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申请/专利权人:南通大学附属医院
摘要:本发明提供一种肝细胞癌类器官与组织驻留免疫细胞共培养的方法,包括以下步骤:S1.类器官培养和传代:采用“时钟五点法”获取肝细胞癌的肿瘤组织,在体外培养成肝细胞癌类器官,并扩增类器官;观察类器官生长状态,将长势良好的进行传代,得到类器官肿瘤球;S2.构建肝细胞癌类器官与组织驻留免疫细胞共培养体系:首先,将S1得到的类器官肿瘤球的混悬液、1%碳酸氢钠以及3mgmL胶原蛋白I按照9:1:10的体积比进行混合,最后依次使用I型培养基和II型培养基进行共培养,总培养时间为5‑7天。本发明使用“时钟五点法”规范肝细胞癌类器官肿瘤组织活检取材方式,减少了因取材的空间异质性导致药敏结果不准确的概率;本发明对培养条件和培养基进行优化,能够在5‑7天的时间窗口内实现肝细胞癌类器官与组织驻留免疫细胞的短期共培养,有利于研究肝细胞癌与免疫细胞的相互作用,以满足后期免疫药敏测试和精准医疗的需求。
主权项:1.一种肝细胞癌类器官与组织驻留免疫细胞共培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.类器官培养和传代:采用“时钟五点法”获取肝细胞癌的肿瘤组织,在体外培养成肝细胞癌类器官,并扩增类器官;观察类器官生长状态,将长势良好的进行传代,得到类器官肿瘤球;S2.构建肝细胞癌类器官与组织驻留免疫细胞共培养体系:首先,将S1得到的类器官肿瘤球的混悬液、1%碳酸氢钠以及3mgmL胶原蛋白I按照9:1:10的体积比进行混合,最后依次使用I型培养基和II型培养基进行共培养,总培养时间为5-7天。
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权利要求:
百度查询: 南通大学附属医院 一种肝细胞癌类器官与组织驻留免疫细胞共培养的方法及其应用
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