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申请/专利权人：因西特控股公司

摘要：本发明涉及制备式III手性取代的吡唑基吡咯并[2,3‑d]嘧啶及相关合成中间化合物的方法。该手性取代的吡唑基吡咯并[2,3‑d]嘧啶可作为蛋白质酪氨酸激酶的Janus激酶族JAK的抑制剂，用于治疗炎性疾病、骨髓增生病症及其它疾病。

主权项：1.一种制备3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐的方法，包括：a制备包含式Ia化合物的外消旋物的组合物： 包括：i将包含式Ia化合物的对映体过量的R-或S-对映体的组合物以式D-1化合物： 在第一种碱存在下，在足以形成式IV化合物的条件下进行处理： 以及ii在第二种碱存在下使式IV化合物与式D-1化合物反应；其中：*为手性碳；P1为保护基；且R1为环戊基，或b制备包含式Ia化合物的外消旋物的组合物： 包括将包含式Ia化合物的对映体过量的R-或S-对映体的组合物以式D-1化合物： 在碱存在下，在足以形成所述式Ia化合物的所述外消旋物的条件下进行处理；其中：*为手性碳；P1为保护基；且R1为环戊基，c得到3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈，以及d使3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈与磷酸在2-丙醇和或二氯甲烷存在下反应。

全文数据：制备JAK抑制剂及相关中间化合物的方法[0001]本申请是申请号为201610105708.2、申请日为2010年1月14日、名称为“制备JAK抑制剂及相关中间化合物的方法”的专利申请的分案申请。技术领域[0002]本发明涉及制备手性取代的吡唑基吡咯并[2，3-d]嘧啶及相关合成中间化合物的方法。该手性取代的吡唑基吡咯并[2,3-d]嘧啶可作为蛋白质酪氨酸激酶的Janus激酶族JAK的抑制剂，用于治疗炎性疾病、骨髓增生病症及其它疾病。背景技术[0003]蛋白激酶PK为一组酵素，其调节各种不同重要的生物学过程，特别包括细胞生长、存活与分化、器官形成与形态发生、新血管生成、组织修复及再生。蛋白激酶通过催化蛋白质（或底物）的磷酸化作用，并因此调节底物在各种生物环境中的细胞活性，从而发挥其生理作用。除了在正常组织器官中的功能以外，许多蛋白激酶还在包括癌症在内的许多人类疾病中起到更加特殊的作用。蛋白激酶的亚组也称致癌性蛋白激酶失调时可引起肿瘤的形成和生长，并进一步促进肿瘤的维持与发展（Blume-JensenP等，Nature2001,4116835:355-365。迄今为止，致癌性蛋白激酶代表了用于癌症介入与药物开发的最大且最引人注目的蛋白质靶标群组之一。[0004]蛋白激酶可分类为受体型和非受体型。受体酪氨酸激酶RTK具有细胞外部分、跨膜域和细胞内部分，而非受体酪氨酸激酶完全在细胞内。蛋白酪氨酸激酶JAK的Janus激酶族属于非受体型的酪氨酸激酶，包括以下族员：=JAKl也称为Janus激酶-I、JAK2也称为Janus激酶-2、JAK3也称为Janus激酶、白细胞;JAKL;L-JAK和Janus激酶-3和TYK2也称为蛋白酪氨酸激酶2。[0005]涉及JAK及转录的信号转导蛋白和激活蛋白（STAT的途径参与广范围细胞因子的信号活动。细胞因子为低分子量多肽或糖蛋白，其在几乎所有的细胞类型中刺激生物反应。一般而言，细胞因子受体不具有内在的酪氨酸激酶活性，因此需要受体相关的激酶传播磷酸化级联反应。JAK实现此功能。细胞因子结合至其受体，导致受体的二聚化，这使JAK能够彼此磷酸化，以及使细胞因子受体内的特定酪氨酸基序磷酸化。识别这些磷酸化酪氨酸基序的STAT被添补至受体，然后其本身被JAK依赖性酪氨酸磷酸化事件活化。经活化，STAT自受体解离，二聚并移位至细胞核，以结合至特定的DNA位点并改变转录（Scott,M.J.，C·J·Godshal1等，（2002·“Jaks，STATs，Cytokines，andSepsis.^ClinDiagnLabImmunol96:1153-9”）。[0006]JAK族在涉及免疫反应的细胞因子依赖性增生调节和细胞功能方面发挥作用。据信JAKSTAT途径，特别是JAK族的全部四个成员，在哮喘反应、慢性阻塞肺病、支气管炎及其它相关的下呼吸道炎性疾病中起作用。此外，通过JAK激酶发出信号的多种细胞因子与上呼吸道的炎性疾病或症状如影响鼻和窦的炎性疾病或症状，例如鼻炎、窦炎有关，不论是否为典型的过敏反应。JAKSTAT途径还牵涉在眼部的炎性疾病症状包括但不限于虹膜炎、葡萄膜炎、巩膜炎、结膜炎以和慢性过敏反应）中起作用。因此，抑制JAK激酶在这些疾病的治疗处理中可起到有益的作用。[0007]在JAK激酶的水平上阻断信号转导有望开发人类癌症的治疗方法。还可预计抑制JAK激酶对患有皮肤免疫病症如牛皮癣和皮肤过敏的患者具有治疗益处。因此，人们广泛地寻求Janus激酶或相关激酶的抑制剂，且在一些专利公开中报导了有效类别的化合物。例如，美国专利申请公开No.20070135461中报导了某些JAK抑制剂，包括⑻-3-4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基-3-环戊基丙腈，该专利的公开内容以引用的方式并入本文。[0008]鉴于对治疗与抑制激酶如Janus激酶相关的病症的化合物的需求与日倶增，需要新颖且更有效的途径获得抑制剂，如手性取代的吡唑基吡咯并[2，3-d]嘧啶及其相关的中间体。本文中所述的方法及化合物有助于满足这些及其它需求。发明内容[0009]本发明尤其提供制备包含式I化合物的组合物的方法：[0010][0011]包括使式II化合物：[0012][0013]在氢化催化剂存在下与氢气反应；[0014]其中：[0015]*表示手性碳；[0016]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0017]R2选自-C=0-NH2、-C=0O-R3和氰基；[0018]R3选自d-4烧基或Ci-4氟烷基;且[0019]P1为保护基。[0020]本发明进一步提供制备包含式I化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物的方法：[0021][0022]包括使式II化合物：[0023][0024]与氢气在具有LI的钌或铑催化剂存在下反应，其中L1S手性膦配体；[0025]其中：[0026]*表示手性碳；[0027]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0028]R2选自-C=〇-NH2、-C=0O-R3和氰基；[0029]R3选自-4烧基或-4氟烷基;且[0030]Pi为保护基。[0031]本发明进一步提供使式I化合物转化成式Ic化合物的方法，包括使式I化合物：[0032][0033]与金属氢氧化物反应，以形成式Ic化合物：[0034][0035]其中：[0036]*表示手性碳；[0037]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0038]R2为-C=〇O-R3;且[0039]P1为保护基。[0040]本发明还提供将式Ic化合物转化成式Ib化合物的方法，包括使式Ic化合物：[0041][0042]与氨或氢氧化铵在偶合试剂存在下反应，以形成式Ib化合物：[0043；[0044]其中：[0045]*表示手性碳；[0046]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0047]P1为保护基。[0048]本发明还提供将式Ib化合物转化成式Ia化合物的方法，包括使式Ib化合物：[0049:[0050]在脱水条件下反应，以形成式Ia化合物：[0051；[0052]其中：[0053]*表示手性碳；[0054]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0055]P1为保护基。[0056]本发明提供制备包含式Id化合物的对映体过量的（R-或（S-对映体的组合物的方法：[00ί[0058]包括使式IV化合物：[0059][0060]与式V化合物：[0061]V[0062]在手性胺和有机酸存在下进行反应；[0063]其中：[0064]*表示手性碳；[0065]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0066]P1为保护基。[0067]本发明进一步提供制备包含式VI化合物的对映体过量的（R-或⑸-对映体的组合物的方法：[0068][0069]包括使式V化合物：[0070][0071]与式VII化合物：[0072]VII[0073]在手性胺和有机酸存在下反应；[0074]其中：[0075]*表示手性碳；[0076]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0077]X1S卤素。[0078]本发明进一步提供使式VI化合物转化成式III化合物的方法，包括将式VI化合物：[0079]VI[0080]以氨或氢氧化铵和碘进行处理，以形成式VIII化合物：[0081]VIII[0082]其中：[0083]*表示手性碳；[0084]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0085]P1为保护基;且[0086]X1S卤素。[0087]本发明还提供将式VIII化合物转化成式IX化合物的方法，包括使式VIII化合物：[0088]VIII[0089]与式B-I化合物反应：[0090]B-I[0091]以形成式IX化合物：[0092]IX[0093]其中：[0094]*表示手性碳；[0095]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0096]基;且[0097]R。和Rd每个独立地选自!1和-6烷基;或[0098]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0099]本发明还提供使式IX化合物转化成式Ia化合物的方法，包括使式IX化合物：[0100]IX[0101]与式X化合物：[0102]入[0103]在钯催化剂和碱存在下反应，以形成式Ia化合物：[0104]Ia[0105]其中：[0106]*表示手性碳；[0107]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0108]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基；[0109]P1为保护基;且[0110]R。和Rd每个独立地选自!1和-6烷基;或[0111]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0112]在一些实施例中，本发明提供包含式IX化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[0113:IX[0114]其中：[0115]*表示手性碳；[0116]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和Ci-6氟烷基;且[0117]Rc和Rd每个独立地为-6烷基;或[0118]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0119]本发明进一步提供制备包含式IX化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物的方法：[0120]IX[0121]包括使包含式IX化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式IX化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物；[0122]其中：[0123]*表示手性碳；[0124]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0125]Rc和Rd每个独立地为-6烷基;或[0126]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0127]本发明提供制备包含式Ia化合物的外消旋物的组合物的方法：[0128]Ia[0129]包括：[0130]a将包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或（S-对映体的组合物以式D-I化合物：[0131]D-I[0132]在第一种碱存在且足以形成式IV化合物的条件下进行处理：[0133]IV[0134]以及[0135]⑹使式IV化合物与式D-I化合物在第二种碱存在下反应；[0136]其中：[0137]*为手性碳；[0138]P1为保护基;且[0139]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[0140]本发明进一步提供制备包含式Ia化合物的外消旋物的组合物的方法：[0141]Is[0142]包括将包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物以式D-I化合物：[0143]D-I[0144]在碱存在且足以形成式Ia化合物的外消旋物的条件下进行处理；[0145]其中：[0146]*为手性碳；[0147]P1为保护基;且[0148]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[0149]本发明进一步提供制备包含式Ia化合物的对映体过量的（R-或⑸-对映体的组合物的方法：[015Ia[0151]包括使包含式Ia化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物；[0152]其中：*为手性碳；[0153]R1选自C3-7环烷基、C卜6烷基和-6氟烷基;且[0154]P1为保护基。[0155]本发明提供制备包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物的方法：[0156；Ia[0157]包括：[0158]a使包含式Ia化合物的外消旋物的组合物与手性酸在溶剂存在下反应，以形成式Ia化合物的盐；[0159]⑹分离组合物，所述组合物包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或（S-对映体的手性盐；以及[0160]c将手性盐以碱进行处理，以形成包含式Ia化合物的对映体过量的（R-或（S-对映体的组合物；[0161]其中：[0162]*为手性碳；[0163]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0164]P1为保护基。[0165]本发明进一步提供使式Ia化合物转化成式III化合物的方法，包括使式Ia化合物：[0166]Ia[0167]在脱保护条件下反应，以形成式III化合物：[0168]III[0169]*为手性碳；[0170]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0171]P1为保护基。[0172]本发明进一步提供制备式XII化合物的方法：[0173]XII[0174]包括使式X化合物：[0175：入：[0176]与式XIII化合物：[0177]XIII[0178]在钯催化剂、碱和溶剂存在下反应，以形成式XII化合物。[0179]其中：[0180]*为手性碳；[0181]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基；[0182]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和Ci-6氟烷基;且[0183]Rc和Rd每个独立地为!1或-6烷基;或[0184]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环;且[0185]PjPP2每个独立地为保护基。[0186]本发明进一步提供制备式XVI化合物的方法：[0187][0188]包括：[0189]a使式XVIII化合物[0190][0191]与约域更多当量的-6烧基格氏试剂或-6烧基锂试剂反应，接着以约域更多当量的式XVII化合物进行处理：[0192][0193]以及[0194]⑹任选地，再保护步骤a的产物，从而得到式XVI化合物；[0195]其中：[0196]P3为保护基；[0197]X3为卤素；[0198]RAC1-S烧基;且[0199]m为选自1和2的整数。[0200]本发明还提供制备式XIa化合物的方法：[0201][0202]包括将式F-I化合物：[0203][0204]以酸在足以形成式XIa化合物的条件下进行处理。[0205]本发明进一步提供包含式I化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[0206][0207]其中：[0208]*表示手性碳；[0209]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0210]R2选自-C=0-NH2、-C=0O-R3、-C=0OH和-C=0Η;[0211]R3选自d-4烷基或Ci-4氟烷基;且[0212]P1为保护基。[0213]本发明还提供式II化合物：[0214][0215]其中：[021ό]R1选自C3-7环烧基、Ci-6烧基和Ci-6氟烧基；[0217]R2选自-C=0-NH2和-C=0O-R3;[0218]R3选自d-4烷基或Ci-4氟烷基;且[0219]P1为保护基。[0220]本发明还涉及以下项目。[0221]1.—种制备包含式I化合物的组合物的方法：[0222][0223]包括使式II化合物：[0224][0225]在氢化催化剂存在下与氢气反应；[0226]其中：[0227]*表示手性碳；[0228]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0229]R2选自-c=〇-NH2、-C=0O-R3和氰基；[0230]R3选自Ch烧基或Ch氟烷基;且[0231]P1为保护基。[0232]2.根据项目1所述的方法，其中所述组合物包含式I化合物的对映体过量的R-或S-对映体;且所述氢化催化剂为具有L1的钌或铑催化剂;其中L1S手性膦配体。[0233]3.根据项目2所述的方法，其中所述对映体的过量等于或大于约90%。[0234]4.根据项目2所述的方法，其中所述对映体的过量等于或大于约99%。[0235]5.根据项目2所述的方法，其中所述手性膦配体选自以下之一：[0237]6.根据项目2所述的方法，其中所述组合物包含式I化合物的对映体过量的（S-对映体。[0238]7.根据项目6所述的方法，其中L1选自以下配体之一：[0240]8.根据项目2所述的方法，其中所述组合物包含式I化合物的对映体过量的R-对映体。[0241]9.根据项目8所述的方法，其中L1选自以下配体之一：[0243]10.根据项目2至9中任一项所述的方法，其中所述产物为式Ia化合物：[0245]其中：[0246]*表示手性碳；[0247]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0248]P1为保护基。[0249]11.根据项目2至9中任一项所述的方法，其中R2为-C=0-NH2。[0250]12.根据项目11所述的方法，进一步包括使所述式I化合物在脱水条件下反应，以形成式Ia化合物：[0252]其中：[0253]*表示手性碳；[0254]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0255]P1为保护基。[0256]13.根据项目12所述的方法，其中所述脱水条件包括在三乙胺存在下的三氯乙酰〇[0257]14.根据项目2至9中任一项所述的方法，其中R2为-C=00_R3。[0258]15.根据项目2至9中任一项所述的方法，其中R2为-C=00CH3。[0259]16.根据项目14或15所述的方法，进一步包括使所述式I化合物与金属氢氧化物反应，以形成式Ic化合物：[0261]其中：[0262]*表示手性碳；[0263]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0264]P1为保护基。[0265]17.根据项目16所述的方法，其中所述金属氢氧化物为碱金属氢氧化物或碱土氢氧化物。[0266]18.根据项目16所述的方法，其中所述金属氢氧化物为氢氧化锂。[0267]19.根据项目16至18中任一项所述的方法，进一步包括使所述式Ic化合物与氨或氢氧化铵在偶合试剂存在下反应，以形成式Ib化合物：[0269]其中：[0270]*表示手性碳；[0271]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0272]P1为保护基。[0273]20.根据项目19所述的方法，其中所述偶合剂为N，N-羰基二咪唑。[0274]21.根据项目19至20中任一项所述的方法，进一步包括使所述式Ib化合物在脱水条件下反应，以形成式Ia化合物：[0276]其中：[0277]*表示手性碳；[0278]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0279]P1为保护基。[0280]22.根据项目2至21中任一项所述的方法，其中P1S-CH2OC=0-CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33〇[0281]23.根据项目2至22中任一项所述的方法，其中R1为环戊基。[0282]24.—种制备包含式Id化合物的对映体过量的（R-或（S-对映体的组合物的方法：[0284]包括使式IV化合物：[0286]与式V化合物：[[0288]在手性胺与有机酸存在下反应；[0289]其中：[0290]*表示手性碳；[0291]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0292]P1为保护基。[0293]25.—种制备包含式VI化合物的对映体过量的（R-或（S-对映体的组合物的方法：[[0295]包括使式V化合物：[0297]与式VII化合物：[0299]在手性胺与有机酸存在下反应；[0300]其中表示手性碳；[0301]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0302]X1S卤素。[0303]26.根据项目24或25所述的方法，其中所述有机酸为对-甲苯磺酸。[0304]27.根据项目24至26中任一项所述的方法，其中所述手性胺为式A-I化合物的⑻-或⑸-对映体：[[0306]A-I[0307]其中：[0308]父为〇¥3丫4，且¥为〇¥5¥6;或[0309]X为S或NY7,且Y为CY5Y6;或[0310]X为CY3Y4,且Y为S;[0311]卩為出每个独立地选自H、-6烧基、C1-適烷基、羧基、-6烧基羧酰胺、-6烧氧羰基和苯基;其中所述-6烷基、-6齒烷基、-6烷基羧酰胺、-6烷氧羰基和苯基每个任选被1、2或3个独立地选自羟基、羧基、三--6烷基甲硅烷基、三--6烷基甲硅烷氧基、C6-1芳基、C6-10芳氨基、Ci-9杂芳基和^-9杂芳氨基的基团取代;其中所述C6-1Q芳基、C6-1Q芳氨基、Ci-9杂芳基和-9杂芳氨基每个任选被1、2、3或4个独立地选自卤素、-6烷基和-6卤烷基的基团取代；且Yi、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6每个独立地选自H、羟基、羧基、C1-S烷基、-6卤烷基、-6烷氧羰基和苯基;或[0312]Y^Y2合起来形成氧代基;或[0313]Y3与Y4合起来形成氧代基;或[0314]Y^Y6合起来形成氧代基;或[0315]YjPY2与它们所连接的碳原子合起来形成5-或6-员环烷基环;或[0316]QjPY5与它们所连接的碳原子合起来形成5-或6-员环烷基环。[0317]28.根据项目24至26中任一项所述的方法，其中所述手性胺为式A-2化合物的⑻-或⑸-对映体：A-2[0319]其中[0320]*为具有⑻-或⑸-构型的手性碳；[0321]Ar^PAr2每个独立地为任选被1、2、3或4个独立地选自-6烷基和-6卤烷基的基团取代的C6-1Q芳基；[0322]每个Ra独立地选自-6烷基;且[0323]Rb选自Η、-6烷基和C1-適烷基。[0324]29.根据项目28所述的方法，其中：[0325]ArjPAr2每个独立地为任选被1、2、3或4个独立地选自甲基和三氟甲基的基团取代的苯基；[0326]每个1?4虫立地选自甲基、乙基或叔丁基；[0327]办为札[0328]30.