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申请/专利权人：南京农业大学
摘要：本发明公开了一种tRNA分离纯化方法及其在定量检测RNA化学修饰中的应用。本发明采用凝胶电泳分离与凝胶洗脱的方法，可以从分离出mRNA的总RNA中分离纯化tRNA，充分利用RNA样品，有效节省样品用量。采用凝胶电泳分离法分离tRNA，设备易得，操作简单。本发明制备的RNA样品缓冲液可以有效线性化tRNA，tRNA在该凝胶中充分线性化，提高了tRNA的电泳分辨率，在洗脱过程中，本发明制备的RNA洗脱缓冲液洗脱效果好，可以有效从凝胶中洗脱tRNA，提高tRNA的纯度和产率，从而提高后续的检测准确度和检测灵敏度。
主权项：1.一种tRNA分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：1）RNA样品缓冲液的制备：去离子甲酰胺、甲醛和缓冲液，混匀制备成RNA样品缓冲液；2）RNA样品前处理及电泳：在RNA样品中加入RNA样品缓冲液后加热，冷却后加入RNA上样缓冲液混匀后进行尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳；3）洗脱纯化tRNA：将电泳后含有tRNA的目标片段的凝胶切下并粉碎，加入洗脱缓冲液加热洗脱，离心后收集上清，经过沉淀洗涤干燥即得tRNA。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京农业大学 一种tRNA分离纯化方法及其在定量检测RNA化学修饰中的应用
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