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一种高产2-苯基乙醇的重组酵母菌株及其构建方法和应用 

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申请/专利权人:浙江工业大学;上海依诺信生物技术有限公司

摘要:本发明公开了一种高产2‑苯基乙醇的重组酵母菌株及其构建方法和应用,属于化合物的生物合成技术领域。所述构建方法包括在所述酵母菌株中过表达EcAROGfbr基因、EcPheAfbr基因、ylARO10基因、ylPAR4基因、ylARO1基因、ylPHA2基因和ylTKT基因,同时敲除ylTYR1基因。本发明首次利用来源于大肠杆菌的EcPheAfbr解除莽草酸途径负反馈抑制,实现2‑PE的从头合成,强化了艾氏途径,多拷贝关键酶,确认了关键竞争路径ylTYR1,提高了前体供应,使2‑PE的产量明显提高,为利用解脂耶氏酵母提高2‑PE合成的工业化应用奠定了基础。

主权项:1.一种高产2-苯基乙醇的重组酵母菌株的构建方法,其特征在于,包括在酵母菌株中过表达EcAROGfbr基因、EcPheAfbr基因、ylARO10基因、ylPAR4基因、ylARO1基因、ylPHA2基因和ylTKT基因,同时敲除ylTYR1基因的步骤;所述EcAROGfbr基因的核苷酸序列如SEQIDNO.60所示;所述EcPheAfbr基因的核苷酸序列如SEQIDNO.61所示;所述ylARO10基因的核苷酸序列如SEQIDNO.63所示;所述ylPAR4基因的核苷酸序列如SEQIDNO.62所示;所述ylARO1基因的核苷酸序列如SEQIDNO.67所示;所述ylPHA2基因的核苷酸序列如SEQIDNO.68所示;所述ylTKT基因的核苷酸序列如SEQIDNO.69所示。根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,过表达所述EcAROGfbr基因和所述EcPheAfbr基因包括利用CRISPR-Cas9技术将所述EcAROGfbr基因和所述EcPheAfbr基因敲入所述酵母菌株中。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江工业大学 上海依诺信生物技术有限公司 一种高产2-苯基乙醇的重组酵母菌株及其构建方法和应用

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