根据项目24至26中任一项所述的方法，其中所述手性胺为选自以下的化合物的⑻-或⑸-对映体:脯氨酸、脯氨酰胺、脯氨酰基-L-亮氨酸、脯氨酰基-L-丙胺酸、脯氨酰基甘氨酸、腫氨酰基-L-苯丙胺酸、二苯基P比略烧、二节基P比略烧、N-1-甲基乙基-P比略烧羧酰胺、2-苯胺基甲基吡咯烷、2-[双3，5-二甲基苯基）甲基]吡咯烷、二苯基吡咯烷-2-基）甲醇、脯氨醇、4-噻唑烷羧酸、反式-3-羟脯氨酸、反式-4-羟脯氨酸、4-苄基-1-甲基-咪唑烷-2-羧酸、1-甲基-4-苯基-咪唑烷-2-羧酸、4,5-八氢-苯并咪唑-2-羧酸、4,5-二苯基-咪唑烷-2-羧酸、Nl-甲基-3-苯基丙烷-1,2-二胺、1，2_二苯基乙二胺、1-甲基-4-1-甲基-IH-吲哚-3-基甲基-咪唑烷-2-羧酸、4-苄基-1-甲基-咪唑烷-2-羧酸、1，2-环己二胺、2-苯基-噻唑烷-4-羧酸、叔亮氨酸甲酯、5-苄基-2，2，3-三甲基-咪唑啉-4-酮、脯氨酸甲酯、4，5-二苯基咪唑烷、2-环己基-4，5-二苯基咪唑烷、2-{双-[3，5-双三氟甲基苯基]-三甲基甲硅烷氧基-甲基}_吡咯烷、2-{双-[3，5-二甲基苯基]-三甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷、2-{二苯基-三甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷、2-{:双[萘-2-基]-三甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷、2-{叔丁基二甲基甲硅烷氧基-二苯基-甲基}-吡咯烷、2-{双-[3,5-双三氟甲基）苯基]-三乙基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷和2-{双-[3，5-双三氟甲基苯基]-乙基-二甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烧;其中所述的⑻-或⑸-构型在邻近所述化合物中的NH基团的碳上。[0329]31.根据项目27至30中任一项所述的方法，其中所述手性胺为⑻-对映体。[0330]32.根据项目24至26中任一项所述的方法，其中所述手性胺选自以下化合物之一：[0331]33.根据项目24至32中任一项所述的方法，其中所述对映体的过量等于或大于约90%〇[0332]34.根据项目24至32中任一项所述的方法，其中所述对映体的过量等于或大于约99%〇[0333]35.根据项目24所述的方法，进一步包括以氨或氢氧化铵和碘处理所述式Id化合物，以形成所述式Ia化合物：[0335]其中：[0336]*表示手性碳；[0337]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0338]P1为保护基。[0339]36.根据项目25所述的方法，进一步包括以氨或氢氧化铵和碘处理所述式VI化合物，以形成所述式VIII化合物：[0341]其中：[0342]*表示手性碳；[0343]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0344]P1为保护基;且[0345]X1S卤素。[0346]37.根据项目36所述的方法，进一步包括使所述式VIII化合物与式B-I化合物反应：I[0348]以形成式IX化合物：[[0350]其中：[0351]*表示手性碳；[0352]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0353]基;且[0354]R。和Rd每个独立地选自萌卩-6烷基;或[0355]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0356]38.根据项目37所述的方法，其中所述式B-I化合物为4，4，5，5，4’，4’，5’，5’-八甲基-[2，2’]双[1，3，2-二氧硼戊环基]。[0357]39.根据项目37或38所述的方法，进一步包括使所述式IX化合物与式X化合物：[0359]在钯催化剂和碱存在下反应，以形成式Ia化合物：[C[0361]其中：[0362]*表示手性碳；[0363]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0364]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基；[0365]P1为保护基;且[0366]R。和Rd每个独立地选自!1和-6烷基;或[0367]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0368]40.根据项目24、26至35和24至39中任一项所述的方法，其中P1S-CH2OC=0CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33〇[0369]41.根据项目24至40中任一项所述的方法，其中R1为环戊基。[0370]42.—种包含式IX化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[0372]其中：[0373]*表示手性碳；[0374]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0375]Rc和Rd每个独立地为-6烷基;或[0376]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0377]43.根据项目42的组合物，其中R1为环戊基。[0378]44.—种制备根据项目42或43所述的组合物的方法，包括使包含式IX化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式IX化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物。[0379]45.根据项目44所述的方法，其中所述流动相包含乙醇和己烷，其中所述乙醇的存在量为约25体积％至约10体积％。[0380]46.根据项目42或45所述的方法，其中所述色谱单元为模拟移动床SMB色谱单元，其装有一组八个柱或手性柱单元，其中每个柱以手性固定相填充。[0381]47.根据项目46所述的方法，其中所述手性固定相为纤维素改性的手性固定相。[0382]48.根据项目44至47中任一项所述的方法，其中所述式IX化合物如下式所示：[[0384]49.根据项目44至48中任一项所述的方法，进一步包括使式IX化合物：[[0386]与式XI化合物：[[0388]在钯催化剂、碱和溶剂存在下反应，以形成包含式III化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[I[0390]其中：[0391]*为手性碳；[0392]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基；[0393]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0394]R。和Rd每个独立地为-6烷基;或[0395]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0396]50.根据项目44至48中任一项所述的方法，进一步包括使式IX化合物：[[0398]与式X化合物：[0[0400]在一些条件下在钯催化剂、碱和溶剂存在下反应足够的一段时间，以形成包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[[0402]其中：[0403]*表示手性碳；[0404]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0405]Rc和Rd每个独立地为-6烷基;或[0406]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环；[0407]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基;且[0408]P1为保护基。[0409]51.—种制备包含式Ia化合物的外消旋物的组合物的方法：[[0411]包括：[0412]a将包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或（S-对映体的组合物以式D-I化合物：[[0414]在第一种碱存在下，在足以形成式IV化合物的条件下进行处理：[04[0416]以及[0417]⑹在第二种碱存在下使式IV化合物与式D-I化合物反应；[0418]其中：[0419]*为手性碳；[0420]P1为保护基;且[0421]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[0422]52.根据项目51所述的方法，其中所述第一种碱为碳酸铯。[0423]53.根据项目51或52所述的方法，其中所述第二种碱为1，8-二氮杂双环[5.4.0]十——7-烯DBU〇[0424]54.—种制备包含式Ia化合物的外消旋物的组合物的方法：[0426]包括将包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物以式D-I化合物：[0428]在碱存在下，在足以形成所述式Ia化合物的所述外消旋物的条件下进行处理；[0429]其中：[0430]*为手性碳；[0431]P1为保护基;且[0432]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[0433]55.根据项目54所述的方法，其中所述碱为叔丁醇钾。[0434]56.根据项目51至55中任一项所述的方法，进一步包括制备包含式Ia化合物的对映体过量的R-或S-对映体的组合物：I[0436]包括使包含式Ia化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物；[0437]其中：[0438]*为手性碳；[0439]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0440]P1为保护基。[0441]57.根据项目56所述的方法，其中所述流动相包含异丙醇和己烷，其中所述异丙醇的存在量为约25体积％至约10体积％。[0442]58.根据项目56至57中任一项所述的方法，其中所述色谱单元为模拟移动床SMB色谱单元，其装有一组八个柱或手性柱单元，其中每个柱以手性固定相填充。[0443]59.根据项目51至58中任一项所述的方法，其中P1S-CH2OC=0-CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33〇[0444]60.根据项目51至60中任一项所述的方法，其中R1为环戊基。[0445]61.—种制备包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或（S-对映体的组合物的方法：[0447]包括：[0448]a使包含式Ia化合物的外消旋物的组合物与手性酸在溶剂存在下反应，以形成式Ia化合物的盐；[0449]⑹分离组合物，所述组合物包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或（S-对映体的手性盐；以及[0450]c将所述手性盐以碱处理，以形成包含式Ia化合物的对映体过量的（R-或（S-对映体的组合物；[0451]其中：[0452]*为手性碳；[0453]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0454]P1为保护基。[0455]62.根据项目61所述的方法，其中所述手性酸选自光学活性形式的扁桃酸、2-氯扁桃酸、樟脑磺酸、酒石酸、乳酸、苹果酸、3-溴樟脑-8-磺酸、3-溴樟脑-10-磺酸、10-樟脑磺酸、二苯甲酰酒石酸、二-对-甲苯酰酒石酸、2-氨基-7，7-二甲基双环[2，2，1]庚-1-亚甲基磺酸和2-丙烯酰胺-7，7-二甲基双环[2，2，1]庚-1-亚甲基磺酸。[0456]63.根据项目61所述的方法，其中所述手性酸为+_二苯甲酰基-D-酒石酸。[0457]64.根据项目61至63中任一项所述的方法，其中P1S-CH2OC=0-CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33〇[0458]65.根据项目61至64中任一项所述的方法，其中R1为环戊基。[0459]66.—种制备式XII化合物的方法：[0461]包括使式X化合物：[[0463]与式XIII化合物：[[0465]在钯催化剂、碱和溶剂存在下反应，以形成式XII化合物；[0466]其中：[0467]*为手性碳；[0468]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基；[0469]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0470]R。和Rd每个独立地为!1或-6烷基;或[0471]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环;且[0472]PjPP2每个独立地为保护基。[0473]67.根据项目66所述的方法，其中所述式XIII化合物如下式所示：[I[0475]68.根据项目66至67中任一项所述的方法，其中P1S-CH2OC=0-CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33〇[0476]69.根据项目66至68中任一项所述的方法，其中P2为1_乙氧基）乙基。[0477]70.根据项目10、12、13、21、35、39、50和56至63中任一项所述的方法，进一步包括使所述式Ia化合物在脱保护条件下反应，以形成式III化合物：[0479]*为手性碳；[0480]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0481]P1为保护基。[0482]71.根据项目70所述的方法，其中P^-CH2OC=0CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33。[0483]72.根据项目70或71所述的方法，其中R1为环戊基。[0484]73.根据项目70或71所述的方法，其中所述式III化合物为3R-3-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丙腈。[0485]74.根据项目70至73中任一项所述的方法，进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成所述式III化合物的磷酸盐。[0486]75.—种制备式XVI化合物的方法：[0488]包括：[0489]a使式XVIII化合物[[0491]与约域更多当量的-6烧基格氏试剂或-6烧基锂试剂反应，接着以约域更多当量的式XVII化合物进行处理：[Χ¥Π[0493]以及，[0494]⑹任选地，再保护步骤a的产物，从而得到式XVI化合物；[0495]其中：[0496]P3为保护基；[0497]X3为卤素；[0498][0499]m为选自1和2的整数。[0500]76.根据项目75所述的方法，其中X3为碘基或溴基。[0501]77.根据项目75或76所述的方法，其中P3为1-乙氧基）乙基。[0502]78.根据项目75至77中任一项所述的方法，其中所述式XVI化合物如下式所示：I[0504]79.根据项目75至78中任一项所述的方法，进一步包括制备式XVIII化合物的方法，包括保护式XIX化合物：[[0506]其中：[0507]P3为保护基；[0508]X3为卤素；[0509]且m为选自1和2的整数。[0510]80.根据项目75至79中任一项所述的方法，进一步包括通过一种方法制备所述式XIX化合物，所述一种方法包括使IH-吡唑与卤化剂反应，其中：[0511]心为齒素;且[0512]m为选自1和2的整数。[0513]81.根据项目75至80中任一项所述的方法，其中所述卤化剂选自N-溴代琥珀酰亚胺或N-碘代琥珀酰亚胺。[0514]82·—种制备式XIa化合物的方法：[0516]包括将式F-I化合物：[[0518]以酸在足以形成式XIa化合物的条件下进行处理。[0519]83.根据项目82所述的方法，其中所述酸为浓盐酸水溶液。[0520]84.根据项目82至83中任一项所述的方法，进一步包括通过一种方法制备所述式F-I化合物，所述一种方法包括使式F-2化合物：[C[0522]与约1或更多当量的具有式-CH2OCH3叶立德的Wittig型试剂在碱存在下反应。[0523]85.根据项目82至84中任一项所述的方法，进一步包括通过一种方法制备所述式F-I化合物，所述一种方法包括使式F-3化合物：[0525]与约2或更多当量的氨在溶剂中反应。[0526]86.根据项目82至85中任一项所述的方法，进一步包括通过一种方法制备所述式F-I化合物，所述一种方法包括使式F-4化合物：[0528]与氯化剂反应。[0529]87.—种包含式I化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[C[0531]其中：[0532]*表示手性碳；[0533]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0534]R2选自-C=0-NH2、-C=0O-R3、-C=0OH和-C=0H;[0535]R3选自-4烧基或-4氟烷基;且[0536]P1为保护基。[0537]88.根据项目87的组合物，其中P^-CH2OC=0CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33。[0538]89.根据项目87或88的组合物，其中R1为环戊基。[0539]90.—种式II化合物：[0541]其中：[0542]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0543]R2选自-C=0-NH2和-C=0O-R3;[0544]R3选自-4烧基或-4氟烷基;且[0545]P1为保护基。[0546]91.根据项目90的化合物，其中P^-CH2OC=0CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33。[0547]92.根据项目90或91的化合物，其中R1为环戊基。[0548]93.—种制备包含式III’化合物的等于或大于90%对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[0550]包括：[0551]a将式XI’化合物：I[0553]以氢化钠和N-特戊酰氧甲基氯处理，以形成式X’化合物：[[0555]⑹将所述式X’化合物以式XIII’化合物：I[0557]在Pd三苯基膦4、碳酸钾和溶剂存在下进行处理，以形成式XII’化合物：[[0559]c使所述式XIΓ化合物在脱保护条件下反应，从而得到式IV’化合物：[[0561]d使所述式IV〃化合物与式XIV’化合物：[0563]在1，8-二氮杂-双环[5.4.0]十一-7-烯存在下反应，从而得到式IΓ化合物：[[0565]e使所述式II’化合物与氢气在[RhCOD2]CF3S03和选自以下的手性膦配体存在下反应：[0567]以形成式Γ化合物：[0569]f使所述式Γ化合物在脱保护条件下反应，以形成所述式III’化合物；[0570]其中*表示手性碳。[0571]94.根据项目93所述的方法，进一步包括制备所述式XI’化合物：I[0574]包括：[0575]⑴使F-4化合物：I[[0577]与约三至约五当量的POCl3在约一至约二当量的二甲基甲酰胺存在下反应，以形成式F-3化合物：I[0579]ii使所述F-3化合物与约二当量的氨在甲醇中反应，以形成式F-2化合物：[[0581]iii使所述式F-2化合物与约1至约1.5当量的式[Ph3P+CH2OCH3]Cl-的Wittig型试剂在约1至约1.5当量的叔丁醇钾存在下反应，其中Ph为苯基，以形成式F-I化合物：F-i丨以及[0583]iv将所述式F-I化合物以浓盐酸水溶液在四氢呋喃中回流处理，以形成式XI’化合物。[0584]95.根据项目93所述的方法，进一步包括制备所述式XIIΓ化合物：[0586]包括：[0587]i使IH-吡唑与N-溴代琥珀酰亚胺反应，以形成式XIX’化合物；[0589]ii保护所述式XIX化合物，以形成式XVIII’化合物：['靡ΙΓ;ei及[0591]iii使所述式XVIII’化合物与约一或多当量的异丙基氯化镁反应，接着以约一或多当量的式XVII’化合物进行处理：[IXVIF[0593]以形成式XIII’化合物。[0594]96.根据项目93所述的方法，进一步包括制备所述式XIIΓ化合物：[0596]包括：[0597]⑴保护4-碘-IH-吡唑，以形成式XVIir化合物：XVIII”；以及[0599]ii使式XVIII"化合物与约一或多当量的异丙基氯化镁在四氢呋喃中反应，接着以约一或多当量的式XVII’化合物进行处理：[XVir[0601]以形成式XIII’化合物。[0602]97.根据项目93所述的方法，其中在步骤e中：[0603]所述溶剂为2，2，2-三氟乙醇TFE;[0604]所述氢化催化剂装填量为约0.005至约0.01摩尔％;[0605]所述式II化合物对所述氢化催化剂的比例为约200001至约100001;[0606]氢压力为约7至约60巴；[0607]反应在约室温至约75°C的温度下运行；[0608]运行反应，直到所述式II化合物向所述式化合物的转化率约等于或大于99.5%;且[0609]反应约10至约25小时。[0610]98.—种制备包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：I[0612]包括：[0613]a将式XI’化合物：[0615]以氢化钠和2-三甲基甲硅烷基）乙氧基甲基进行处理，以形成式X"化合物：[[0617]⑹将所述式X"化合物以式XIII’化合物：[Λ丄Il[0619]在Pd三苯基膦4、碳酸钾和溶剂存在下进行处理，以形成式χπ〃化合物：[0621]c使所述式ΧΙΓ化合物在脱保护条件下反应，以形成式IV"化合物：[0623]d使所述式IV"化合物与式D-Γ化合物：I[0625]在足以形成包含式Γ化合物的外消旋物的组合物的条件下反应：[I[0627]e使包含所述式1〃化合物的所述外消旋物的所述组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含所述式Γ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；以及[0628]f使所述式1〃化合物与四氟硼酸锂、接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物；[0629]其中*为手性碳。[0630]99.—种制备包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[0632]包括：[0633]a将包含式Γ化合物的对映体过量的⑸-对映体的组合物：[[0635]以式D-Γ化合物：[[0637]在碳酸铯存在下在乙腈中，在足以形成式Γ化合物的外消旋物的条件下进行处理；[0638]⑹使包含所述式1〃化合物的所述外消旋物的所述组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含所述式Γ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；以及[0639]C使所述式1〃化合物与四氟硼酸锂、接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物；[0640]其中*为手性碳。[0641]100.—种制备包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[0644]包括：[0645]a将式XI’化合物：[[0647]以氢化钠和2-三甲基甲硅烷基）乙氧基甲基进行处理，以形成式X"化合物：I[0649]⑹将所述式X"化合物以式XIII’化合物：[[0651]在Pd三苯基膦4、碳酸钾和溶剂存在下进行处理，以形成式XII"化合物：[0654]c使所述式ΧΙΓ化合物在脱保护条件下反应，以形成式IV"化合物：[[0656]d使所述式IV〃化合物与式D-Γ化合物：[[0658]在足以形成包含式Γ化合物的外消旋物的组合物的条件下反应：[0660]e使包含所述式1〃化合物的所述外消旋物的所述组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含所述式Γ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；以及[0661]f使所述式1〃化合物与三氟化硼乙醚化物、接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式ΠΓ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；[0662]其中*为手性碳。[0663]101.—种制备包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[0665]包括：[0666]a将包含式Γ化合物的对映体过量的⑸-对映体的组合物：[0668]以式D-Γ化合物：[0670]在碳酸铯存在下在乙腈中，在足以形成式Γ化合物的外消旋物的条件下进行处理；[0671]⑹使包含所述式1〃化合物的所述外消旋物的所述组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含所述式Γ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；以及[0672]C使所述式1〃化合物与三氟化硼乙醚化物、接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式ΠΓ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；[0673]其中*为手性碳。