℃,过渡时间≥0.2h,恒温时间≥1h。
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权利要求:
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