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申请/专利权人:瑞吉明(山东)生物科技有限公司
摘要:本发明公开了一种同步制备DNA镁盐和抗菌肽的方法,涉及抗菌肽制备技术领域。本发明先将肝素废水过滤后再进行超滤浓缩,之后采用磁性吸附剂对肝素废水中的抗菌肽进行吸附分离提纯,之后再调节pH至4.5~6.5,在该pH区间,即使加热也几乎不发生使DNA改性的脱羟基和脱氨基反应,之后再用碱溶液调整pH值至11~12以上,经历上述酸碱环境及加热过程之后,大部分杂质变性,可沉淀分离,之后经离心分离后再加酸形成高盐环境促使DNA沉淀析出。
主权项:1.一种同步制备DNA镁盐和抗菌肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将肝素废水初步过滤后再进行超滤浓缩,浓缩至原体积的15~110,制得浓缩料液备用;按照质量比1:50~60,将磁性吸附剂加入至浓缩料液中,振荡混合3~5min后,利用磁性将磁性吸附剂和浓缩料液分离,重复该过程3~5次;S2、向S1分离后的浓缩料液中加入质量分数为20%的盐酸,调节pH值至4.5~6.5,100℃条件下,搅拌1~1.5h并降温至70~80℃,降温后用质量分数为50%的氢氧化钠溶液调节pH值至11~12,再继续搅拌25~35min后静置冷却,之后离心分离取上清液,向上清液中加入质量分数为18%的盐酸,调节pH值至1~2,静置析出后过滤,过滤产物为含水DNA沉淀物,滤液收集备用;S3、按照质量比1:1,将S2中制备的含水DNA沉淀物加入至去离子水中,混合均匀后用氨水调节pH值至7,再加入含水DNA沉淀物质量0.2~0.3倍的质量分数为25%的氯化镁溶液,将此混合溶液用喷雾干燥法干燥,收集干燥产物制得DNA镁盐;S4、取部分S2中的滤液,加入质量分数为25%的氢氧化钠溶液,调节pH至7~7.5后,再加入磷酸盐缓冲溶液,调节pH至5.5~6.5,制得解吸附溶液;将S1中分离后的磁性吸附剂采用去离子水清洗2~3次后,按照质量比1:50~60,将清洗后的磁性吸附剂加入至解吸附溶液中,振荡混合3~5min后,利用磁性将磁性吸附剂和解吸附溶液分离,分离后将解吸附溶液离心分离,除去上清液后用盐酸调节pH值至7后,真空冷冻干燥,制得抗菌肽。
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