[0674]102.—种制备包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[0676]包括:使所述式I〃化合物：[。丨[0678]与三氟化硼乙醚化物、接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物;其中*为手性碳。[0679]103.—种制备（3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐的方法，包括使3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈与磷酸在2-丙醇和二氯甲烷存在下反应。[0680]104·—种纯化3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐的方法，包括使3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐从包含甲醇、2-丙醇和正-庚烷的溶剂混合物中再结晶。[0681]105.根据项目104所述的方法，其中将所述2-丙醇和正-庚烷添加至3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐在甲醇中的混合物里。具体实施方案[0682]在本专利说明书中的不同位置，以组或范围的方式公开本发明化合物的取代基。具体旨在表示，本发明包括这种组和范围的成员的每种单独的亚组合。例如，术语“"Ch烧基具体旨在个别地公开甲基、乙基、C3烧基、C4烧基、C5烧基和C6烧基。[0683]进一步理解的是，为清楚起见，本发明的某些特征是就单独的实施例描述的，但也可以提供单个实施例的组合。反过来，为简单起见，本发明的各种特征是就单个的实施例描述的，但也可以单独地提供或者提供任何适当的亚组合。[0684]术语“η-员”（其中η为整数通常描述的是在一部分中形成环的原子数，其中形成环的原子数为η。例如，呱啶基为6-员杂环烷基环的实例，而1，2,3,4_四氢-萘为10-员环烷基的实例。[0685]对于其中变量出现超过一次的本发明化合物而言，每个变量可为独立地选自定义该变量的基团的不同的部分。例如，在描述一个结构具有两个同时存在于相同化合物上的R基团的情况下，两个R基团可表示独立地选自关于R所定义的基团的不同的部分。在另一实例中，当任选地按以下形式指示多重取代基时：[[0687]则应理解的是，取代基R可在环上出现p次，每次出现的R可以为不同的部分。应理解的是，每个R基团可取代连接至环原子的任何氢原子，包括CH2n氢原子的一或两个。另夕卜，在上文实例中，若是定义变量Q包括氢，如当Q为CH2、NH等时，任何不固定的取代基如在上文实例中的R可取代Q变量的氢以及在环的任何其它非变量部分中的氢。[0688]对于其中变量出现超过一次的本发明化合物而言，每个变量可以为独立地选自定义该变量的基团的不同的部分。例如，在描述一个结构具有两个同时存在于相同化合物上的R基团的情况下，两个R基团可表示独立地选自关于R所定义的基团的不同的部分。[0689]在本文中使用的用语“任选取代的”表示未取代的或取代的。在本文中使用的术语“取代的”表示氢原子被移除并且被取代基取代。在本文中使用的用语“被氧代基取代”表示两个氢原子被从碳原子上移除，并且被通过双键结合至碳原子的氧取代。应理解的是，在给定原子上的取代受限于原子价。[0690]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“烷基”是指可以为直链或支链的饱和烃基。在一些实施例中，烷基含有1至12、1至8或1至6个碳原子。烷基部分的实例包括但不限于化学基团，如甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正-丁基、叔丁基、异丁基、仲-丁基；高碳同系物，如2-甲基-1-丁基、正-戊基、3-戊基、正-己基、1，2,2_三甲基丙基、正-庚基、正-辛基等。在一些实施例中，烷基部分为甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正-丁基、异丁基、叔丁基、正-戊基、异戊基、新戊基、正-己基或2,4,4_三甲基戊基。在一些实施例中，烷基部分为甲基。[0691]在本文中使用的术语“烷基羧酰胺”或“烷氨基羰基”是指式-CO-NH烷基）的基团。在一些实施例中，每个烷基具有1至6个碳。[0692]在本文中单独使用或与其它术语并用的“烯基”是指具有一个或多个碳-碳双键的烷基。在一些实施例中，烯基部分含有2至10或2至6个碳原子。烯基的实例包括但不限于乙稀基、正-丙稀基、异丙稀基、正-丁稀基、仲-丁稀基等。[0693]在本文中单独使用或与其它术语并用的“炔基”是指具有一个或多个碳-碳三键的烷基。炔基的实例包括但不限于乙炔基、丙炔-1-基、丙炔-2-基等。在一些实施例中，炔基部分含有2至10或2至6个碳原子。[0694]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“烷氧基”是指式-0-烷基的基团。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基例如正-丙氧基和异丙氧基）、叔-丁氧基等。在一些实施例中，每个烷基具有1至6个碳。[0695]在本文中使用的术语“烷氧羰基”是指式-C⑼0-烷基的基团。在一些实施例中，每个烷基具有1至6个碳。[0696]在本文中使用的术语“三-Cn-m烷基甲硅烷基”是指式-Si烷基3基团，其中每个烷基具有ngm个碳原子。在一些实施例中，每个烷基具有丨至6个碳。[0697]在本文中使用的术语“三-Cn-m烷基甲硅烷氧基”是指式-OSi烧基3基团，其中每个烷基具有η至m个碳原子。在一些实施例中，每个烷基具有1至6个碳。[0698]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“芳基”是指单环或多环例如具有2、3或4个稠环）芳族烃部分，如但不限于苯基、1-萘基、2-萘基、蒽基、菲基等。在一些实施例中，芳基部分可进一步稠合至环烷基环。在一些实施例中，芳基具有6至20个碳原子、约6至10个碳原子或约6至8个碳原子。[0699]在本文中使用的术语“芳氨基”是指式-NH芳基的基团。[0700]在本文中使用的术语“羧基”是指式-C⑼OH基团。[0701]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“环烷基”是指非芳环状烃部分，其可任选含有一个或多个亚烯基或亚炔基作为环结构的一部分。环烷基可包括单-或多环状例如具有2、3或4个稠合或共价连接的环环系统。环烷基的一个或多个成环碳原子可被氧化以形成羰基键合。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己稀基、环己二稀基、环庚三稀基、降冰片基、降薇基、降味基norcarnyl、金刚烧基等。在一些实施例中，环烷基为环戊基。[0702]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“卤烷基”是指具有一个卤原子至2n+1个卤原子的烷基，卤原子可以是相同或不同的，其中“η”为烷基中的碳原子数。[0703]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“氟化烷基”是指具有一个氟基原子至2η+1个氟基原子的烷基，氟基原子可以是相同或不同的，其中“η”为烷基中的碳原子数。在一些实施例中，氟化烷基为三氟甲基。[0704]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“卤基”和“卤素”是指氟基、氯基、溴基和碘基。[0705]在本文中单独使用或与其它术语并用的术语“杂芳基”、“杂芳基环”或“杂芳基团”是指单环或多环例如具有2、3或4个稠环芳族烃部分，具有一个或多个选自氮、硫和氧的杂原子环成员。在一些实施例中，杂芳基环或基团具有1、2、3或4个选自Ν、0或S的杂原子。在一些实施例中，杂芳基环或基团具有1或2个环。当杂芳基含有不止一个杂原子环成员时，杂原子可以是相同或不同的。在一些实施例中，杂芳基部分可进一步稠合至环烷基或杂环烷基环。杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、异噁唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、1，2，4-噻二唑基、异噻唑基、苯并噻吩基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、吲哚啉基等。在一些实施例中，杂芳基具有1至约20个碳原子，在进一步的实施例中，具有约3至约20个碳原子。在一些实施例中，杂芳基含有3至约14个、4至约14个、3至约7个或5至6个成环原子。在一些实施例中，杂芳基具有1至约4个、1至约3个或1至2个杂原子。连接杂芳基在本文中称为“亚杂芳基”。[0706]在本文中使用的术语“杂芳氨基”是指式-NH杂芳基的基团。[0707]在本文中使用的“杂环烷基”是指非芳族杂环，包括环化的烷基、烯基和炔基，其中一个或多个成环碳原子被杂原子如〇、Ν或S原子取代。杂环烷基包括单环和多环例如具有2、3或4个稠环系统以及螺环。作为例子的“杂环烷基”包括吗啉代、硫代吗啉代、昵嗪基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、2,3-二氢苯并呋喃基、I，3-苯并二噁茂、苯并-I，4_二噁烷、呱啶基、吡咯烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、咪唑烷基等。杂环烷基的成环碳原子和杂原子可任选被氧代基或硫代基取代。还被包括在杂环烷基定义中的是具有一个或多个稠合至非芳族杂环（即具有与非芳族杂环共享的化学键的芳环的部分，例如杂环的邻苯二甲酰亚胺基、萘二甲酰亚胺基和苯并衍生物。可经成环碳原子或成环杂原子连接杂环烷基。可经任何成环原子包括稠合芳环的成环原子连接含有稠合芳环的杂环烷基。在一些实施例中，杂环烷基具有1至约20个碳原子，在进一步实施例中，具有约3至约20个碳原子。在一些实施例中，杂环烷基含有3至约14个、4至约14个、3至约7个或5至6个成环原子。在一些实施例中，杂环烷基具有1至约4个、1至约3个或1至2个杂原子。在一些实施例中，杂环烷基含有0至3个双键或三键。在一些实施例中，杂环烷基含有0至2个双键或三键。连接杂环烷基在本文中称为“亚杂环烷基”。[0708]在本文中使用的术语“氧代基”是指式=0基团。[0709]在本文中使用的术语“三氟甲磺酸酯基团”是指三氟甲基磺酰氧基。[0710]在本文中使用的术语“甲苯磺酸酯基团”是指对-甲苯基磺酰氧基。[0711]可根据本领域中已知的任何适当方法监测本文中所述的过程。例如，可通过光谱装置监测产物的形成，如核磁共振光谱（例如1H或13C、红外光谱或分光光度法测定（例如UV-可见光）；或通过色谱法，如高效液相色谱法HPLC或薄层色谱法TLC或其它相关技术。[0712]在本文中使用的术语“反应”是本领域中已知使用的，一般是指将化学试剂合在一起，其方式使得它们在分子水平上相互作用，从而实现化学或物理转变。在一些实施例中，反应涉及两种试剂，其中相对于第一种试剂使用一或多当量的第二种试剂。本文中所述方法的反应步骤可进行一段时间，并且在适合制备所确定产物的条件下进行。[0713]在本文中使用的术语“手性色谱”或“手性色谱柱”或“手性柱”涉及分离溶于流动相中的对映体或非对映体的混合物的色谱装置或方法。当与任何前述的术语搭配使用术语“制备型”时，其表示该装置或方法的规模足以分离出相关数量的所需对映体或非对映体。适合于手性色谱的示例性分离方法包括分批模式和连续模式的HPLC高效液相色谱法）、SFC超临界流体色谱法），例如SMB模拟移动床），以及相关的技术。本发明的方法可利用分离外消旋化合物的任何色谱方法以产生光学纯的所需对映体。这种方法包括但不限于传统的单柱分批色谱法、连续色谱法或稳态顺序注射方法如在例如美国专利5，630，943和PCT公报WO9851391中所述）。连续色谱方法包括但不限于多柱连续色谱方法，包括如SMB之类的逆流色谱方法如在例如美国专利2，985，589、4，402，832和4，498，991中所述），或者是称为“Varicol™”方法的非稳态连续色谱方法如在例如美国专利6,136,198;6,375,839;6，413,419;和6,712,973中所述）。[0714]在对映体分离中，这些方法涉及使用手性固定相。非手性固定相可用于分离非对映体。术语“固定相”涉及相互作用剂涂布或固定于其上的合适的惰性载体材料。[0715]在本文中使用的术语“手性固定相”涉及其中相互作用剂为对映体富集的拆分剂的固定相，其例如通过涂布、通过化学结合或通过经由交联作用降低可溶性而固定在惰性载体材料上。合适的惰性载体材料优选为大孔的，例如交联聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯、氧化铝、硅藻石娃藻土）、石英、高岭土、氧化镁或二氧化钛。在一些实施例中，惰性载体材料包括硅胶。填充材料的平均粒径依色谱系统中流动的溶剂的体积流率不同而不同。在一些实施例中，其为1至300微米、2至100微米、5至75微米或10至30微米。适当选择填充材料的平均粒径有助于调节色谱过程中的压降及填充材料的效率。含有对映体富集的拆分剂的固定相的实例有例如基于合成或天然存在的手性聚合物的相、大环相、配体-交换相和pirkle型相。这种手性固定相是已知的，并且是可商购的。在一些实施例中，手性固定相以至少一种糖衍生物衍化，特别是选自直链淀粉、纤维素、壳聚糖、木聚糖、凝胶多糖、葡聚醣和异二果聚糖类的多糖的衍化多糖。在某些实施例中，手性固定相为直链淀粉或纤维素类多糖的成员。这些物质的酯和氨基甲酸酯是特别合适的。在其它实施例中，手性固定相选自纤维素氨基甲酸苯酯衍生物，如纤维素三3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯可以“Chiralcel®OD”或“Cllimlpak®IB”得自DaicelChemicalIndustries，Ltd.Daicel，其中氨基甲酸酯衍生物结合至纤维素主链）；纤维素三苯甲酸酯衍生物，如纤维素三4-甲基苯甲酸酯（可以“Chiralcel®〇J”得自Daicel;纤维素三桂皮酸酯（可以“Chiralcel®〇K”得自Daicel;淀粉酶苯基和苄基氨基甲酸酯衍生物，如直链淀粉三[S-苄基氨基甲酸α-甲酯]可以“〇11现11对让|^5”得自01^1;直链淀粉三（3,5-二甲基苯基）氨基甲酸酯（可以“Chiralpak®AD”或“Chiralpak®ΙΑ”得自Daicel，其中氨基甲酸酯衍生物结合至直链淀粉主链）；直链淀粉3,4_取代的氨基甲酸苯酯或直链淀粉4-取代的氨基甲酸苯酯；以及直链淀粉三桂皮酸酯。在一些实施例中，手性相为Pirkle相族的成员；（s，sWhelk-Gf1和R，RWhelk-〇K1可得自RegistechnologiesInc.是优选的。[0716]在本文中使用的术语“流动相”涉及待分离的对映体混合物溶于其中的溶剂或溶剂混合物。用于根据本发明的制备型色谱方法中的合适溶剂为已知用于分析型色谱法的溶剂。在液相色谱法中，通常使用非极性、极性质子或非质子溶剂或其混合物。在超临界色谱法中，优选使用二氧化碳和极性质子溶剂的混合物。合适的非极性溶剂例如为烃，例如正-戊烷、正-己烷、己烷、正-庚烷、庚烷、环己烷和甲基环己烷。合适的质子或非质子溶剂例如为醇，特别是甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、异丁醇、叔丁醇;醚，例如甲基叔丁基醚；酯，例如乙酸乙酯；卤化烃和乙腈。在溶剂中添加例如不到1%vV的水、酸（例如甲酸、乙酸、三氟乙酸或碱例如有机碱，如三乙胺可具有有利的作用。[0717]在液相色谱法中，可使用_：3醇或这些醇与烃例如正己烷或正庚烧）的混合物。在超临界色谱法中，可使用二氧化碳与极性质子溶剂例如甲醇）的混合物。可采用本领域中已知的方法筛选最佳溶剂组合）。当使用另一种固定相时，可以有不同的最佳溶剂组合。[0718]本发明的化合物还包括本文所公开的化合物的药学上可接受的盐。在本文中使用的术语“药学上可接受的盐”是指将药学上可接受的酸或碱添加至本文所公开的化合物所形成的盐。在本文中使用的用语“药学上可接受”是指从毒理学观点来看可接受用于制药应用且不会不利地与活性成分相互作用的物质。药学上可接受的盐包括单盐和双盐包括但不限于衍生自有机酸和无机酸的盐，例如但不限于乙酸、乳酸、柠檬酸、肉桂酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、苹果酸、草酸、丙酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、乙醇酸、丙酮酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、水杨酸、苯甲酸和类似的己知可接受的酸。合适的盐的列表可见于Remington’sPharmaceuticalSciences，第17版，MackPublishingCompany，Easton，Pa.，1985年，第1418页，和JournalofPharmaceuticalScience,66,21977中，上述文献每个以全文引用的方式并入本文。[0719]化合物的制备可涉及不同化学基团的保护和脱保护。本领域的技术人员可容易地确定是否需要保护和脱保护以及选择适当的保护基。保护基的化学性质可见于例如Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第4版，Ed.,WileySons,2007,该文献以全文引用的方式并入本文。对保护基的调节及本文中所述的形成与裂解方法可根据各种不同取代基情况进行调整。[0720]可在合适的溶剂中进行本文中所述方法的反应，有机合成领域的技术人员可容易地选择这些溶剂。在进行反应的温度下，例如在溶剂冰点至溶剂沸点范围内的温度下，合适的溶剂可以是基本上与起始物质（反应物）、中间体或产物无反应性的。给定的反应可在一种溶剂或不止一种溶剂的混合物中进行。根据具体的反应步骤，可以选择适于具体反应步骤的溶剂。在一些实施例中，可在不存在溶剂的情况下例如当至少一种试剂为液体或气体时进行反应。[0721]合适的溶剂可包括卤化溶剂，如四氯化碳、溴二氯甲烷、二溴氯甲烷、溴仿、氯仿、溴氯甲烷、二溴甲烷、丁基氯、二氯甲烷、四氯乙烯、三氯乙烯、1，1，1_三氯乙烷、1，1，2_三氯乙烧、1，1_二氯乙烧、氯丙烧、，，-二氣甲苯、1，2_二氯乙烧、1，2_二漠乙烧、六氣苯、1，2，4-三氯苯、1，2_二氯苯、氯苯、氟苯、它们的混合物等。[0722]合适的醚溶剂包括:二甲氧基甲烷、四氢呋喃、1，3-二噁烷、1，4-二噁烷、呋喃、二乙醚、乙二醇二甲醚、乙二醇二乙醚、二乙二醇二甲醚、二乙二醇二乙醚、三乙二醇二甲醚、苯甲醚、叔丁基甲基醚、它们的混合物等。[0723]合适的质子溶剂可包括（以下作为实例而非限制）水、甲醇、乙醇、2-硝基乙醇、2-氟乙醇、2,2,2_三氟乙醇、乙二醇、1-丙醇、2-丙醇、2-甲氧基乙醇、1-丁醇、2-丁醇、异-丁醇、叔-丁醇、2-乙氧基乙醇、二乙二醇、1-戊醇、2-戊醇或3-戊醇、新-戊醇、叔-戊醇、二乙二醇单甲醚、二乙二醇单乙醚、环己醇、苯甲醇、苯酚或甘油。[0724]合适的非质子溶剂可包括（以下作为实例而非限制）四氢呋喃（THF、N，N_二甲基甲酰胺DMF、N，N-二甲基乙酰胺DMA、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2IH-嘧啶酮DMPU、1，3-二甲基-2-咪唑烷酮DMI、N-甲基吡咯烷酮NMP、甲酰胺、N-甲基乙酰胺、N-甲基甲酰胺、乙腈、二甲基亚砜、丙腈、甲酸乙酯、乙酸甲酯、六氯丙酮、丙酮、乙基甲基酮、乙酸乙酯、环丁砜、N，N-二甲基丙酰胺、四甲基脲、硝基甲烷、硝基苯或六甲基磷酰胺。[0725]合适的烃溶剂包括苯、环己烷、戊烷、己烷、甲苯、环庚烷、甲基环己烷、庚烷、乙苯、间二甲苯、邻二甲苯或对二甲苯、辛烷、茚满、壬烷或萘。[0726]超临界二氧化碳和离子性液体也可以作为溶剂使用。[0727]可以在适当温度下进行本文中所述方法的反应，该温度可由本领域的技术人员容易地进行确定。反应温度将取决于例如试剂和溶剂如果存在）的熔点和沸点、反应的热力学例如剧烈放热反应可能需要在低温下进行和反应的动力学例如高活化能垒可能需要高温）。“高温”是指高于室温约22°C的温度。[0728]可在空气中或在惰性气氛下进行本文中所述方法的反应。通常，可采用本领域的技术人员所熟知的空气敏感合成技术进行含有基本上可与空气反应的试剂或产物的反应。[0729]在一些实施例中，化合物的制备可涉及加入酸或碱以实现例如对所需反应的催化或形成诸如酸加成盐等的盐形式。[0730]酸的实例可以是无机或有机酸。无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。有机酸包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、苯甲酸、4-硝基苯甲酸、甲磺酸、对甲苯璜酸、苯磺酸、酒石酸、三氟乙酸、丙炔酸、丁酸、2-丁炔酸、乙烯基乙酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸和癸酸。[0731]碱的实例包括氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸锂、碳酸钠和碳酸钾。强碱的一些实例包括但不限于氢氧化物、烷氧化物、金属氨化物、金属氢化物、金属二烷基氨化物和芳基胺，其中：烷氧化物包括甲基、乙基和叔丁基氧化物的锂、钠和钾盐;金属氨化物包括氨基钠、氨基钾和氨基锂;金属氢化物包括氢化钠、氢化钾和氢化锂;金属二烧基氨化物包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、三甲基甲硅烷基和环己基取代的氨化物的钠盐和钾盐。[0732]本发明还包括本文中所述化合物的盐形式。盐或盐形式）的实例包括但不限于碱性残基如胺）的无机酸盐或有机酸盐;酸性残基如羧酸）的碱金属盐或有机盐等。一般而言，可通过使游离碱或酸与化学计量或过量的所需成盐的无机或有机酸或碱在合适溶剂或各种溶剂的组合中进行反应来制备盐形式。合适盐的列表见于Remingtοη’sPharmaceuticalSciences，第17版，MackPublishingCompany,Easton,Pa.，1985年，第1418页中，该文献的全部公开内容以引用的方式并入本文。[0733]根据本文中所述的方法进行化合物的制备后，可采用诸如浓缩、过滤、萃取、固相萃取、再结晶、色谱法之类的常用分离和纯化操作来分离所需产物。[0734]在一些实施例中，本发明的化合物及其盐是基本上经分离的。所谓“基本上经分离的”是指化合物至少部分或基本上与其形成或检测的环境分离。部分分离可包括例如富集本发明化合物的组合物。基本上分离可包括含至少约50重量％、至少约60重量％、至少约70重量％、至少约80重量％、至少约90重量％、至少约95重量％、至少约97重量％或至少约99重量％的本发明化合物或其盐的组合物。分离化合物及其盐的方法在所属领域中是常规方法。[0735]方法和中间体[0736]本发明尤其提供合成式III腈化合物及其中间体的方法，所述化合物和中间体可用作JAK抑制剂。在一方面，该方法为氢化方法。在一些实施例中，该方法为不对称氢化方法，其产生JAK抑制剂或其中间体的对映体过量的（R-或S-对映体。在另一方面，该方法为不对称aza-Michael加成方法，其产生JAK抑制剂或其中间体的对映体过量的⑻-或⑸-对映体。[0737][0738]在进一步的方面，本发明提供通过手性分离技术或手性盐拆分而富集对映体过量的式III化合物的方法。在一些实施例中，这些方法涉及对中间化合物进行手性分离如手性制备型色谱法或手性盐拆分，然后进行后续反应，以形成式III化合物。在一些实施例中，本发明进一步提供使中间化合物的非所需对映体外消旋化的方法，以产生式III化合物，然后可通过前述技术对其进行拆分，以得到对映体过量的所需对映体。[0739]在又进一步的方面，本发明提供制备可用于产生式III化合物的中间化合物的方法。在另一方面，本发明提供本文中所述任何中间体的中间化合物。在又另一方面，本发明提供本文中所述任何中间体的对映体富集组合物，前提是中间体具有至少一个手性中心。[0740]本文中所述的方法包括制备化合物及其中间体和组合物的方法，其中心选自环戊基、甲基和三氟甲基。在一些实施例中，R1为环戊基或环丙基。在一些实施例中，R1为环戊基。在一些实施例中，Ri为甲基。在一些实施例中，Ri为三氟甲基。在任何方法中，这些实施例可视情况应用于本文中所述的任何中间体或化合物。[0741]在一些实施例中，该方法可用于形成式III化合物，其为3-环戊基-3-[4_7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丙腈或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，该方法可用于形成式III化合物，其为（3R-3-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）-1H-吡唑-1-基]丙腈或其药学上可接受的盐。