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一种鉴别日本甜柿基因型的方法及其应用 

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申请/专利权人:华中农业大学

摘要:本发明公开了一种鉴别日本甜柿基因型的方法及其应用,属于基因型鉴别技术领域。本发明提供的鉴别日本甜柿基因型的方法,通过探针与目标分子之间发生特异性的水解反应方可生成荧光信号,误差更小,鉴别结果更准确,结果稳定性更高;只需要两个参考基因组,鉴定易操作,可以大幅降低日本甜柿基因型鉴别的工作量,试剂耗材等的消耗更少,鉴别成本更低;可以大幅缩短鉴别所需时间,提高鉴别效率,对日本甜柿种质资源及杂交后代的基因型鉴定具有重要意义,可以为甜柿品种改良和育种提供有力的技术支持。

主权项:1.一种鉴定日本甜柿基因型的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、提取日本甜柿标准样品的基因组DNA,根据日本甜柿自然脱涩位点ast区间、参考基因设计特异性引物和Taqman特异探针,将特异性引物和Taqman特异探针送公司合成;S2、将获得的日本甜柿标准样品的基因组DNA倍比稀释成不同的浓度,然后分别与日本甜柿自然脱涩位点ast区间、参考基因特异性引物和Taqman特异探针混合进行实时荧光定量PCR反应,得到不同DNA浓度下的Ct值;S3、利用得到的日本甜柿标准样品不同DNA浓度、不同特异性引物和Taqman特异探针下的Ct值,建立标准曲线;S4、提取待测柿材料的基因组DNA,并稀释成确定浓度,分别与日本甜柿自然脱涩位点ast区间、参考基因特异性引物和Taqman特异探针混合后进行实时荧光定量PCR反应,获得不同特异性引物和Taqman特异探针下的Ct值,将获得的Ct值分别代入S3建立的标准曲线中,即可计算得到待测柿材料的基因型。

全文数据:

权利要求:

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