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申请/专利权人：南京中医药大学;中国药科大学
摘要：本发明公开了一种在哺乳动物细胞中定点插入乳酰化赖氨酸Klac的系统及其应用，所述系统包括编码突变型吡咯赖氨酰‑tRNA合成酶的基因，所述突变型吡咯赖氨酰‑tRNA合成酶是由马氏甲烷八叠球菌Methanosarcinamazei来源的吡咯赖氨酰tRNA合成酶MmPylRS进行突变所得。与现有技术相比，本发明通过Klac特异性tRNA合成酶tRNA对，将Klac位点特异性地插入活细胞的目标蛋白质中。与以前的重组表达系统的比较表明，本发明提高了插入Klac的正交性和效率。本发明将3种酶KlacRS2、chKlacRS‑WT和chKlacRS‑IPYE首次应用在哺乳动物细胞插入系统中，用于插入Klac，插入效率高，并且还可以用于在原核细胞中插入Klac；新的酶KlacRS2、chKlacRS‑WT和chKlacRS‑IPYE，正交性显著优于现有技术中公开的KlacRS1。
主权项：1.一种在哺乳动物细胞中定点插入乳酰化赖氨酸Klac的系统，其特征在于，所述系统包括编码突变型吡咯赖氨酰-tRNA合成酶的基因，所述突变型吡咯赖氨酰-tRNA合成酶是由SEQIDNO:1所示氨基酸序列突变所得，具体突变包括以下任意一种：1Y306位的Y突变为M，且C348位的C突变为T；2SEQIDNO:1所示氨基酸序列仅保留185-454位氨基酸，其中301位的L突变为M，306位的Y突变为L，309位的L突变为A，以及348位的C突变为F，且在所述185-454位氨基酸前面连接SEQIDNO:2所示氨基酸序列的第1-149位。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京中医药大学 中国药科大学 一种在哺乳动物细胞中定点插入乳酰化赖氨酸的系统及其应用
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