应理解本文中所述的方法包括制备这些化合物，尤其是3R-3-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丙腈的方法。[0742]一些中间体的制备方法可参见2007年6月14日公告的美国专利公开US200701354612006年12月12日提交，申请序列号No.11637，545;和2008年6月12日提交的美国专利申请No.12138，082，上述每个均以全文引用的方式并入本文中。[0743]I.催化氢化方法包括不对称氢化方法[0744]式III化合物可如此形成：催化氢化式II化合物以形成式I化合物，然后可通过官能团转化和或脱保护步骤将式I化合物转化成式III化合物。在一些实施例中，这些方法形成作为外消旋物的式I化合物，而在更优选的实施例中，这些方法产生式I化合物的对映体过量的⑸-或⑻-对映体。该方法的一个步骤涉及下文所示的式II的，-不饱和化合物的氢化。[0745]因此，在一方面，本发明提供制备包含式I化合物的组合物的方法：[0746][0747]包括使式II化合物：[0748[0749]与氢气在氢化催化剂存在下进行反应；[0750]其中：[0751]*表示手性碳；[0752]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0753]R2选自-C=〇-NH2、-C=0O-R3和氰基；[0754]R3选自Ch烧基或Ch氟烷基;且[0755]P1为保护基。[0756]在一些实施例中，R1选自环戊基、甲基和三氟甲基。在一些实施例中，R1为环戊基或环丙基。在一些实施例中，Ri为环戊基。在一些实施例中，Ri为甲基。在一些实施例中，Ri为三氟甲基。[0757]在一些实施例中，R2为-C=0O-R3。在一些实施例中，R2为-C=0OCH3。在一些实施例中，R2为氰基。[0758]在一些实施例中，R3选自-4烧基。在一些实施例中，R3选自甲基。[0759]连接至R2的键的弯曲符号表示该化合物可呈E-或Z-构象。在一些实施例中，当R2为氰基或-C=0-NH2时，式II化合物为⑵-异构体，而当R^-C=0O-R3时，式II化合物为E-异构体。在一些实施例中，式II化合物为Z-异构体。在一些实施例中，式II化合物为E-异构体。在一些实施例中，PA-CH2OC=0CCH33。在一些实施例中，P^g-QfeOCfeQfeSiQfe3。适当的Pi保护基包括但不限于Wuts和Greene在“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”（第4版，JohnWileySons:NewJersey，第696-887页（特别是第872-887页），2007中描述的用于胺的保护基，该文献的全文以引用的方式并入本文中。在一些实施例中，P1基团的保护基为在下文所述的其它处理步骤中对移除P2保护基的条件稳定的保护基。在一些实施例中，Pi为耐室温酸性条件的基团。在一些实施例中，Pi为不会从室温、约10°C至约40°C、约15°C至约40°C或约15°C至约30°C下的约1至约5N盐酸中移除的基团。在一些实施例中，P1S苄氧羰基为苄氧羰基Cbz、2，2，2-三氯乙氧羰基Troc、2-三甲基甲硅烷基）乙氧羰基（Teoc、2-4-三氟甲基苯磺酰基）乙氧羰基（Tsc、叔丁氧羰基BOC、1_金刚烷基氧基羰基Adoc、2_金刚烷基羰基2-Adoc、2,4_二甲基戊-3-基氧基羰基Doc、环己基氧基羰基Hoc、1，1_二甲基-2,2,2-三氯乙氧羰基TcBOC、乙烯基、2-氯乙基、2-苯磺酰乙基、烯丙基、苄基、2-硝基苄基、4-硝基苄基、二苯基-4-吡啶基甲基、Ν’，Ν’-二甲基肼基、甲氧基甲基、叔丁氧甲基Bum、苄氧基甲基BOM或2-四氢吡喃基THP。在一些实施例中，P1为三Cl_4烷基）甲硅烷基（例如三（异丙基）甲硅烷基）。在一些实施例中，PAl，1-二乙氧基甲基。在一些实施例中，Pd2-三甲基甲硅烷基）乙氧基甲基（SBl。在一些实施例中，Pi为N-特戊酰氧基甲基POM。[0760]在一些实施例中，该方法产生包含式II化合物的外消旋物的组合物。如果外消旋物为所需时，则可利用本领域中已知的任何氢化催化剂。在一些实施例中，氢化催化剂为碳载钯。[0761]在其它实施例中，该方法产生包含式I化合物的对映体过量的（R-或⑸-对映体的组合物。一般而言，当对映体过量的式I化合物为所需时，则利用不对称氢化催化剂。在一些实施例中，氢化催化剂为具有L1的钌或铑催化剂;其中L1为手性配体。许多合适的催化剂是本领域中已知的。在一些实施例中，使用手性膦配体。可在反应期间原位产生或在反应之前产生活性催化剂体系金属、配体和添加剂）。[0762]在一些实施例中，可首先通过使用相对较高的催化剂装填量进行催化性不对称氢化实验来筛选催化剂。一旦选定催化剂体系，就可进一步优化实验条件，包括催化剂装填量、氢压力、反应溶剂或溶剂体系、反应温度和反应时间，以提高化学转化率和对映体选择性。在一些实施例中，按式II化合物计，催化剂装填量为约0.005至约0.1摩尔％。[0763]在一些实施例中，通过特定的手性配体会产生式I化合物的何种对映体是已知的。在一些实施例中，可筛选不对称氢化催化剂中的手性配体，以确定通过该方法产生式I化合物的何种对映体。然后可选择所需的手性配体以提供式I化合物的所需对映体。例如，在一些实施例中，在反应之前，该方法进一步包括以下步骤：[0764]i使式II化合物与氢气在具有L2的钌或铑催化剂存在下进行反应;并分析所得组合物，以确定R-或S-对映体是否过量;其中L2为手性配体；[0765]ii使式II化合物与氢气在具有L3的钌或铑催化剂存在下进行反应;并分析所得组合物，以确定⑻-或⑸-对映体是否过量;其中1^与1^为相同的手性配体，但具有相反的立体化学；以及[0766]iii根据对映体过量的组合物的所需立体化学来选择用作1^的1^或1^。[0767]在一些实施例中，氢化催化剂选自[Ru对甲基异丙基苯）（L1Cl]Cl、RhCODL1BF4、RhCOD2L1CF3SO3和RuL1CF3CO22。在一些实施例中，氢化催化剂选自[RuL4L1Cl=CURhL4L1BF4AhL42L1CF3SO3和RuL1CF3CO22。在一些实施例中，L4为异丙基苯或C0D。在一些实施例中，X’为卤素。在一些实施例中，X’为氯基。在一些实施例中，氢化催化剂为[RhCOD2]CF3SO3与手性膦配体的混合物。在一些实施例中，溶剂为2，2，2-三氟乙醇TFE。在一些实施例中，氢化催化剂装填量为约0.005至约0.01摩尔％;且式II化合物与氢化催化剂的比例为约200001至约100001。在一些实施例中，反应浓度为约5至约6mLTFEg，氢压为为约7至约60巴，反应在约室温至约75°C的温度下进行。在一些实施例中，将反应进行到式II化合物向式化合物的转化率约等于或大于99.5%。在一些实施例中，反应约10至约25小时。在一些实施例中，对映体的过量等于或大于约94%。[0768]在一些实施例中：[0769]氢化催化剂为[RhCOD2]CF3SO3与选自以下的手性膦配体的混合物：[0771]溶剂为2,2,2_三氟乙醇TFE;[0772]氢化催化剂装填量为约0.005至约0.01摩尔％;[0773]式II化合物与氢化催化剂的比例为约200001至约100001;[0774]氢压力为约7至约60巴；[0775]反应在约室温至约75°C的温度下进行；[0776]反应进行到式II化合物向式I化合物的转化率约等于或大于99.5%;[0777]反应约10至约25小时;且[0778]对映体的过量等于或大于约94%。[0779]在一些实施例中，手性配体为手性膦配体。在一些实施例中，手性配体选自以下之w[0781]在进一步的实施例中，组合物包含式I化合物的对映体过量的⑸-对映体。在一些实施例中，L1选自以下配体之一：[0783]在其它实施例中，组合物包含式I化合物的对映体过量的⑻-对映体。在一些实施例中，L1选自以下配体之一：[0785]在一些实施例中，手性催化剂选自SigmaAldrich，“AsymmetricCatalysis:PrivilegedLigandsandComplexes”，ChemFiles，第8卷第2期第1-88页中的氢化催化剂，该文献的全文以引用的方式并入本文。在一些实施例中，对映体的过量等于或大于约10%、约20%、约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%、约99.1%、约99.2%、约99.3%、约99.4%、约99.5%、约99.6%、约99.7%、约99.8%、约99.9%或约99.99%。[0786]在进一步的实施例中，该方法进一步包括使式Ic化合物在脱保护条件下反应，以形成式ΠI化合物：[0788]其中：[0789]*表示手性碳；[0790]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0791]P1为保护基。[0792]在一些实施例中，该方法进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[0793]可通过本领域中已知用于移除胺的特定保护基的方法实施处理式Ic化合物以移除Pi基团，如Wuts和Greene，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第4版，JohnWileySons:NewJersey，第696-887页（特别是第872-887页）（2007中所述，该文献的全文以引用的方式并入本文中。例如，在一些实施例中，通过用氟离子例如以氟化四丁基铵处理）、盐酸、对甲苯磺酸吡啶盐PPTS或路易斯酸（例如四氟硼酸锂）进行处理来移除P1S团。在一些实施例中，处理包括用四氟硼酸锂处理，然后用氢氧化铵处理（例如，当Pi为2-三甲基甲硅烷基）乙氧基甲基时）。在一些实施例中，处理包括用碱处理例如P1Sn-特戊酰氧基甲基）。在一些实施例中，所述碱为碱金属氢氧化物。在一些实施例中，所述碱为氢氧化钠。在一些实施例中，处理包括在诸如甲醇或水之类的溶剂中用氢氧化钠或氨处理。[0794]在一些实施例中，为了使SEM保护基脱保护，采用温和的两阶段方案。在高温如80°C下，在乙腈水溶液中用四氟硼酸锂LiBF4将经SEM保护的式Ic底物处理十至二十小时。随后在室温下用氢氧化铵NH4OH水溶液处理所得相应的羟甲基中间体，以提供式III化合物。[0795]在一些实施例中，对于POM脱保护而言，使用氢氧化钠NaOH水溶液。因此，在室温下用IN氢氧化钠水溶液将经POM保护的式Ic化合物处理两至三小时。在典型的酸碱处理后可得到所需的式III产物。在一些实施例中，脱保护条件包括用四氟硼酸锂进行处理，接着以氢氧化铵水溶液进行处理。[0796]在一些实施例中，该方法进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[0797]将式I酰胺转化成式III腈的方法[0798]本发明进一步提供将式I酰胺转化成式I腈化合物的方法。转化式I酰胺的方法涉及使酰胺脱水以形成腈。然后可移除保护基，并可将所得胺质子化，以形成药学上可接受的盐。因此，在一些实施例中，本发明提供一种方法，包括使式I化合物：[0800]在脱水条件下进行反应，以形成式Ia化合物：[0802]其中：[0803]*表示手性碳；[0804]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0805]R2选自-C=〇-NH2;[0806]P1为保护基。[0807]在一些实施例中，脱水条件包括三氯乙酰氯在三乙胺的存在下）。在一些实施例中，脱水条件包括用于酰胺脱水的任何脱水剂，包括但不限于酰基氯（例如三氯乙酰氯）、P2O5;ZnCl2在微波条件下）；三苯基膦和N-氯代琥珀酰亚胺；二氯磷酸乙酯DBU;和PdCl2。在一些实施例中，脱水条件如Kuo，C-I;Zhu，J·-LWu，J·等，Chem·Commun·2007，301;ManjulajK.；Pasha,M.A.Syn.Commun.2007,37,1545；Takahashi,T.；SugimotojO.；KoshiojJ.；Tanji,K.HeteroeyeIes2006,68,1973；MaffioIi,S.I.；Marzorati,Ε.；Marazzi,A.OrganicLetters2005，7,5237;或Iranpoor，NFirouzabadi，HAghapour，G.Syn.Commun.2002,32,2535中所述，上述各文献均以全文引用的方式并入本文。[0808]在进一步的实施例中，该方法进一步包括使式Ic化合物在脱保护条件下反应，以形成式πI化合物：[[0810]其中：[0811]*表示手性碳；[0812]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0813]P1为保护基。[0814]适当的P1基团和脱保护方法包括但不限于上文所描述的那些。[0815]在一些实施例中，该方法进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[0816]将式頂旨转化成式III腈的方法[0817]本发明进一步提供将式I酯转化成式I腈化合物的方法。转化式I酯的方法涉及将酯皂化以形成酸、选择性氨解和酰胺脱水。然后可移除保护基，并可将所得胺质子化，以形成药学上可接受的盐。[0818]因此，本发明提供一种方法，包括使式I化合物：[0820]与金属氢氧化物反应，以形成式Ic化合物：[[0822]其中：[0823]*表示手性碳；[0824]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0825]R2为-C=〇OR3;[0826]R3选自Ch烧基；且[0827]P1为保护基。[0828]在一些实施例中，金属氢氧化物为碱金属氢氧化物或碱土氢氧化物。在一些实施例中，金属氢氧化物为氢氧化锂。[0829]在进一步的实施例中，该方法进一步包括使式Ic化合物与氨或氢氧化铵在偶合试剂存在下反应，以形成式Ib化合物：[0831]其中：[0832]*表示手性碳；[0833]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0834]P1为保护基。[0835]在一些实施例中，偶合剂为N，N-羰基二咪唑。在一些实施例中，偶合剂选自磷酸1，2-苯并异噁唑-3-基二苯酯；ClC02-i-Bu和Et3N;碳二酰亚胺；SOCl2和Cl-C⑼-C⑼-Cl;对甲苯磺酰氯和DMAP;以及Cl⑶2-i-Bu和三乙胺。在一些实施例中，偶合剂选自以下中的那些：Ueda，M·;Oikawa，H·J·Org·Chem·1985，50，760磷酸1，2-苯并异噁唑-3-基二苯酯）；Lai，M.;Liu，H.J.Am.Chem.Soc.1991,113,7388ClC〇2-i_Bu、Et3N!Williams，Α·;Ibrahim,I.Chem.Rev.1991,81,589碳二酰亚胺）；Weiss，M.M.;Harmange，J;Polverino，A.J.J.MecLChem·，2008,51，1668S0C12、C1-C0-C0-C1;Hong，C.Y.;和Kishi.Y.J.Am.Chem.Soc.，1991，113,9693TsCl、DMAP;以及Nitta，H.;Yu，D.;Kudo，M.;Mori，A.;Inoue，S.J.Am.Chem·Soc·，1992，114,7969ClC〇2-i-Bu、Et3N。[0836]在其它实施例中，该方法进一步包括使式Ib化合物在脱水条件下反应，以形成式Ia化合物：[[0838]其中：[0839]*表示手性碳；[0840]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0841]P1为保护基。[0842]在一些实施例中，脱水条件包括三氯乙酰氯在三乙胺存在下）。在一些实施例中，脱水条件包括用于酰胺脱水的任何脱水剂，包括但不限于酰基氯例如三氯乙酰氯）、P2〇5;ZnCl2在微波条件下）；三苯基膦和N-氯代琥珀酰亚胺;二氯磷酸乙酯DBU;和PdCl2。在一些实施例中，脱水条件如Kuo，C_W·;Zhu，J.-L.;Wu,J·等，Chem.Commun·2007，301;Manjula，K.；Pasha,M.A.Syn.Commun.2007,37,1545；Takahashi,T.；Sugimoto,0.；Koshio,J.；Tanji,Κ.Heterocycles2006,68,1973；Maffioli,S.I.；Marzorati,E.；Marazzi,A.OrganicLetters2005,7,5237；〇!cIranpoor,N.；Firouzabadi,H.；Aghapour,G.Syn.Commun.2002，32，2535中所述，上述各文献的全文均以引用的方式并入本文。[0843]在进一步的实施例中，该方法进一步包括使式Ic化合物在脱保护条件下反应，以形成式ΠI化合物：[[0845]其中：[0846]*表示手性碳；[0847]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0848]P1为保护基。[0849]适当的P1基团和脱保护方法包括但不限于上文所描述的那些。[0850]在一些实施例中，该方法进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[0851]氢化方法的起始物质式II化合物）[0852]可按方案1所示制备不对称氢化方法上文）中所用的式II化合物，其中PjPP2每个独立地为保护基，Rl选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基，R2为氰基或烷基酯。制备式IV化合物的途径在下文描述。[0853]方案1[0855]该方法涉及适当取代的式XIV乙炔与经保护的式IV化合物4-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2,3-1]嘧啶之间的似-1^^61加成反应式1¥和乂1¥化合物的制备在下文描述）。此反应可在DMF中的催化量的固体碳酸钾的影响下于室温下进行，从而得到相应的式I化合物。[0856]可按方案2中所示，用酸处理式IIa化合物以形成式IIb化合物，从而形成式II化合物其中Ri为-C=0NH2。[0857]方案2[0859]因此，本发明提供制备式II化合物的方法：[0861]包括使式IV化合物：[[0863]与式XIV化合物：[[0865]在碱存在下反应；[0866]其中：[0867]*表示手性碳；[0868]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0869]R2选自-C=0O-R3和氰基；[0870]R3选自Ch烧基或Ch氟烷基;且[0871]P1为保护基。[0872]适当的P1保护基包括但不限于上文列出的那些。[0873]在一些实施例中，aza-Michael加成是室温下于有机溶剂中在催化量的碱存在下进行的。所述碱可以为适于aza-Michael反应的溶剂或碱。在一些实施例中，溶剂为乙腈或二甲基甲酰胺DMF。在一些实施例中，碱为卤化四烷基铵、氢氧化四烷基铵、胍、脒、氢氧化物、烷氧化物、硅酸盐、碱金属磷酸盐、氧化物、叔胺、碱金属碳酸盐、碱金属碳酸氢盐、碱金属磷酸氢盐、膦或羧酸的碱金属盐。在一些实施例中，碱为四甲基胍、1，8-二氮杂双环5.4.0i^一-7-烯、1，5-二氮杂双环4·3·0壬-5-烯、1，4-二氮杂双环2·2·2辛烷、氢氧化叔丁基铵、氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、磷酸三钾、硅酸钠、氧化钙、三乙胺、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸氢钾、三苯基膦、三乙基磷、醋酸钾或丙烯酸钾。在一些实施例中，碱为1，8-二氮杂双环[5.4.0]i^一-7-烯DBU或碳酸钾。在一些实施例中，碱为DBU。在一些实施例中，碱以催化量存在。在一些实施例中，碱的量为约0.1至约5当量，或约0.5至约3当量，或约0.1至约0.5当量。在一些实施例中，反应在约1至约3小时内完成。[0874]在一些实施例中，R1选自环戊基、甲基和三氟甲基。在一些实施例中，R1为环戊基或环丙基。在一些实施例中，Ri为环戊基。在一些实施例中，Ri为甲基。在一些实施例中，Ri为三氟甲基。[0875]在一些实施例中，碱为碱金属或碱土金属碳酸盐。在一些实施例中，碱为碳酸钾。[0876]在一些实施例中，本发明提供式II化合物：[0878]其中：[0879]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0880]R2选自-C=0-NH2和-C=0O-R3;[0881]R3选自Ch烧基或Ch氟烷基;且[0882]P1为保护基。[0883]在一些实施例中，P1S-CH2OC=0CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33。在一些实施例中，Ri为环戊基。[0884]式IIb化合物其中RA-C=0可这样形成:将式IIa化合物：I[0886]以酸进行处理，以形成IIb化合物的外消旋形式：[0888]其中：[0889]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0890]P1为保护基。[0891]在一些实施例中，酸为三氟乙酸、硫酸或其组合。在一些实施例中，处理包括用三氟乙酸TFA和硫酸H2SO4在室温下进行处理。在一些实施例中，了?六与!125〇4的体积比为约10:1。在一些实施例中，反应在约一小时内完成。[0892]可通过诸如下文方案3中所述的方法形成方案1中所述方法所使用的式XIV化合物。因此，通过如下方式制备式XIVa化合物（其中式XIV的R2为氰基）：于约-78°C至约室温下，在诸如无水THF之类的有机溶剂中以由苯酚和溴化氰原位产生的氰氧苯基C-2处理式C-I化合物的锂盐，得到相应的式XIVa的3-取代的丙炔腈。类似地，以式C-3所示的氯甲酸酯处理式C-I化合物的锂盐得到式XIVb所示的3-取代的丙炔酸酯化合物其中式XIV的R2S-C=00R3〇[0893]方案3[0895]II.制备式Id或VI醛中间体的不对称aza-Michael加成方法[0896]在另一方面，本发明尤其提供式Id化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体：[0898]包括使式IV化合物：I[0900]与式V化合物：[0902]在手性胺和有机酸存在下反应；[0903]其中：[0904]*表示手性碳；[0905]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0906]P1为保护基。[0907]在进一步的方面，本发明提供制备式VI化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的方法：[[0909]包括使式V化合物：[0911]与式VII化合物：[0913]在手性胺和有机酸存在下反应；[0914]其中：[0915]*表示手性碳；[0916]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0917]X1S卤素。[0918]虽然不希望受任何特定理论的束缚，但应理解N-杂环化合物到α、β-不饱和醛的手性胺催化的aza-Michael共辄加成机制涉及以下途径。首先，式V所示的α、β_不饱和醛与由手性胺和有机酸组合形成的质子化催化剂反应，形成亚胺鑰离子并伴随着失水。由于催化剂手性的原因，可形成具有E和Z构型的两种不同的亚胺鑰离子。预期相应的E构型为所存在的主要中间体，其中Si面被催化剂中的手性基团屏蔽，留下Re面可供N-杂环化合物接近。其次，将取代的吡唑加成至亚胺鑰离子得到烯胺中间体，其在质子化吡唑环上带正电荷。然后此质子从吡唑环中的氮原子转移至烯胺碳原子上，以形成亚胺鑰中间体。第三，亚胺鑰离子的水解导致催化剂的再生并形成产物。基于对反应机制的理解，确定此有机催化的aza-Michael反应的反应条件。[0919]在一些实施例中，式V化合物的存在是过量的（例如约1.5至约5当量）。在一些实施例中，存在的手性胺为约〇.02至约0.15当量，或约0.05至约0.10当量。[0920]在任一种不对称aza-Michael加成方法的一些实施例中，有机酸为对甲苯磺酸、苯甲酸或4-硝基苯甲酸。在一些实施例中，有机酸为苯甲酸。在一些实施例中，存在的有机酸为约0.05至约0.10当量。[0921]在一些实施例中，反应在选自氯仿CHCl3或甲苯的有机溶剂中进行。在一些实施例中，反应在约室温或约0至约5°C的温度下进行。在一些实施例中，反应在约10至约24小时内完成。在一些实施例中，反应转化率达到95%以上，其中经分离的收率达到约80至约90%。已开发出手性HPLC方法，以测定各aza-Michael加合物或其衍生物的手性纯度。[0922]在任一种不对称aza-Michael加成方法的一些实施例中，手性胺为式A-I化合物的⑻-或⑸-对映体：[0924]其中：[0925]X为CY3Y4,Y为CY5Y6;或[0926]X为S或NY7,Y为CY5Y6;或[0927]X为CY3Y4，YSS;[0928]QjPQ2每个独立地选自H、-6烷基、-6卤烷基、羧基、-6烷基羧酰胺、-6烷氧羰基和苯基;其中C1-S烷基、C1-S卤烷基、-6烷基羧酰胺、C1-S烷氧羰基和苯基每个任选被1、2或3个独立地选自以下的基团取代:羟基、羧基、三_-6烷基甲硅烷基、三_-6烷基甲硅烷氧基、C6-1Q芳基、C6-1Q芳氨基、-9杂芳基和-9杂芳氨基;其中C6-1Q芳基、C6-1Q芳氨基、-9杂芳基和-9杂芳氨基每个任选被1、2、3或4个独立地选自卤素、-6烷基和-6卤烷基的基团取代;且[0929]Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6每个独立地选自H、羟基、羧基、-6烷基、Ch卤烷基、Cu烷氧羰基和苯基;或[0930]心与¥2合起来形成氧代基;或[0931]Y3与Y4合起来形成氧代基;或[0932]¥5与¥6合起来形成氧代基;或[0933]心和心与它们所连接的碳合起来形成5-或6-员环烷基环;或[0934]QjPY5与它们所连接的碳原子合起来形成5-或6-员环烷基环。[0935]在式A-I化合物的一些实施例中：[0936]X为CY3Y4,Y为CY5Y6;或[0937]X为S或NY7,Y为CY5Y6;或[0938]X为CY3Y4,YSS;[0939]Q1SH或甲基；[0940]Q2选自H、甲基、异丙基、丁基、羧基、-5烷氨基羰基、甲氧羰基和苯基;其中甲基和-5烷氨基羰基每个任选被1、2或3个独立地选自以下的基团所取代:羟基、羧基、三_-6烷基甲硅烷基、三-Ch烷基甲硅烷氧基、苯基、苯氨基和吲哚-3-基；其中苯基和吲哚-3-基每个任选被1或2个独立地选自甲基和三氟甲基的基团取代；[0941]Y1Sl羟基、羧基、甲基和甲氧羰基；[0942]Y々H或甲基；[0943]Y3、Y4、YdPY6每个独立地选自H、羟基、甲基和苯基；[0944]Y7为H或甲基;或[0945]YAY2合起来形成氧代基;或[0946]Y3与Y4合起来形成氧代基;或[0947]Y^Y6合起来形成氧代基;或[0948]心和心与它们所连接的碳合起来形成6-员环烷基环;或[0949]QjPY5与它们所连接的碳原子合起来形成6-员环烷基环。[0950]在任一种不对称aza-Michael加成方法的一些实施例中，[0951]手性胺为式A-2化合物的⑻-或⑸-对映体：[0[0953]其中[0954]*为具有⑻-或⑸-构型的手性碳；[0955]Ar^PAr2每个独立地为任选被1、2、3或4个独立地选自-6烷基和-6卤烷基的基团取代的C6-1Q芳基；[0956]每个Ra独立地选自-6烷基;且[0957]Rb选自Η、-6烷基和C1-適烷基。[0958]在一些实施例中，ArjPAr2每个独立地为任选被1、2、3或4个独立地选自甲基和三氟甲基的基团取代的苯基;每个1^独立地选自甲基、乙基或叔丁基;且Rb为Η。[0959]在任一种不对称aza-Michael加成方法的一些实施例中，手性胺为选自以下化合物的⑻-或⑸-对映体:脯氨酸、脯氨酰胺、脯氨酰基-L-亮氨酸、脯氨酰基-L-丙胺酸、脯氨酰基甘氨酸、腫氨酰基-L苯丙胺酸、二苯基P比略烧、二节基P比略烧、N-1-甲基乙基-P比略烧羧酰胺、2-苯胺基甲基吡咯烷、2-[双3，5-二甲基苯基）甲基]吡咯烷、二苯基吡咯烷-2-基）甲醇、脯氨醇、4-噻唑烷羧酸、反式-3-羟脯氨酸、反式-4-羟脯氨酸、4-苄基-1-甲基-咪唑烷-2-羧酸、1-甲基-4-苯基-咪唑烷-2-羧酸、4,5-八氢-苯并咪唑-2-羧酸、4,5-二苯基-咪唑烷-2-羧酸、Nl-甲基-3-苯基丙烷-1,2-二胺、1，2_二苯基乙二胺、1-甲基-4-1-甲基-IH-吲哚-3-基甲基-咪唑烷-2-羧酸、4-苄基-1-甲基-咪唑烷-2-羧酸、I，2-环己二胺、2-苯基-噻唑烷-4-羧酸、叔亮氨酸甲酯、5-苄基-2，2，3-三甲基-咪唑啉-4-酮、脯氨酸甲酯、4，5-二苯基咪唑烷、2-环己基-4，5-二苯基咪唑烷、2-{双-[3，5-双三氟甲基苯基]-三甲基甲硅烷氧基-甲基}_吡咯烷、2-{双-[3，5-二甲基苯基]-三甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷、2-{二苯基-三甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷、2-{:双[萘-2-基]-三甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷、2-{叔丁基二甲基甲硅烷氧基-二苯基-甲基}-吡咯烷、2-{双-[3,5-双三氟甲基）苯基]-三乙基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烷和2-{双-[3，5-双三氟甲基苯基]-乙基-二甲基甲硅烷氧基-甲基}-吡咯烧;其中⑻-或⑸-构型在邻近该化合物中的NH基团的碳上。[0960]在一些上述实施例中，手性胺为R-对映体。在任一种不对称aza-Michael加成方法的实施例中，手性胺选自以下化合物之一：〇[0962]在一些实施例中，对映体的过量为约85%至约95%。在一些实施例中，对映体的过量等于或大于约10%、约20%、约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%、约99.1%、约99.2%、约99.3%、约99.4%、约99.5%、约99.6%、约99.7%、约99.8%、约99.9%或约99.99%。[0963]在一些实施例中，本发明提供包含式I化合物的对映体过量的（R-或⑸-对映体的组合物：[0965]其中：[0966]*表示手性碳；[0967]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[0968]R2选自-C=0-NH2、-C=0O-R3、-C=0OH和-C=0H;[0969]R3选自-4烧基或-4氟烷基;且[0970]P1为保护基。[0971]在一些实施例中，P1S-CH2OC=0CCH33或-CH2OCH2CH2SiCH33。在一些实施例中，Ri为环戊基。[0972]在其它实施例中，本发明提供包含式IX化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[0974]其中：[0975]*表示手性碳；[0976]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0977]R。和Rd每个独立地为-6烷基;或[0978]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[0979]在一些实施例中，R1为环戊基。[0980]将式I或VI的醛中间体转化成腈化合物的方法[0981]在另一方面，本发明提供由式Id化合物制备腈化合物的方法。因此，在一些实施例中，本发明提供了一种方法，包括将式Id化合物：[0983]以氨或氢氧化铵和碘处理，以形成式Ia化合物：[0985]其中：[0986]*表示手性碳；[0987]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0988]P1为保护基。[0989]在一些实施例中，在室温下、在诸如四氢呋喃THF之类的有机溶剂中以过量的铵水溶液NH4OH和化学计量的碘（I2处理式I所示的手性醛，由此完成处理。在一些实施例中，反应于室温下在约1至约2小时内完成。在这种反应条件下，手性醛的手性保持不变。手性腈的手性可通过手性HPLC分析予以检验。[0990]在一些实施例中，该方法进一步包括使式Ic化合物在脱保护条件下反应，以形成式IΠ化合物：I[0992]其中：[0993]*表示手性碳；[0994]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[0995]P1为保护基。[0996]适当的P1基团包括但不限于上文所描述的那些。[0997]在一些实施例中，该方法进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[0998]在另一方面，本发明提供由式VI化合物制备腈化合物的方法。因此，在一些实施例中，本发明提供了一种方法，包括将式VI化合物：[1000]以氨或氢氧化铵和碘进行处理，以形成式VIII化合物：[[1002]其中：[1003]*表示手性碳；[1004]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[1005]X1S卤素。[1006]在一些实施例中，该方法进一步包括使式VIII化合物与式B-I化合物反应：B-I[1008]以形成式IX化合物：[1010]其中：[1011]*表示手性碳；[1012]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[1013]Rc和Rd每个独立地选自11和-6烷基;或[10M]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[1015]在一些实施例中，式B-I化合物为4,4,5,5,4’，4’，5’，5’-八甲基_[2,2’]双[1，3，2-二氧硼戊环基]。[1016]在进一步的实施例中，该方法进一步包括使式IX化合物与式X化合物：[[1018]在钯催化剂和碱存在下进行反应，以形成式Ic的化合物：I[1020]其中[1021]*表示手性碳；[1022]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[1023]R。和Rd每个独立地选自萌卩-6烷基;或[1024]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个^-4烷基取代的5-至6-员杂环;X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或漠基;且[1025]P1为保护基。[1026]在其它实施例中，该方法进一步包括使式IX化合物与式XI化合物：[1028]在钯催化剂、碱和溶剂存在下进行反应，以形成式III化合物：[1030]其中：[1031]*表示手性碳；[1032]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[1033]R。和Rd每个独立地选自萌卩-6烷基;或[1034]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个^-4烷基取代的5-至6-员杂环;且X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基。[1035]在一些实施例中，X2为溴基、碘基或氯基。在一些实施例中，X2为氯基。[1036]可使用多种钯0和钯（II催化剂引发Suzuki偶合反应，并可在本领域中已知的条件下进行（参见例如Miyaura和Suzuki，Chem.Rev.1995，95，2457-2483，其全文据此以引用的方式并入）。在一些实施例中，钯催化剂为PdPPh34和Pddppf2C12。在一些实施例中，钯催化剂为四（三苯基膦钯⑼或四（三邻甲苯基膦钯〇。在一些实施例中，钯催化剂为四（三苯基膦钯⑼。[1037]在一些实施例中，钯催化剂装填量为约IXHT4至约0.1当量。在一些实施例中，钯催化剂装填量为约〇.0010至约〇.0015当量。在一些实施例中，式X或XI化合物与式IX化合物的化学计量比为约1:1.05至约1:1.35。[1038]在一些实施例中，溶剂包括水和有机溶剂。在一些实施例中，有机溶剂为1，4_二噁烷、1-丁醇、1，2_二甲氧基乙烷DME、2_丙醇、甲苯或乙醇或其组合。在一些实施例中，有机溶剂包括DME。在一些实施例中，有机溶剂包括DMF。[1039]在一些实施例中，碱为无机碱。在一些实施例中，碱为有机碱。在一些实施例中，碱为碱金属碳酸盐。在一些实施例中，碱为碳酸钾K2CO3。在一些实施例中，使用二至五当量的碱例如K2CO3。[1040]在一些实施例中，在约80至约100°C的温度下进行Suzuki偶合反应。在一些实施例中，反应进行二至十二小时。在一些实施例中，[1041]可任选将式XII化合物从Suzuki偶合反应混合物的处理水溶液中分离或直接使用。适当的P2保护基包括但不限于Wuts和Greene，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第4版，JohnWileySons:NewJersey，第696-887页（特别是第872-887页）2007中描述的胺的保护基，该文献的全文以引用的方式并入本文中。[1042]在其它实施例中，该方法进一步包括使式Ia化合物在脱保护条件下反应，以形成式IΠ化合物：I[1044]*表示手性碳；[1045]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[1046]P1为保护基。[1047]适当的P1基团和脱保护方法包括但不限于上文所描述的那些。[1048]在一些实施例中，该方法进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[1049]用于aza-Michae1加成方法的起始物质[1050]可通过类似于下文所述的方法形成式IV化合物。式V的3-取代的丙烯醛又可按照方案4所示来制备。因此，在典型的维蒂希Wittig条件下处理式C-4醛例如与三苯基亚正膦基）乙醛反应得到相应的式V化合物。[1051]方案4[1053]III.吡唑中间体的合成和外消旋拆分[1054]式III手性化合物可以下述方式制成，对经保护的式IX吡唑硼酸盐衍生物的外消旋物进行手性柱分离如通过手性制备型色谱法），接着使IX手性中间体与未经保护的式XI所示的吡咯并[2,3-d]嘧啶进行Suzuki偶合反应方案5。或者，可以使式S-IX或R-IX的手性中间体在Suzuki偶合条件下与经保护的式X所示的吡咯并[2，3-d]嘧啶进行反应，接着脱保护以移除？:保护基，从而得到式III手性化合物方案5。可经由式XV所示的吡唑硼衍生物与式D-I所示的Michael受体之间的Michael加成反应来产生式IX所示的外消旋取代的吡唑硼酸盐衍生物方案5。[1055]方案5[1057]因此，在一些实施例中，本发明提供制备包含式IX化合物的对映体过量的（R-或S-对映体的组合物的方法：[[1059]包括使包含式IX化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式IX化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物；[1060]其中：[1061]*表示手性碳；[1062]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[1063]Rc和Rd每个独立地为-6烷基;或[1064]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[1065]在一些实施例中，以分批或连续模式，使用手性固定相和流动相，以等度或梯度模式进行色谱法。[1066]在一些实施例中，手性色谱单元为装有以手性固定相填充的手性柱的制备型高效液相色谱HPLC系统。在一些实施例中，以手性固定相填充手性柱，该手性固定相包含固定于硅胶上的直链淀粉三氨基甲酸3，5-二甲基苯酯）（可以“Chiralpak⑯ΙΑ”得自Daicel。在一些实施例中，以手性固定相填充手性柱，该手性固定相包含涂布在硅胶上的纤维素三氨基甲酸3,5-二甲基苯酯）（可以“〇1丨12丨€6丨贷〇1；[抑106100”得自03；^61。在一些实施例中，色谱单元采用连续色谱方法，如模拟移动床SMB色谱法或Varicol法，使用装有一组八个柱的单元，每个柱以手性固定相填充。在一些实施例中，该单元装有3至12个柱或5至10个柱或5至8个柱，每个柱以手性固定相填充，在一些情况下以相同的手性固定相填充。在一些实施例中，以由直链淀粉三氨基甲酸3,5_二甲基苯酯）固定于硅胶上制成的手性固定相可以“Chiralpak⑧IA”得自Daicel填充柱。在一些实施例中，以由纤维素三氨基甲酸3，5-二甲基苯酯）涂布在硅胶上制成的手性固定相（可以“Chira丨ceKKOD”得自Daicel填充柱。在一些实施例中，手性固定相为纤维素改性的手性固定相（CSP，Chira1Technologies。在一些实施例中，手性固定相为涂以4-3,5-二硝基苯甲酰氨基）四氢菲的娃胶基固定相可以“S，SWTielk_-:0®l”得自RegisTechnologies。在一些实施例中，流动相包含乙醇和己烷。在一些实施例中，流动相包含比例为约1:9的乙醇和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，乙醇的存在量为约10体积％至约100体积％或约10体积％至约25体积％或约15体积％。在一些实施例中，流动相包含约15体积％的乙醇和约85体积％的己烷。在一些实施例中，流动相包含乙醇和己烷，其中乙醇的存在量为约25体积％至约10体积％。在一些实施例中，流动相包含异丙醇和己烷，其中异丙醇的存在量为约25体积％至约10体积％。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，异丙醇的存在量为约10体积％至约25体积％。在一些实施例中，流动相包含甲基-叔丁基醚和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，甲基-叔丁基醚的存在量为约10体积％至约100体积％，优选为约50体积％至约100体积％，最优选为约90体积％至约100体积％。在一些实施例中，流动相包含乙酸乙酯和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，乙酸乙酯的存在量为约10体积％至约100体积％、约50体积％至约100体积％或约75体积％。在一些实施例中，流动相包含四氢呋喃和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，四氢呋喃的存在量为约10体积％至约100体积％、约10体积％至约50体积％或约25体积％。在一些实施例中，色谱单元被保持在室温下。在一些实施例中，流动相以约ImL分钟至约20mL分钟的流速通过。在一些实施例中，流动相以约ImL分钟的流速通过。在一些实施例中，流动相以约18mL分钟的流速通过。在一些实施例中，通过紫外UV光谱法监测洗脱液。在一些实施例中，通过紫外光谱法在约220nm监测洗脱液。通过UV光谱法检测所需对映体的洗脱，由此可以测定收集的洗脱液中含对映体富集组合物的部分。然后可通过由分析型手性HPLC进行测定来确定组合物的％ee对映体过量）。[1067]在一些实施例中，所采用的色谱方法为分批制备型色谱法、超临界流体色谱法SFC、环喷射（cyclojet方法、连续多层柱色谱方法、模拟移动床法、Varicol™方法或PowerFeed方法。[1068]在一些实施例中，手性固定相包含相互作用剂，其为对映体富集的拆分剂，其通过例如化学结合或通过经由交联作用降低可溶性而被固定至惰性载体材料。合适的惰性载体材料可以是大孔的，例如交联聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯、氧化铝、硅藻石（硅藻土）、石英、高岭土、氧化镁或二氧化钛或硅胶。在一些实施例中，惰性载体材料为硅胶。[1069]在一些实施例中，手性固定相为直链淀粉或纤维素类多糖的成员，其选自纤维素氨基甲酸苯酯衍生物，如纤维素三3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯可以“Chiralcel®〇D”或“Chiralpak®IB”得自DaicelChemicalIndustries，Ltd.Daicel，其中氨基甲酸酯衍生物与纤维素主链结合）；纤维素三苯甲酸酯衍生物，如纤维素三4-甲基苯甲酸酯（可以“Chiralcel®〇J”得自Daicel;纤维素三桂皮酸酯可以“aiiralcel®〇K”得自Daicel;淀粉酶苯基和苄基氨基甲酸酯衍生物，如直链淀粉三[s-a-甲基苄基氨基甲酸酯]可以“Chira丨pak®AS”得自Daicel;直链淀粉三（3,5-二甲基苯基）氨基甲酸酯（可以“Chiralpak®AD”或“Chiralpak®IA”得自Daicel，其中氨基甲酸酯衍生物与直链淀粉主链结合）；直链淀粉3,4_取代的氨基甲酸苯酯或直链淀粉4-取代的氨基甲酸苯酯；以及直链淀粉三桂皮酸酯。在一些实施例中，手性固定相包括Chiralpak㊣IA或ChiralpakAD。在一些实施例中，手性固定相包括Cliiralcel®㈤。在一些实施例中，手性固定相为Pirkle相族的成员，如苯基甘氨酸的3，5-二硝基苯甲酰基衍生物（可以“phenylglycine”得自RegisTechnologiesInc·;亮氨酸的3，5-二硝基苯甲酰基衍生物（可以“Leucine”得自RegisTechnologiesInc.;N_3,5-二硝基苯甲酰-3-氨基-3-苯基-2-1，1-二甲基乙基-丙酸酯可以“β-GEM1”得自RegisTechnologiesInc.;N_3,5-二硝基苯甲酰基-氨基-2,2-二甲基_4_戊稀基膦酸二甲酯（可以“a-BURKE2”得自RegisTechnologiesInc.;3_3,5-二硝基苯甲酰氨基-4_苯基-β-内酰胺可以“PIRKLE1-J”得自RegisTechnologiesInc.;二苯基乙二胺的3,5-二硝基苯甲酰基衍生物可以“ULM0”得自RegisTechnologiesInc.;4-3，5-二硝基苯甲酰氨基）四氢菲（可以“s，sWhelk-01T和“R，RWlielk-Oκ1”，或“S，SWhelk-0®2”和“R，RWlldk-0®2”得自RegistechnologiesInc.;1,2-二氨基环己烧的3,5-二硝基-苯甲酰基衍生物可以“DACH-DNB〃得自RegistechnologiesInc.。在一些实施例中，手性固定相包括“s，sWheik-C^T’或“R，RwheHO®1。[1070]在一些实施例中，手性固定相的粒径通常为1至300μηι、2至100μηι、5至75μηι或10至3Oum〇[1071]在一些实施例中，流动相为非极性、极性质子或非质子溶剂或其混合物。在一些实施例中，流动相为二氧化碳与极性质子溶剂的混合物。合适的非极性溶剂包括例如烃，例如正戊烷、正己烷、己烷、正庚烷、庚烷、环己烷和甲基环己烷。合适的质子或非质子溶剂包括例如醇，特别是甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、异丁醇、叔丁醇;醚，例如甲基叔丁基醚；酯，例如乙酸乙酯；卤化烃和乙腈。在一些实施例中，非极性溶剂为正庚烷。在一些实施例中，质子或非质子溶剂为乙醇、2-丙醇或甲基-叔丁基醚。在一些实施例中，流动相为庚烷和乙醇的混合物。在一些实施例中，乙醇在流动相中的存在量为约10%至约100%、约10%至约25%或约15%。在一些实施例中，流动相为庚烷和2-丙醇的混合物。在一些实施例中，2-丙醇在流动相中的存在量为约10%至约100%、约10%至约25%或约20%。在一些实施例中，流动相为庚烷和甲基-叔丁基醚的混合物。在一些实施例中，甲基-叔丁基醚在流动相中的存在量为约10%至约100%、约75%至约100%或约90%至约100%。[1072]在一些实施例中，进行色谱法的温度范围在约TC至50°C，约10°C至30°C或约25cC。[1073]在一些实施例中，回收所需对映体的对映体纯度为大于约90%、大于约98%或大于约99.0%。在一些实施例中，回收所需对映体的收率大于约70%、大于约90%或大于约95%〇[1074]在一些实施例中，制备所需对映体的生产速率为每天每千克固定相大于约0.1kg、0.4kg或0.8kg纯对映体。[1075]在一些实施例中，在减压下蒸发后回收分离的对映体，为浓缩油状物。[1076]在一些实施例中，循环利用手性色谱方法中所用的流动相。[1077]在一些实施例中，将非所需对映体外消旋化，并且再用作手性分离的外消旋进料。[1078]在一些实施例中，式IX化合物具有式：[1079]在一些实施例中，对映体的过量等于或大于约10%、约20%、约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%、约99.1%、约99.2%、约99.3%、约99.4%、约99.5%、约99.6%、约99.7%、约99.8%、约99.9%或约99.99%〇[1080]在一些实施例中，回收所需对映体的收率为91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%，优选收率大于90%或95%。[1081]在一些实施例中，该方法还包括使式IX化合物：[1082；[1083]与式XI化合物：[1084][1085]在钯催化剂、碱和溶剂的存在下反应，其中反应条件和时间足以形成包含式III化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[1086][1087]其中：[1088]*表示手性碳；[1089]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[1090]Rc和Rd每个独立地为-6烷基;或[1091]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环;且[1092]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基。[1093]在一些实施例中，该方法还包括使式IX化合物：[1094][1095]与式X化合物：[1096][1097]在钯催化剂、碱和溶剂存在下反应，其中反应条件和时间足以形成包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物：[109ί[1099]其中：[1100]*表示手性碳；[1101]Ri选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基；[1102]Rc和Rd每个独立地为-6烷基;或[1103]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被I、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环；[1104]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基;且[1105]P1为保护基。[1106]在一些实施例中，X2为溴基、碘基或氯基。在一些实施例中，X2为氯基。[1107]可使用多种钯0和钯（II催化剂引发Suzuki偶合反应，并可在本领域中已知的条件下进行（参见例如Miyaura和Suzuki，Chem.Rev.1995、95，2457-2483，其全文据此以引用的方式并入）。在一些实施例中，钯催化剂为PdPPh34和Pddppf2C12。[1108]在一些实施例中，钯催化剂为四（三苯基膦钯0或四（三邻甲苯基膦钯0。在一些实施例中，钯催化剂为四（三苯基膦钯0。[1109]在一些实施例中，钯催化剂装填量为约lxHT4至约0.1当量。在一些实施例中，钯催化剂装填量为约〇.0010至约〇.0015当量。在一些实施例中，式X或XI化合物与式IX化合物的化学计量比为约1:1.05至约1:1.35。[1110]在一些实施例中，溶剂包括水和有机溶剂。在一些实施例中，有机溶剂为1，4_二噁烷、1-丁醇、1，2_二甲氧基乙烷DME、2_丙醇、甲苯或乙醇或其组合。在一些实施例中，有机溶剂包括DME。在一些实施例中，有机溶剂包括DMF。[1111]在一些实施例中，碱为无机碱。在一些实施例中，碱为有机碱。在一些实施例中，碱为碱金属碳酸盐。在一些实施例中，碱为碳酸钾K2CO3。在一些实施例中，使用二至五当量的碱例如K2CO3。[1112]在一些实施例中，在约80至约100°C的温度下进行Suzuki偶合反应。在一些实施例中，反应进行二至十二小时。在一些实施例中，任选将式Ia或III化合物从Suzuki偶合反应混合物的处理水溶液中分离或直接使用。[1113]适当的P1基团和脱保护条件提供于上文。[1114]在一些实施例中，本发明提供制备式IX化合物的外消旋物的方法[1115][1116]包括使式XV化合物：[1117][1118]与式D-I化合物：[1119][1120]在碱存在下反应，以产生式IX化合物；[1121]其中：[1122]*表示手性碳；[1123]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[1124]R。和Rd每个独立地为-6烷基;或[1125]R。和Rd与它们所连接的氧原子及所述氧原子所连接的硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个-4烷基取代的5-至6-员杂环。[1126]在一些实施例中，在室温和催化量的碱存在下在有机溶剂中进行aza-Michael加成。碱可为适于aza-Michael反应的溶剂或碱。在一些实施例中，溶剂为乙腈或二甲基甲酰胺DMF。在一些实施例中，碱为卤化四烷基铵、氢氧化四烷基铵、胍、脒、氢氧化物、烷氧化物、硅酸盐、碱金属磷酸盐、氧化物、叔胺、碱金属碳酸盐、碱金属碳酸氢盐、碱金属磷酸氢盐、膦或羧酸的碱金属盐。在一些实施例中，Michael加成催化剂为四甲基胍、1，8-二氮杂双环5.4.0i^一-7-烯、1，5_二氮杂双环4.3.0壬-5-烯、1，4_二氮杂双环2.2.2辛烷、氢氧化叔丁基铵、氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、磷酸三钾、硅酸钠、氧化钙、三乙胺、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸氢钾、三苯基膦、三乙基磷、醋酸钾或丙烯酸钾。在一些实施例中，碱为1，8-二氮杂双环[5.4.0]i^一-7-烯DBU或碳酸钾。在一些实施例中，碱为DBU。在一些实施例中，碱以催化量存在。在一些实施例中，碱的量为约0.1至约5当量或约0.5至约3当量。在一些实施例中，反应在约10至约24小时内完成。[1127]在一些实施例中，该方法进一步包括将式Ia化合物在足以提供包含式III化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物的脱保护条件下进行处理：[112ί[1129]其中：[1130]*表示手性碳；[1131]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[1132]P1为保护基。[1133]适当的P1基团和脱保护方法包括但不限于上文所描述的那些。[1134]在一些实施例中，该方法进一步包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[1135]IV.式Ia外消旋物的手性富集和式Ia的非所需对映体的外消旋化[1136]可通过下文方案6中的Michael加成方法形成式Ia外消旋物。因此，可使式IV化合物与式D-I丙烯腈反应，以形成式Ia外消旋物。然后可通过手性柱色谱法分离式Ia外消旋物，以得到包含式Ia化合物的对映体过量的R-或S-对映体的组合物。然后可移除保护基，以产生式III化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体。[1137]方案6[1138][1139]因此，在一些实施例中，本发明提供制备包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或S-对映体的组合物的方法：[1140][1141]包括使包含式Ia化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物；[1142]其中：[1143]*表示手性碳；[1144]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[1145]P1为保护基。[1146]在一些实施例中，手性色谱单元为装有以手性固定相填充的手性柱的制备型高效液相色谱HPLC系统。在一些实施例中，手性柱为Chir_a_lp.ak®_iA。在一些实施例中，手性柱为ChiraICe丨㊣0D-H。在一些实施例中，色谱单元为装有一组八个柱的模拟移动床SMB色谱单元，每个柱以手性固定相填充。在一些实施例中，手性固定相为纤维素改性的手性固定相CSP，ChiralTechnologies。在一些实施例中，流动相包含乙醇和己烷。在一些实施例中，流动相包含体积比为约1:9的乙醇和己烷。在一些实施例中，流动相包含约15体积％的乙醇和约85体积％的己烷。在一些实施例中，流动相包含乙醇和己烷，其中乙醇以约25体积％至约10体积％的量存在。在一些实施例中，流动相包含异丙醇和己烷，其中异丙醇的存在量为约25体积％至约10体积％。在一些实施例中，色谱单元被保持在室温下。在一些实施例中，流动相以约ImL分钟至约20mL分钟的流速通过。在一些实施例中，流动相以约ImL分钟的流速通过。在一些实施例中，流动相以约18mL分钟的流速通过。在一些实施例中，通过紫外UV光谱法监测洗脱液。在一些实施例中，通过紫外光谱法在约220nm监测洗脱液。通过UV光谱法检测所需对映体的洗脱，由此可以测定收集的洗脱液中含对映体富集组合物的部分。然后可通过由分析型手性HPLC进行测定来确定组合物的％ee对映体过量）。[1147]在一些实施例中，对映体的过量等于或大于约10%、约20%、约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%、约99.1%、约99.2%、约99.3%、约99.4%、约99.5%、约99.6%、约99.7%、约99.8%、约99.9%或约99.99%〇[1148]在一些实施例中，使用装有以手性固定相填充的色谱柱的制备型高效液相色谱法HPLC系统进行手性色谱法。在一些实施例中，以由将直链淀粉三氨基甲酸3，5-二甲基苯酯）固定于硅胶上所制成的手性固定相可以“Chimlpak®lA”得自Daicel填充柱。在一些实施例中，以由纤维素三氨基甲酸3,5_二甲基苯酯涂布于硅胶上制成的手性固定相可以“：丨1丨13丨1^;丨$〇〇”得自0化61填充柱。在一些实施例中，色谱方法为连续色谱方法，如模拟移动床SMB色谱法或Varicol方法，Varicol方法使用装有一组3至12个、优选5至10个、最优选5至8个柱的单元，每个柱以相同的手性固定相填充。在一些实施例中，以手性固定相填充柱，该手性固定相由将直链淀粉三氨基甲酸3,5_二甲基苯酯）固定于硅胶上制成（可以“Chiralpak®IA”得自Daicel。在一些实施例中，以手性固定相填充柱，该手性固定相由将纤维素三（氨基甲酸3,5-二甲基苯酯）涂布于硅胶上制成（可以“〇111访1^機〇〇”得自Daicel。在一些实施例中，手性固定相为涂以4-3,5-二硝基苯甲酰氨基）四氢菲的硅胶基固定相（可以“S，SWhelk-®1”得自RegisTechnologies。在一些实施例中，流动相包含乙醇和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，乙醇的存在量为约10体积％至约100体积％、约10体积％至约25体积％或约15体积％。在一些实施例中，流动相包含异丙醇和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，异丙醇的存在量为约10体积％至约25体积％。在一些实施例中，流动相包含甲基-叔丁基醚和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，甲基-叔丁基醚的存在量为约10体积％至约100体积％、约50体积％至约100体积％或约90体积％至约100体积％。在一些实施例中，流动相包含乙酸乙酯和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，乙酸乙酯的存在量为约10体积％至约100体积％、约50体积％至约100体积％或约75体积％。在一些实施例中，流动相包含四氢呋喃和己烷。在一些实施例中，由庚烷、正庚烷、环己烷或甲基环己烷代替己烷。在一些实施例中，四氢呋喃的存在量为约10体积％至约100体积％、约10体积％至约50体积％或约25体积％。在一些实施例中，色谱单元在约5°C至约50°C、约10°C至约30°C或在约25°C的温度下或在环境温度下操作。[1149]在一些实施例中，所采用的色谱方法为分批制备型色谱法、超临界流体色谱法SFC、环喷射cyclojet方法、连续多层柱色谱方法、模拟移动床方法、Varicol™方法或PowerFeed方法。[1150]在一些实施例中，手性固定相包含相互作用剂，其为对映体富集的拆分剂，其通过例如化学结合或通过经由交联作用降低可溶性而被固定至惰性载体材料。合适的惰性载体材料可以是大孔的，例如交联聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯、氧化铝、硅藻石（硅藻土）、石英、高岭土、氧化镁或二氧化钛或硅胶。在一些实施例中，惰性载体材料为硅胶。[1151]在一些实施例中，手性固定相为直链淀粉或纤维素类多糖的成员，其选自纤维素氨基甲酸苯酯衍生物，如纤维素三3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯可以“Chiralee麗〇D”或“Ctliraip:ak®IB”得自DaicelChemicalIndustries，Ltd.Daicel，其中氨基甲酸酯衍生物与纤维素主链结合）；纤维素三苯甲酸酯衍生物，如纤维素三4-甲基苯甲酸酯（可以“Chiralee娜0J”得自DaiCeI;纤维素三桂皮酸酯可以“Chira.lc.e_OK”得自DaiCe1;淀粉酶苯基和苄基氨基甲酸酯衍生物，如直链淀粉三[S-Ct-甲基苄基氨基甲酸酯]可以“Chiralpak⑧AS”得自Daicel;直链淀粉三（3,5-二甲基苯基）氨基甲酸酯（可以“Chimlpak®AD”或“Chiralpak®IA”得自Daice1，其中氨基甲酸酯衍生物与直链淀粉主链结合）；直链淀粉3,4_取代的氨基甲酸苯酯或直链淀粉4-取代的氨基甲酸苯酯；以及直链淀粉三桂皮酸酯。在一些实施例中，手性固定相包括ChiraIpakXIA或ChiralpakAD。在一些实施例中，手性固定相包括Chirakeli〇D。在一些实施例中，手性固定相为Pirkle相族的成员，如苯基甘氨酸的3，5-二硝基苯甲酰基衍生物（可以“phenylglycine”得自RegisTechnologiesInc·;亮氨酸的3，5-二硝基苯甲酰基衍生物（可以“Leucine”得自RegisTechnologiesInc.;N_3,5-二硝基苯甲酰-3-氨基-3-苯基-2-1，1-二甲基乙基-丙酸酯可以“β-GEMl”得自RegisTechnologiesInc.;N_3,5-二硝基苯甲酰基-氨基-2,2-二甲基_4_戊稀基膦酸二甲酯（可以“a-BURKE2”得自RegisTechnologiesInc.;3_3,5-二硝基苯甲酰氨基-4_苯基-β-内酰胺可以“PIRKLE1-J”得自RegisTechnologiesInc.;二苯基乙二胺的3,5-二硝基苯甲酰基衍生物可以“ULM0”得自RegisTechnologiesInc.;4-3，5-二硝基苯甲酰氨基）四氢菲（可以“s，sWhelk-O®1”和“R，RWlielk-O®1”，或“S，SWhelk-Qli2”和“R，RWhelk-Oκ;2”得自RegistechnologiesInc.;1,2-二氨基环己烧的3,5-二硝基-苯甲酰基衍生物可以“DACH-DNB〃得自RegistechnologiesInc.。在一些实施例中，手性固定相包括“s，sWhelk-Oss1”或“R，R1Wlielk-O1。[1152]在一些实施例中，手性固定相的粒径通常为1至300μηι、2至100μηι、5至75μηι或10至3Oum〇[1153]在一些实施例中，流动相为非极性、极性质子或非质子溶剂或其混合物。在一些实施例中，流动相为二氧化碳与极性质子溶剂的混合物。合适的非极性溶剂包括例如烃，例如正戊烷、正己烷、己烷、正庚烷、庚烷、环己烷和甲基环己烷。合适的质子或非质子溶剂包括例如醇，特别是甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、异丁醇、叔丁醇;醚，例如甲基叔丁基醚；酯，例如乙酸乙酯；卤化烃和乙腈。在一些实施例中，非极性溶剂为正庚烷。在一些实施例中，质子或非质子溶剂为乙醇、2-丙醇或甲基-叔丁基醚。在一些实施例中，流动相为庚烷与乙醇的混合物。在一些实施例中，乙醇在流动相中的存在量为约10%至约100%、约10%至约25%或约15%。在一些实施例中，流动相为庚烷和2-丙醇的混合物。在一些实施例中，2-丙醇在流动相中的存在量为约10%至约100%、约10%至约25%或约20%。在一些实施例中，流动相为庚烷和甲基-叔丁基醚的混合物。在一些实施例中，甲基-叔丁基醚在流动相中的存在量为约10%至约100%、约75%至约100%或约90%至约100%。在一些实施例中，在约0°C至50°C、约10°C至30°C或约25°C的温度下进行色谱法。[1154]在一些实施例中，回收所需对映体的对映体纯度为大于约90%、大于约98%或大于约99.0%。在一些实施例中，回收所需对映体的收率大于约70%、大于约90%或大于约95%〇[1155]在一些实施例中，制备所需对映体的生产速率为每天每千克固定相大于约0.1kg、0.4kg或0.8kg纯对映体。[1156]在一些实施例中，在减压下蒸发后回收分离的对映体，为浓缩油状物。[1157]在一些实施例中，循环利用手性色谱方法中所用的流动相。[1158]在一些实施例中，将非所需对映体外消旋化，并且再用作手性分离的外消旋进料。[1159]在一些实施例中，回收所需对映体的收率为至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%，或者优选收率大于90%或95%。[1160]或者，可使式Ia的外消旋物与手性酸E-I如⑴-二苯甲酰基-D-酒石酸反应以形成手性盐E-2方案7。在结晶、过滤并以碱处理后，产生包含式Ia化合物的对映体过量的（R-或（S-对映体的组合物。然后可移除保护基，以产生式III化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体。[1161]方案7[1162[1163]因此，在一些实施例中，本发明提供制备包含式Ia化合物的对映体过量的（R-或S-对映体的组合物的方法：[1164][1165]包括：[1166]a使包含式Ia化合物的外消旋物的组合物与手性酸在溶剂的存在下反应，以形成式Ia化合物的盐；[1167]⑹分离包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或（S-对映体的手性盐的组合物；和[1168]c以碱处理手性盐，以形成包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或（S-对映体的组合物：[1169]其中：[1170]*表示手性碳；[1171]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基;且[1172]P1为保护基。[1173]可使用任何可用于手性拆分的手性酸。在一些实施例中，在一些实施例中，手性酸选自以下酸的光学活性形式:扁桃酸、2-氯扁桃酸、樟脑磺酸、酒石酸、乳酸、苹果酸、3-溴樟脑-8-磺酸、3-溴樟脑-10-磺酸、10-樟脑磺酸、二苯甲酰酒石酸、二-对甲苯酰酒石酸、2-氨基-7,7-二甲基双环[2,2，1]庚-1-亚甲基磺酸和2-丙烯酰胺-7,7-二甲基双环并[2,2，1]庚-1-亚甲基磺酸。在一些实施例中，手性酸为⑴-二苯甲酰-D-酒石酸。[1174]在一些实施例中，溶剂包括乙腈、四氢呋喃、丙酮或其组合。在一些实施例中，溶剂为约90:15:15比例的乙腈、四氢呋喃和丙酮（15.011^，0.204111〇1。[1175]在一些实施例中，对映体的过量等于或大于约10%、约20%、约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%、约99.1%、约99.2%、约99.3%、约99.4%、约99.5%、约99.6%、约99.7%、约99.8%、约99.9%或约99.99%〇[1176]在一些实施例中，分离涉及冷却溶剂，以使手性盐沉淀。在一些实施例中，分离涉及添加第二种溶剂，以使手性盐沉淀。在一些实施例中，分离包括过滤溶剂，以回收手性盐。在一些实施例中，溶剂包括乙腈、四氢呋喃、丙酮或其组合。在一些实施例中，反应在约室温至约60°C的温度下进行。[1177]该方法可利用适于制备手性盐的游离碱的任何碱。在一些实施例中，碱为碱金属或碱土金属氢氧化物或碳酸盐。在一些实施例中，碱为碱金属氢氧化物。在一些实施例中，碱为氢氧化钠。在一些实施例中，处理包括将碱的水溶液添加到手性盐的溶液中，接着从该水溶液中分离该溶液。在一些实施例中，该方法进一步包括移除溶剂。[1178]除了上文所述的手性富集方法之外，可以这样将式Ia化合物的非所需对映体转化成外消旋物质，进行碱催化的逆Michae1加成以形成式IV化合物，接着与式D-1的丙烯腈反应，以产生式Ia的外消旋Michael加合物，如方案8中所示。或者，可以在式D-I的Michael受体存在下将式Ia的非所需对映体差向异构化，从而得到式Ia的外消旋物，如方案8中所示。然后可通过上述手性柱分离和手性盐方法拆分外消旋物，以得到所需对映体。[1179]方案8[1180[1181]因此，本发明提供制备包含式Ia化合物外消旋物的组合物的方法：[1182[1183]包括：[1184]a将包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物以式D-I化合物[1185]D-I[1186]在第一种碱存在且足以形成式IV化合物的条件下进行处理：[1187]IV[1188]以及[1189]⑹使式IV化合物与式D-I化合物在第二种碱存在下反应；[1190]其中：[1191]*表示手性碳；[1192]P1为保护基;且[1193]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[1194]在一些实施例中，第一种碱为碱金属或碱土金属碱。在一些实施例中，第一种碱为碱金属或碱土金属碱烷氧化物、氢氧化物或碳酸盐。在一些实施例中，第一种碱为碱金属或碱土碳酸盐。在一些实施例中，第一种碱为碱土碳酸盐。在一些实施例中，第一种碱为碳酸铯。在一些实施例中，第一种碱为碱金属叔丁氧化物。在一些实施例中，第一种碱为叔丁醇钾。[1195]在一些实施例中，第二步骤是在室温下在有机溶剂中于催化量的第二种碱存在下进行的。第二种碱可为合适的溶剂或用于aza-Michael反应的第二种碱。在一些实施例中，溶剂为乙腈或二甲基甲酰胺DMF。在一些实施例中，第二种碱为卤化四烷基铵、氢氧化四烷基铵、胍、脒、氢氧化物、烷氧化物、硅酸盐、碱金属磷酸盐、氧化物、叔胺、碱金属碳酸盐、碱金属碳酸氢盐、碱金属磷酸氢盐、膦或羧酸的碱金属盐。在一些实施例中，碱为四甲基胍、1，8_二氮杂双环（5.4.0^-7-烯、1，5_二氮杂双环（4.3.0壬-5-烯、1，4_二氮杂双环2.2.2辛烷、氢氧化叔丁基铵、氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、磷酸三钾、硅酸钠、氧化钙、三乙胺、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸氢钾、三苯基膦、三乙基磷、醋酸钾或丙烯酸钾。在一些实施例中，第二种碱为1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯DBU或碳酸钾。在一些实施例中，第二种碱为DBU。在一些实施例中，碱以催化量存在。在一些实施例中，第二种碱的量为约0.1至约5当量，或约0.5至约3当量，或约0.1至约0.5当量。在一些实施例中，反应在约1至约3小时内完成。[1196]或者，本发明进一步提供制备包含式Ia化合物外消旋物的组合物的方法：[1197]Ia[1198]包括将包含式Ia化合物的对映体过量的⑻-或⑸-对映体的组合物以式D-I化合物：[1199]D-I[1200]在碱存在且足以形成式Ia化合物的外消旋物的件下条进行处理；[1201]其中：[1202]*表示手性碳；[1203]P1为保护基;且[1204]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[1205]在一些实施例中，碱为碱金属或碱土金属碱。在一些实施例中，碱为碱金属或碱土金属碱烷氧化物、氢氧化物或碳酸盐。在一些实施例中，碱为碱金属或碱土碳酸盐。在一些实施例中，碱为碱土碳酸盐。在一些实施例中，碱为碳酸铯。在一些实施例中，碱为碱金属叔丁氧化物。在一些实施例中，碱为叔丁醇钾。[1206]式Ia化合物的外消旋物：[1207][1208]可通过如下方法制备，该方法包括将式IV化合物：[1209][1210]以式D-I化合物：[1211][1212]在足以形成式Ia化合物的外消旋物的件下条进行处理；[1213]其中：[1214]*表示手性碳；[1215]P1为保护基;且[1216]R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[1217]按方案9中所示制备式D-I的3-取代丙烯腈。在约0至约5°C下，在有机溶剂如THF中在碱如叔丁醇钾）的影响下进行以具有式-CH2CN叶立德的Wittig型试剂如氰甲基膦酸二乙酯对式D-2的醛环戊烷羧甲醛或环丙烷羧甲醛）的烯化。在一些实施例中，可通过真空蒸馏来纯化所得式D-I的3-取代的丙烯腈。[1218]方案9[1219][1220]因此，在一些实施例中，可通过如下方法制备式D-I化合物：[1221][1222]该方法包括使式D-2化合物：[1223][1224]与具有式-CH2CN叶立德的Wittig型试剂在碱存在下反应；[1225]其中R1选自C3-7环烷基、-6烷基和-6氟烷基。[1226]在本文中使用的术语“Wittig型试剂”是指在本领域中所述的维蒂希Wittig反应、沃兹沃思-埃蒙斯Wadsworth-Emmons反应和霍纳尔-维蒂希Horner-Wittig反应中所使用的试剂（参见例如Carey和Sundberg，AdvancedOrganicChemistry，B部分：ReactionsandSynthesis，第4版，KluwerAcademicPlenumPublishers:NewYork，第111-119页（2001;和March,AdvancedOrganicChemistry：ReactionsjMechanisms,andStructure，第3版，JohnWileySons:NewYork，第845-855页（1985，上述各文献的全文以引用的方式并入本文）。含氰甲基或氰甲基叶立德基团的示例性Wittig型试剂包括但不限于通式为（R，02P=0-L-R1、R”3P+-L㈠-R^r3P+-L-R1X5IT2P=0-L-R1和（R，N2P=OX-R1的化合物，其中R’SCn烧氧基或任选取代的苯基;R”为任选取代的苯基;CH2-或-CH-;R1为氰基;X为阴离子例如卤阴离子，如氯离子）。在一些实施例中，Wittig型试剂为氰甲基磷酸二乙酯。在一些实施例中，式D-2化合物与Wittig型试剂的反应在碱存在下进行。在一些实施例中，碱为强碱。在一些实施例中，碱为叔丁醇钾、叔丁醇钠、氢化钠、乙醇钠、氢氧化钠、碳酸钾或碳酸钠。在一些实施例中，碱为碱金属烷氧化物。在一些实施例中，在一些实施例中，碱为碱金属叔丁氧化物。在一些实施例中，碱为叔丁醇钾。在一些实施例中，在约0至约5°C的温度和碱如叔丁醇钾）的影响下，在有机溶剂如THF中进行式D-2的醛与Wittig型试剂的烯化。在一些实施例中，存在的碱相对于式D-2化合物为约1至约1.2当量，或约1.05至约1.1当量。在一些实施例中，存在的Wittig型试剂相对于式D-2化合物为约1至约1.2当量，或约1.05至约1.1当量。在一些实施例中，Wittig型试剂为氯化（甲氧基甲基三苯基鱗。[1227]在其它实施例中，该方法进一步包括使式Ia化合物在脱保护条件下反应，以形成式IΠ化合物：[1228:[1229]适当的P1基团和脱保护方法包括但不限于上文所描述的那些。[1230]在一些实施例中，该方法还包括使式III化合物与磷酸反应，以形成式III化合物的磷酸盐。[1231]V.形成中间化合物的途径[1232]i式IV中间化合物的高收率途径[1233]式IV化合物在上文所述式III化合物的各种合成途径中为重要的中间体。这些化合物通常通过Suzuki偶合方法形成。使用钯催化剂使经保护的式X所示的7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物与未经保护的式XV吡唑硼酸酯衍生物进行Suzuki偶合导致收率较低方案10。不希望受任何特定理论的束缚，据信收率较低是由Suzuki偶合反应中未经保护的胺官能团的干扰所致。[1234]方案10[1235][1236]因此，开发了制备式IV化合物的新方法，该方法涉及使用经保护的式XIII吡唑硼酸酯衍生物方案11。因此，可产生式XIII化合物，然后与经保护的式X所示的7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶衍生物反应，以形成式XII化合物，接着脱保护，从而得到式IV化合物。在一些实施例中，式XIII化合物可由吡唑硼酸频哪醇酯的原位保护形成。例如，当P2为1-乙氧基）乙基时，可使吡唑-4-基硼酸频哪醇酯与乙烯基醚原位反应，以产生经保护的式XIII化合物。然后在经保护的式XIII吡唑硼酸频哪醇酯与式X化合物之间的Suzuki偶合反应在典型的Suzuki反应条件下平稳地进行，从而在经式XII的相应偶合中间体的酸性处理后以较高的收率产生式IV化合物。[1237]在其它实施例中，式XIII化合物为经分离且充分表征的化合物。例如，使用经分离的充分表征的式XIII化合物其中P2为1-乙氧基）乙基，且硼酸酯部分为频哪醇基团）可以较佳的收率和纯度得到式XII产物及随后的式IV化合物。[1238]方案11[1239][1240]在其它实施例中，式X化合物可由式XI化合物原位产生，随后与式XIII化合物反应。这样就没有必要在大规模生产期间必须分离和纯化式X化合物。例如，当P1Ssem时，可使式XI化合物与氢化钠和SEM氯化物反应，以原位产生式X化合物方案12。[1241]方案12[1242][1243]因此，本发明提供制备式XII化合物的方法：[1244][1245]包括使式X化合物：[1246][1247]与式XIII化合物：[1248][1249]在钯催化剂、碱和溶剂存在下反应，以形成式XII化合物；[1250]其中：[1251]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基；[1252]卩^吧每个独立地为保护基；[1况]Rc和Rd每个独立地为!1或-6烷基;或[1254]R。和Rd与它们所连接的氧原子及硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个^-4烷基取代的5-至6-员杂环。[1255]在一些实施例中，该方法进一步包括制备式IV化合物的方法：[1256[1257]包括使式XII化合物在脱保护条件下进行反应，以产生式IV化合物；[1258]其中：[1259]PjPP2每个独立地为保护基;且[1260]R。和Rd每个独立地为!1或-6烷基;或[1261]R。和Rd与它们所连接的氧原子及硼原子合起来形成任选被1、2、3或4个^-4烷基取代的5-至6-员杂环。[1262]在一些实施例中，式XIII化合物为：[1263]在一些实施例中，X2为氯基、溴基或碘基。在一些实施例中，X2为氯基。[1264]可使用多种钯0和钯（II催化剂引发Suzuki偶合反应，并可在本领域中已知的条件下进行（参见例如Miyaura和Suzuki，Chem.Rev.1995、95，2457-2483，其全文据此以引用的方式并入）。在一些实施例中，钯催化剂为PdPPh34和Pddppf2C12。在一些实施例中，钯催化剂为四（三苯基膦钯⑼或四（三邻甲苯基膦钯〇。在一些实施例中，钯催化剂为四（三苯基膦钯⑼。[1265]在一些实施例中，钯催化剂装填量为约lxHT4至约0.1当量。在一些实施例中，钯催化剂装填量为约〇.0010至约〇.0015当量。在一些实施例中，式X化合物与式XIII化合物的化学计量比为约1:1.05至约1:1.35。[1266]在一些实施例中，溶剂包括水和有机溶剂。在一些实施例中，有机溶剂为1，4_二噁烷、1-丁醇、1，2_二甲氧基乙烷DME、2_丙醇、甲苯或乙醇或其组合。在一些实施例中，有机溶剂包括DME。在一些实施例中，有机溶剂包括DMF。[1267]在一些实施例中，碱为无机碱。在一些实施例中，碱为有机碱。在一些实施例中，碱为碱金属碳酸盐。在一些实施例中，碱为碳酸钾K2CO3。在一些实施例中，使用二至五当量的碱例如K2CO3。[1268]在一些实施例中，Suzuki偶合反应在约80至约100°C的温度下进行。在一些实施例中，反应进行二至十二小时。在一些实施例中，可任选将式XII化合物从Suzuki偶合反应混合物处理水溶液中分离或直接使用。[1269]在一些实施例中，X化合物为选自方案13中的那些，并可由所示式XI化合物为起始物质来形成。在一些实施例中，X2为氯基。在一些实施例中，式X化合物是分离或原位产生的，经进一步纯化或不经进一步纯化而作为随后Suzuki反应的起始物质。在一些实施例中，P1保护基为上文列出的那些。[1270]方案13[1271[1272]适当的P2保护基包括但不限于Wuts和Greene,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第4版，JohnWileySons:NewJersey，第696-887页（特别是第872-887页）2007中描述的胺的保护基，该文献的全文以引用的方式并入本文中。在一些实施例中，P2为可在不会取代丹保护基的条件下被选择性移除的保护基。在一些实施例中，P2为可在酸性条件下在室温、在约15°C至约40°C的温度或在约15°C至约30°C的温度下被移除的保护基。在一些实施例中，P2为在室温酸性条件下脱保护的基团。在一些实施例中，P2Sl-乙氧基）乙基、三Ch烷基）甲硅烷基例如叔丁基二甲基甲硅烷基或三异丙基甲硅烷基）、对-甲氧基苄基PMB、三苯甲基Tr、二苯甲基、羟甲基、甲氧基甲基MOM、二乙氧基甲基或叔丁基二甲基甲硅烷基甲基。在一些实施例中，P2为1-乙氧基）乙基。[1273]可通过本领域中已知用于移除胺的特定保护基的方法来完成式XII化合物的处理以移除P2基团，如Wuts和Greene，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第4版，JohnWileySons:NewJersey，第696-887页（特别是第872-887页）（2007中所述，该文献的全文以引用的方式并入本文中。在一些实施例中，处理包括将式ΧΠ化合物在酸性条件例如盐酸或三氟乙酸和室温下、约15°C至约40°C的温度下或约15°C至约30°C的温度下进行处理。在一些实施例中，处理包括将式XII化合物用约IN至约5N的盐酸水溶液在约10°C至约30°C的温度下进行处理。[1274]适当的P1基团包括但不限于上文所描述的那些。[1275]式X化合物可通过保护式XI化合物形成。因此，在一些实施例中，制备式X化合物的方法包括处理式XI化合物：[1276][1277]以添加保护基，从而形成式X化合物[1278][1279]其中：[1280]X2为甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团、碘基、氯基或溴基;且[1281]P1为保护基。[1282]在一些实施例中，可在用亲电体（如特戊酸氯甲酯POM-Cl或三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯（SEM-Cl处理前，在低温下（优选在约0至约5°C的温度下），在有机溶剂（如THF、1，4-二噁烷、1，2-二甲氧基乙烷DME或N，N-二甲基乙酰胺DMAC中用碱优选用氢化钠NaH将式XI化合物去质子化，以添加保护SP1。经保护的化合物X是分离或原位产生的，经进一步纯化或不经进一步纯化而作为随后Suzuki反应的起始物质。[1283]在本文中所述的其它方法中，视情况可使用由本文中所述方法形成的中间体。[1284]ii.式C-9硼酸频哪醇酯的制备[1285]本发明进一步提供制备可用于本文中所述方法的式XVI吡唑硼酸频哪醇酯的方法。式XVI化合物的一个特定亚组为式XIIIa的4-取代吡唑硼酸酯衍生物，其可用于取代上述式XIII化合物。[1286][1287]可通过方案14中所示的方法制备XVI化合物。首先，使吡唑与卤化剂进行反应，以得到式XIX的单卤代或二卤代吡唑其中X3为碘基或溴基，且m为1或2。然后保护式XIX化合物，以得到经保护的式XVIII单卤代或二卤代吡唑。然后可将式XVIII的化合物用烷基格氏试剂或烷基锂试剂处理，接着用式XVII的2-烷氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷试剂处理，以形成所需的式XVI的硼酸频哪醇酯。在一些实施例中，P3保护基为对格氏反应或锂反应的处理水溶液稳定的保护基例如其中P3为1-乙氧基）乙基）。在其它情况下，朽为对格氏反应或烷基锂反应的处理水溶液不稳定的保护基。在这种情况下，将需要另外的保护步骤来添加保护基P3。在一些实施例中，为易于处理，P3选自上文针对P2所列出的基团。[1288]方案14[1289][1290]因此，在一些实施例中，本发明提供制备式XVI化合物的方法：[1291][1292]包括：[1293]a使式XVIII化合物[1294][1295]与约域更多当量的-6烧基格氏试剂或-6烧基锂试剂反应，接着以约域更多当量的式XVII化合物进行处理：[1296][1297]以及[1298]⑹任选地，再保护步骤a的产物，从而得到式XVI化合物；[1299]其中：[1300]P3为保护基；[1301]X3为卤素；[1302][1303]m为选自1和2的整数。[1304]在一些实施例中，式XVIII化合物与格氏试剂或锂试剂的比例为约1:1至约1:2.0、约1:1至约1:1.8或约1:1至约1.2。通常，反应在非质子有机溶剂中进行。在一些实施例中，溶剂为四氢呋喃。在一些实施例中，式XVIII化合物与式XVII化合物的比例为约1:1至约1:5、约1:1至约1:3或约1:1.5至约1:2.5。[1305]在一些实施例中，格氏试剂用于步骤a中，且温度为_30°C至约室温、约-30至约0°C或约-25至约-5°C。在一些实施例中，锂试剂用于步骤a中，并且温度为约-80°C至约-60°C或约_78°C。[1306]在一些实施例中，格氏试剂为异丙基溴化镁或其加合物。[1307]在一些实施例中，R4SC1-A烷基。在一些实施例中，R4SC1-S烷基。在一些实施例中，R4为甲基或异丙基。在一些实施例中，X3为碘基或溴基。在一些实施例中，m为2。在一些实施例中，m为1。[1308]一些情况中的式XVIII化合物可以是已知的（参见例如Abe等，Heterocycles,2005，66，229-240;Korolev等，Tet·Lett·2005，46，5751-5754;Vasilevsky,Heterocycles，2003,604,879-886;和WO2008082198,上述内容均以全文引用的方式并入本文中）。在其它实施例中，该方法进一步包括制备式XVIII化合物的方法，包括保护式XIX化合物：[1309][1310]其中：[1311]P3为保护基；[1312]为齒素;且[1313]m为选自1和2的整数。[1314]一些情况中的二取代或单取代的式XIX化合物可以是已知的（参见例如WO2007043677;Vasilevsky,Heterocycles，2003，604，879-886;WO2008013925;和Huttel等，Ann.1959，625，55，上述内容均以全文引用的方式并入本文中）。在一些实施例中，该方法进一步包括制备式XIX化合物的方法，包括使IH-吡唑与卤化剂反应；[1315]其中：[1316]心为齒素;且[1317]m为选自1和2的整数。[1318]在一些实施例中，X3为碘基或溴基。在一些实施例中，卤化剂选自N-溴代琥珀酰亚胺NBS或N-碘代琥珀酰亚胺，其中X3为溴基或碘基。[1319].在本文中所述的其它方法中，视情况可使用由本文中所述方法形成的中间体。[1320]111.4-氯-7!!-吡咯并[2,3-1]嘧啶的制备[1321]式XI化合物在本文中所述的一些合成方法中为有用的中间体。在一些实施例中，本发明提供制备式XI化合物，即4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶XIa的方法，其中X2为氯基方案15。[1322][1323]通过用酸处理式F-I化合物来合成4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶XIa。可通过以具有式CH2OCH3叶立德的Wittig试剂处理式F-2化合物来合成式F-I化合物。可按如下方式形成式F-2化合物：以市售的4,6-二轻基喃啶F-4化合物）为起始物质，通过Vilsmeier甲酰化-氯化形成式F-3化合物，接着进行选择性氨解，从而形成式F-2化合物。[1324]方案15[1：[1326]因此，在一些实施例中，本发明提供制备式XIa化合物的方法：[1327][1328]包括将式F-I化合物：[1329][1330]用酸在足以形成式D-I化合物的条件下进行处理。[1331]在一些实施例中，酸为强酸。在一些实施例中，酸为浓盐酸水溶液约18M。在一些实施例中，这些条件包括在溶剂中于回流温度下进行反应。在一些实施例中，反应在约5至约15小时内完成。[1332]在一些实施例中，该方法进一步包括制备式F-I化合物的方法，包括使式F-2化合物：[1333][1334]与约1或更多当量的具有式-CH2OCH3叶立德的Wittig型试剂在碱存在下反应。[1335]在本文中使用的术语“Wittig型试剂”是指本领域中所述的维蒂希反应、沃兹沃思-埃蒙斯Wadsworth-Emmons反应和霍纳尔-维蒂希Horner-Wittig反应中所用的试剂参见例如Carey和Sundberg，AdvancedOrganicChemistry，B部分：ReactionsandSynthesis，第4版，KluwerAcademicPlenumPublishers:NewYork，第111-119页（2001;和March,AdvancedOrganicChemistry：Reactions,Mechanisms,andStructure，第3版，JohnWileySons:NewYork，第845-855页（1985，各文献的全文均以引用的方式并入本文）。含氰甲基或氰甲基叶立德基团的示例性Wittig型试剂包括但不限于通式为（R’02P=0-L-RW’sP+-L㈠-RW’sP+-L-R1X5IT2P=0-L-R1和R，N2P=0-L-R1的化合物，其中R’为-6烷氧基或任选取代的苯基;R”为任选取代的苯基;L为-CH2-或-CH-;R1为甲氧基;X为阴离子例如卤阴离子，如氯离子）。在一些实施例中，Wittig型试剂为甲氧基甲基磷酸二乙酯。在一些实施例中，式F-I化合物与Wittig型试剂在碱存在下反应。在一些实施例中，碱为强碱。在一些实施例中，碱为叔丁醇钾、叔丁醇钠、氢化钠、乙醇钠、氢氧化钠、碳酸钾或碳酸钠。在一些实施例中，碱为碱金属烷氧化物。在一些实施例中，碱为碱金属叔丁氧化物。在一些实施例中，碱为叔丁醇钾。在一些实施例中，在约〇至约5°C的温度和碱如叔丁醇钾）的影响下，在有机溶剂如THF中进行式F-I的醛与Wittig型试剂的烯化。在一些实施例中，存在的碱相对于式F-I化合物为约1至约1.2当量，或约1.05至约1.1当量。在一些实施例中，存在的Wittig型试剂相对于式F-I化合物为约1至约1.2当量，或约1.05至约1.1当量。在一些实施例中，Wittig型试剂为氯化（甲氧基甲基三苯基鱗。[1336]在一些实施例中，该方法进一步包括制备式F-2化合物的方法，包括使式F-3化合物：[1337][1338]与约2或更多当量的氨在溶剂中反应。[1339]在一些实施例中，溶剂为甲醇。在一些实施例中，相对于式F-2化合物，碱以约两当量存在。[1340]在一些实施例中，该方法进一步包括制备式F-3化合物的方法，包括使式F-4化合物：[1341][1342]与氯化剂反应。[1343]在一些实施例中，氯化剂为氧氯化磷。在一些实施例中，相对于式F-3化合物，存在的氯化剂为约或大于约2当量、约或大于约3当量，或者为约或大于约4当量，或者为约3至约5当量。[1344].在本文中所述的其它方法中，视情况可使用由本文中所述方法形成的中间体。具体实施方式[1345][1346]在一些实施例中，本发明提供制备组合物的方法，该组合物包含式III’化合物的对映体过量等于或大于90%的⑻-对映体：[1347[1348]包括：[1349]a将式XΓ化合物：[1350][1351]以氢化钠和N-特戊酰氧甲基氯处理，以形成式X’化合物：[1352][1353]⑹将式X’化合物用式XIII’化合物：[1354][1355]在Pd三苯基膦4、碳酸钾和溶剂存在下进行处理，以形成式XII’化合物：[1356][1357]C使式XII’化合物在脱保护条件下反应，从而得到式IV’化合物：[1358][1359]d使式IV”化合物与式XIV’化合物：[1360][1361]在1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯存在下反应，从而得到式IΓ化合物：[1362；[1363:__[1364]e使式II’化合物与氢气在[RhCDD2]CF3SO3和选自以下的手性膦配体存在下进行反应：[1365[1366]以形成式Γ化合物：[1367]以及[1368]f使式Γ化合物在脱保护条件下反应，以形成式III’化合物；[1369]其中*表示手性碳。[1370]在步骤e的一些实施例中：[1371]溶剂为2,2,2_三氟乙醇TFE;[1372]氢化催化剂装填量为约0.005至约O.Ol摩尔％;[1373]式II化合物与氢化催化剂的比例为约200001至约100001;[1374]氢压力为约7至约60巴；[1375]反应在约室温至约75°C的温度下进行；[1376]反应进行到式II化合物向式化合物的转化率约等于或大于99.5%;且[1377]反应约10至约25小时。[1378]在一些实施例中，该方法进一步包括制备式XI’化合物：[1379][1380]包括：[1381]⑴使F-4化合物：[1382][1383]与约三至约五当量的POCl3在约一至约二当量的二甲基甲酰胺存在下进行反应，以形成式F-3化合物：[1384][1385]ii使F-3化合物与约二当量的氨在甲醇中进行反应，以形成式F-2化合物：[1386][1387]iii使式F-2化合物与约1至约1.5当量的式[Ph3P+CH2OCH3]Cl-的Wittig型试剂其中Ph为苯基在约1至约1.5当量的叔丁醇钾存在下进行反应，以形成式F-I化合物：[1388]以及[1389]iv在四氢呋喃中，将式F-I化合物用浓盐酸水溶液进行回流处理，以形成式XI’化合物。[1390]在一些实施例中，该方法进一步包括制备式XIII’化合物：[1391][1392]包括：[1393]⑴使IH-吡唑与N-溴代琥珀酰亚胺反应，以形成式XIX’化合物；[1394][1395]ii保护式XIX化合物，以形成式XVIII’化合物：[1396],K及[1397]iii使式XVIII’化合物与约一或更多当量的异丙基氯化镁反应，然后用约一或更多当量的式XVII’化合物进行处理：[1398][1399]以形成式XIII’化合物。[1400]在一些实施例中，该方法进一步包括制备式XIII’化合物：[1401][MO2]包括：[1403]⑴保护4-碘-IH-吡唑，以形成式XVIII”化合物：[1404];以及[1405]ii使式XVIII”化合物与约一或更多当量的异丙基氯化镁在四氢呋喃中反应，然后用约一或更多当量的式XVII’化合物进行处理：[1406][1407]以形成式XIII’化合物。[1408]在进一步的实施例中，本发明提供制备包含式III’化合物的对映体过量的R-对映体的组合物的方法：[1409][1410]包括：[1411]a将式XI’化合物：[1412][1413]用氢化钠和2-三甲基甲硅烷基）乙氧基甲基处理，以形成式X”化合物：[1414][1415]⑹将式X”化合物用式XIII’化合物：[1416][1417]在Pd三苯基膦4、碳酸钾和溶剂存在下进行处理，以形成式XII”化合物：[1418][1419]c使式XII”化合物在脱保护条件下反应，以形成式IV”化合物：[1421][1422]d使式IV”化合物与式D-1’化合物：[1420][1423][1424]在足以形成包含式Γ化合物的外消旋物的组合物的条件下进行反应：[1425][1426]e使包含式Γ化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式Γ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；以及[1427]f使式Γ化合物与四氟硼酸锂反应，接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物；[1428]其中*为手性碳。[1429]在其它实施例中，本发明提供制备包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[143C[1431]包括：[1432]a将包含式Γ化合物的对映体过量的⑸-对映体的组合物：[1433][1434]以式D-1’化合物：[1435][1436]在碳酸铯存在下，在乙腈中于足以形成式Γ化合物的外消旋物的条件下进行处理；[1437]b使包含式1〃化合物的外消旋物的组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含式Γ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；以及[1438]C使式Γ化合物与四氟硼酸锂反应，接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物；[1439]其中*为手性碳。[1440]在其它实施例中，本发明提供制备包含式ΙΙΓ化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[1441][1442]包括：[1443]a将式XI’化合物：[1444][1445]用氢化钠和2-三甲基甲硅烷基）乙氧基甲基处理，以形成式X”化合物：[1446][1447]⑹将所述式X”化合物用式XIII’化合物：[1448][1449]在Pd三苯基膦4、碳酸钾和溶剂存在下进行处理，以形成式XII”化合物：[1450][1451]c使所述式XII”化合物在脱保护条件下反应，以形成式IV”化合物：[1452][1453]d使所述式IV”化合物与式D-1’化合物：[1454][1455]在足以形成包含式Γ化合物的外消旋物的组合物的条件下反应：[1456][1457]e使包含所述式Γ化合物的所述外消旋物的所述组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含对映体过量的所述式Γ化合物的R-对映体的组合物；以及[1458]f使所述式Γ化合物与三氟化硼乙醚化物反应，接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式ΠΓ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；[1459]其中*为手性碳。[1460]在其它实施例中，本发明提供制备包含式ΙΙΓ化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[1461][1462]包括：[1463]a将包含式Γ化合物的对映体过量的⑸-对映体的组合物：[1464][1465]用式D-1’化合物：[1466][1467]在碳酸铯存在下，在乙腈中于足以形成式Γ化合物的外消旋物的情况下进行处理；[1468]⑹使包含所述式1〃化合物的所述外消旋物的所述组合物经过使用流动相的手性色谱单元，并收集包含对映体过量的所述式Γ化合物的R-对映体的组合物；以及[1469]C使所述式Γ化合物与三氟化硼乙醚化物反应，接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式ΠΓ化合物的对映体过量的R-对映体的组合物；[1470]其中*为手性碳。[1471]在其它实施例中，本发明提供制备包含式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：[1472][1473]包括:使所述式Γ化合物：[1474:[1475]与三氟化硼乙醚化物反应，接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式III’化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物;其中*为手性碳。[1476]在其它实施例中，本发明提供制备3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐的方法，包括使3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈与磷酸在2-丙醇和二氯甲烷存在下进行反应。[1477]在其它实施例中，本发明提供纯化3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐的方法，包括将3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐从包含甲醇、2-丙醇和正庚烷的溶剂混合物中再结晶。在一些实施例中，将2-丙醇和正庚烷添加到3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐在甲醇中的混合物里。[1478]将通过具体实例对本发明做更详细地说明。以下实例是出于说明目的而提供，并不旨在以任何方式限制本发明。本领域的技术人员将易于认识到多个非关键参数，其可经改变或修正以得到基本上相同的结果。[1479]^lJI[1481][4-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（5。向配备有搅拌棒、隔片、热电偶、500mL加料漏斗和氮气入口的烘干的3L4颈圆底烧瓶中装填氢化钠他!1，矿物油中60重量％，32.828,0.82111〇1，1.20当量）和无水1，2-二甲氧基乙烷（01®，500mL，4.8mol，并将所得混合物冷却至0-3°C。向烘干的IL圆底烧瓶中装填4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（1，105·Og，O·684mol和1，2-二甲氧基乙烷DME，750mL，7·2mol，然后在5-12°C下，将所得浆料经由大口径套管经30分钟分次添加到氢化钠于DME中的悬浮液里。所得反应混合物是不均匀的。在添加后，移除冷浴，并使混合物逐渐升温至室温，且在在室温下搅拌1小时，然后冷却至〇-5°C。将特戊酸氯甲酯（特戊酰氧甲基氯，POM-CI，112mL，0.752mol，1.1当量经30分钟滴加到反应混合物中，同时在0-5°C下进行搅拌。特戊酸氯甲酯的添加是温和放热的，使反应温度至高达14°C。在添加特戊酸氯甲酯后，移除冷却浴，并使反应混合物回到室温且在室温下搅拌90分钟。当确认反应完成（如通过TLC和LCMS确认）时，以水（IOOmL小心地使反应淬灭。将此含有粗POM-保护的氯脱氮杂嘌呤2的淬灭反应混合物在不进一步处理和纯化的情况下直接用于后续的Suzuki偶合反应。[1482]在室温下向上述制备的含有粗POM保护的氯脱氮杂嘌呤（2的淬灭反应混合物中添加4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基）-IH-吡唑（3，200g，0.75mol，1.10当量和碳酸钾K2CO3，189g，1.37mol，2.0当量）。使氮气流通过溶液15分钟，由此将所得混合物脱气，然后用四（三苯基膦钯⑼（PdPPh34，7.9g，0.68mmol，0.01当量处理，并将所得反应混合物加热回流约82°C10小时。当确认反应完成（如通过TLC1:1己烷乙酸乙酯和LCMS确认时，将反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯2L和水（IL稀释。将两层分离，用乙酸乙酯EtOAc，500mL萃取水层。用水2X1L和盐水（IL洗涤合并的有机层，然后在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状物的粗{4-[1-1-乙氧基乙基）-IH-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯4，其不经进一步纯化便直接用于后续的脱保护反应。[1483]在室温下向粗{4-[I-1-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯⑷于THF1L，12.3mol中的溶液里添加4NHCl水溶液500mL。随后将所得反应混合物在室温下搅拌5小时。当确认反应完成（如通过TLC和LCMS确认）时，将反应混合物冷却至〇_5°C，然后用IM氢氧化钠水溶液NaOH2L将pH调节至9-10。将混合物在减压下浓缩以移除大部分THF，并将所得悬浮液在室温下搅拌2小时。通过过滤收集固体，用水3X500mL洗涤，并在真空中干燥，得到呈白色至灰白色固体的粗[4-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（5，157.5g，理论上204.43g，77%收率，经三个步骤），经证实其纯度足以在不经进一步纯化的情况下进行后续的反应98面积％，通过HPLC分析）。对于5:1HNMRDMS0-d6,400MHzδρρπι13.42brs，1H,8.76s，lH,8.67s，lH,8.33s,lH,7.68d,lH,J=3.8Hz,7.11d,IH,J=3.8Hz,6.21s,2H,1.06s,9H；13C匪RDMS〇-d6,100MHzδρρπι177.74,152.31,152.09,151.91,139.52,130.39,120.51,113·93，101·91，67·26，38·98，27·26;C15H17N5O2MW，299·33，LCMSEIme300M++H。[1485]氰氧基苯6。在室温下，向配备有顶置式搅拌器、隔片、热电偶和氮气入口的烘干的500mL3颈圆底烧瓶中添加苯酚（20.0g，0.210mol、二乙醚（Et20,290mL和溴化氰BrCN，23.Og，0.2IOmol，1.0当量）。将所得溶液冷却至0-3°C，然后经由注射器、历经25分钟滴加三乙胺TEA，61.9mL，0.442mol，2.1当量）。将三乙胺添加至反应混合物为温和放热的，使反应温度至高达15°C。在添加三乙胺后，在5-15Γ下，反应混合物变为白色浆料，将其在0°C下剧烈搅拌2小时。当确认反应完成如通过TLC和LCMS确认时，用戊烷（150mL，1.30mol稀释反应混合物。滤出沉淀的三乙胺盐酸盐，并将该盐用二乙醚和戊烷（1比1体积比，200mL洗涤。然后将滤液在减压下浓缩，以移除大部分溶剂，并将含有粗氰氧基苯6的残留物在不经进一步纯化的情况下直接用于后续的反应，假定为理论收率。[1486]3-环戊基丙炔腈8。在室温下，向配备有搅拌棒、氮气入口、125mL加料漏斗和热电偶的烘干的500mL3颈圆底烧瓶中添加环戊基乙炔7，15.0g，0.143mol和无水四氢呋喃THF，170mL，2.10mol。然后将所得溶液冷却至-78°C，然后经25分钟滴加正丁基锂于己烷中的2.5M溶液63.lmL，0.158mol，1.1当量）。将所得环戊基乙炔锂溶液在-78°C下搅拌15分钟，然后在-78°C下经由套管滴加粗氰氧基苯6，25.Og，0.2IOmo1，1.5当量于无水四氢呋喃THF，30.OmL，0.400mo1中的溶液。将所得反应混合物在-78°C下再搅拌10分钟，然后移除冷却浴，然后使反应混合物逐渐升温至室温，并将其在室温下搅拌1-2小时。当确认反应完成时，将反应混合物用6N氢氧化钠水溶液Na0H，200mL和20%盐水溶液200mL淬灭。将水溶液用乙酸乙酯EtOAc，200mL处理，然后将两层分离。将有机层经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过快速柱色谱法（Si02,0至5%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈黄色至橙色油状物的3-环戊基丙炔腈8,14.3g，理论上17.0g，84%收率，经两个步骤）。对于8:1HNMRDMSO-Cl6，400MHz2·97m，1H，1·97m，2H，1·64m，4H，1·56m，2H。[1488]4-1-2-氰基-1-环戊基乙烯基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（9。在室温下，向配备有搅拌棒和氮气入口的500mL圆底烧瓶中装填3-环戊基丙炔腈8,8.5^，0.0713111〇1，1.52当量）、叱1二甲基甲酰胺01^，841^，1.08111〇1和[4-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（5，14·Og，0·0468mol和固体碳酸钾K2CO3，0.329g，0.00238mol，0.05当量）。然后将所得反应混合物在室温下搅拌60分钟。当TLC和HPLC显示确认反应完成时，将反应混合物用20%盐水溶液75mL淬灭，并将所得溶液用乙酸乙酯Et0Ac，3X75mL萃取。将合并的有机萃取物用20%盐水溶液75mL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过快速色谱法Si02,0至20%乙酸乙酯己烷梯度洗脱）纯化，得到呈白色固体的4-1-2-氰基-1-环戊基乙烯基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（9，16.4g，理论上为19.6g，83.7%收率）。对于9:1!1匪1?0150-16,3001抱）9.098，1!1，8.848，1!1，8.638，1!1，7.78d,lH,J=3.8Hz,7.17d,lH,J=3.8Hz,6.24s,2H,5.82s,lH,3.55m,lH,1.92m,2H,1.59brm，6H,1.06s，9H!C23H26N6O2MW,418.49，LCMSEIme419M++H。[1489]⑵-4-Q-3-氨基-环戊基-3-氧丙-!-烯基_1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（10。在室温下，向配备有搅拌棒和氮气入口的200mL圆底烧瓶中装填4-1-2-氰基-1-环戊基乙烯基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（9，8·OOg，0·019Imo1、三氟乙酸（TFA，40·6mL，0·528mo1和浓硫酸H2S〇4，3.77mL，0.0707mol。将所得反应混合物在室温下搅拌60分钟。当TLC和HPLC显示确认反应完成时，将反应混合物用水30.lmL，1.67mol淬灭。将淬灭反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后冷却至〇_5°C。然后将冷溶液用3N氢氧化钠水溶液NaOH，223mL处理，以将pH调节至8,然后用乙酸乙酯Et0Ac，200mL处理。将两层分离，然后将水溶液用乙酸乙酯Et0Ac，2X50mL萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液（IOOmL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过快速色谱法（SiO2，0至100%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈淡黄色固体的⑵-4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙-1-烯基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（10，6.79g，理论上8.34g，81.4%收率）。对于Hh1HNMRDMS0-d6,300MHz8.77s，lH，8.68s，lH,8.41s，lH,7.71d，lH，J=3.8Hz,7.51br.s,lH,7.09br.s,1H,7.05d,IH,J=3.8Hz,6.22s,2H,5.97s,1H,3.27m,lH,1.77m,2H,1.54m,6H,1.06s,9H!C23H28N6O3Mff,436.51,LCMSEIme437M++H〇[1491]4-I-3-氨基-I-环戊基-3-氧丙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（11。在室温下，向配备有搅拌棒的25mL圆底烧瓶中装填⑵-4-ΙΟ-氨基-1-环戊基-3-氧丙-1-烯基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（l〇，1.15g，2.63mmo1、四氢呋喃（THF，20·OmL，246mmo1和10%碳载钯（50%湿，130mg。使所得反应混合物脱气三次，每次用氢气回填，然后在由氢气瓶释放的稳定氢气流下进行氢化反应。在17小时检查反应且发现反应结束。然后将反应混合物通过硅藻土床过滤以移除催化剂，并将硅藻土床用小体积的四氢呋喃THF冲洗。将合并的滤液在减压下浓缩，得到呈黄色至褐色油状物的粗4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（II，1.15g，理论上1.153g，99%收率），其在真空中于室温下静置时固化。经证实此粗产物（11足够纯（98%，通过HPLC分析），足以在不经进一步纯化的情况下进行后续步骤。对于Il=1HNMRDMS0-d6,300MHzSppm8.73s，lH，8.60s,lH,8.27s,lH,7.70d,1H,J=3.8Hz,7.32bs,lH,7.09d,1H,J=3.8Hz,6.75bs,lH,6.21s,2H,4.56td,1H,J=4.0,9.8Hz,2.86dd,IHJ=10.5,5.6Hz,2.63dd,IH,J=4.0,15.3Hz,2.32m,lH,1.77m,lH,1.56-1.19m,7H,1.06s,9H；LCMSEIme439M++H;C23H30N6O3MW，438·52，LCMSEIme439M++H〇[1492]⑻-4-I-3-氨基-I-环戊基-3-氧丙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-11和⑸-4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（S-11。[1493]不对称氢化的一般筛检程序，使用底物⑵-4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙-1-烯基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（10，得到光学富集产物4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙基]-IH-吡唑-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-11或⑸-11:在氮气下，向具有玻璃小瓶20mL的300mL体积高压釜中装填底物（10、催化剂金属、配体和催化剂前体和无氧溶剂4_6mL。向此高压釜中装填氢气以达到所需压力，并在室温下搅拌或用油浴加热。在释出氢气后，将反应混合物在减压下浓缩。使用乙酸乙酯与甲醇vv=9l的混合物，将残留物通过硅胶垫洗脱来纯化，得到产物4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙基]-IH-吡唑-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-11或⑸-11，供化学转化率HPLC和手性HPLC、LCMS和NMR光谱法和对映体过量ee，通过手性HPLC的测定。[1494]通过手性HPLC分析进行产物的对映体过量（％ee测定。使用Qliralpak®_IA柱。流动相为己烧与乙醇vv=9010的混合物。流速为lmLmin，并将UV检测波长设定为254nm。底物（10、非所需对映体（S-11，第1个峰和所需对映体（⑻-11，第2个峰分别在保留时间46分钟、36分钟和38分钟下得以充分拆分。[1495]对于⑻-11或⑸-11=1H匪RDMS0-d6,300MHzδρρπι8.73s，lH,8.60s，lH，8.27s,lH,7.70d,lH,J=3.8Hz,7.32bs,lH,7.09d,IH,J=3.8Hz,6.75bs,lH,6.21s,2H,4.56td,IH,J=4.0,9.8Hz,2.86dd,IHJ=10.5,5.6Hz,2.63dd,lHJ=4.0,15.3Hz,2.32m,lH,1.77m,lH,1.56-1.19m,7H,1.06s,9H；LCMSEIme439M++H;C23H30N6O3MW,438.52,LCMSEIme439M++H〇[1496]下表汇总了对此不对称氢化的分析和反应条件。[1499]此研究中所用的手性膦配体的结构在下面列出。I[1501]下面描述代表性制备型不对称氢化程序和通过结晶来提升产物手性纯度。[1502]⑸-4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（S-Il。在氮气下，将压力玻璃管中的4-{1-[IZ-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙-1-烯-1-基]-IH-吡唑-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯10，215mg于二氯甲烷CH2CI2，12.5mL与三氟乙醇CF3CH2OH，0.25mL的混合物中的溶液用催化剂RhCODSSRR-TangPhosBF48.8mg处理，然后将反应混合物用氢气加压至40巴压力。在此氢压力下，将反应混合物在50°C下搅拌20小时。当HPLC分析显示底物已完全消耗时，使反应混合物冷却至室温。通过手性HPLC分析测定，反应混合物的对映体过量为88%ee第一个峰94%，（S-11;第二个峰6%，⑻-11。将反应混合物通过薄硅胶垫过滤，并将该垫用二氯甲烷5mL洗涤。然后将滤液在减压下浓缩至干。向所得泡沫状固体（ISOmg中装填庚烷5mL与乙酸乙酯EtOAc，5mL的混合物。在20°C下搅拌时沉淀出白色固体。将浆料在20°C下搅拌16小时。通过过滤收集固体，并对所收集的固体52mg进行手性HPLC分析，显示的对映体过量为66.0%，偏向第一个峰第一个峰83.0%，（S-11;第二个峰17.0%⑻-11。然后将所得滤液蒸发至干。通过手性HPLC分析所得油状物（IOSmg，显示的对映体过量为99.6%，偏向第一个峰第一个峰99.83%，（S-11;第二个峰0.17%，⑻-11。此结果原则上表明，采用所述合适的溶剂体系（如乙酸乙酯庚烧），通过固体的沉淀选择性移除较少的对映体，由此可显著提高不对称氢化产物的光学纯度。[1503]⑻-4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-11。在氮气下，将压力玻璃管中的4-{1-[IZ-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙-1-烯-1-基]-IH-吡唑-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯10,500mg于甲醇Me0H，8.0mL中的溶液用催化剂RuCODSL-A153-1CF3CO226.6mg处理，然后将反应混合物用氢气加压至50巴压力。在此氢压力下，将反应混合物在30°C下搅拌21小时。当HPLC分析显示底物已完全消耗时，使反应混合物冷却至室温。通过手性HPLC分析测定，反应混合物的对映体过量为98%ee第二个峰99%，（R-11;第一个峰1%，（S-11。然后将反应混合物通过薄硅胶垫过滤，并将该垫用甲醇5mL洗涤。将滤液在减压下浓缩至干。通过手性HPLC分析对所得泡沫状固体470mg进行分析，结果显示对映体过量为98·0%，偏向第二个峰第二个峰99.0%，⑻-11;第一个峰1.0%，（S-Il。[[1505]⑻-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-12。方法A:在室温下，向配备有搅拌棒和氮气入口的50mL圆底烧瓶中装填R-4-1-3-氨基-1-环戊基-3-氧丙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（（R-ll，413mg，0.942mmol、N，N-二甲基甲酰胺（DMF，10mL，129mmol和三乙胺TEA，0.525mL，3.77mmol，4.0当量）。然后将所得混合物在冰浴中冷却至0-5°C，然后在室温下经由注射器滴加三氯乙酰氯0.315mL，2.82mmo1，3.0当量）。然后将所得反应混合物在0-5°C下搅拌90分钟。当TLC和HPLC显示确认反应完成时，将反应混合物用乙酸乙酯（EtOAc，25mL和20%盐水溶液（20mL处理。将两层分离，将水层用乙酸乙酯EtOAc，2X25mL萃取。将合并的有机萃取物用20%盐水溶液（35mL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留的褐色油状粗产物通过快速色谱法SiO2，0至50%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈淡色油状物的〇?-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-12，278mg，理论上396.lmg，70.2%收率），其在室温下于真空中静置时固化。对于R-12:非手性纯度99.1面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度99·6面积％，通过手性HPLC分析;99·2%ee;1HNMRDMS0-d6,400MHz5ppm8.84s,lH,8.78s,lH,8.39s,lH,7.74d,IH,J=3.7Hz,,7.11d，lH，J=3.8Hz,6.23s，2H,4.53ddd，lH，J=9.9,9.6，4·2Ηζ,3.26dd，lH，J=17.4,9.9Hz,3.19dd,lH,J=17.2,4.3Hz,2.41m,lH,1.87-1.13m,8H,1.07s,9H；C23H28N6O2MW,420·51，LCMSEIme421·4M++H。[1506]3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-丨-基]丙腈（⑻-13，游离碱）。方法A:在室温下，向配备有搅拌棒和氮气入口的25mL圆底烧瓶中装填R-4-ΙΟ-氰基-1-环戊基乙基）-IH-吡唑-4-基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯⑻-12，278mg，0·661_〇1和甲醇MeOH，2·50mL，37·Ommol。然后在室温下将所得均匀反应溶液用〇.IOM氢氧化钠水溶液NaOH，1.5mL，0.15mmol，2.3当量处理。将所得反应混合物在室温下搅拌22小时。当确认反应完成时，将反应混合物用20%盐水溶液（IOmL和乙酸乙酯EtOAc，25mL稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯EtOAc，25mL萃取。将合并的有机部分经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过快速色谱法（Si02,0至100%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈无色油状物的（3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-1]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈（1?-13，游离碱，18811^，理论上202.511^，92.8%收率），其在室温下于真空中静置时固化。对于⑻_13游离碱）=1HNMRDMS0-d6,400MHzSppm12.1bs,lH,8.80d,IHJ=O.42Hz,8.67s,lH,8.37s,lH,7.59dd,1H,J=2.34,3.51Hz,6.98dd,lH,J=1.40,3.44Hz,4.53td,IHJ=19.5,4.63Hz,3.26dd,lH,J=9.77,17.2Hz,3.18dd,IH,J=4.32,17.3Hz,2.40m,lH,1.79m,lH,1.65to1.13m,7H;CnHi8N6MW，306·37LCMSEIme307M++H。[1507]3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-I-基]丙腈磷酸盐（⑻-14,磷酸盐）。在60-65°C下，向（3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基吡唑-l-基]丙腈（⑻-13，游离碱，572g，1.87m0l于异丙醇（IPA，8L中的溶液里添加磷酸（186.2g，1.9mol，1.10当量于异丙醇（I.6L中的溶液。在添加磷酸溶液时未观察到放热，并且几乎立即形成沉淀。然后将所得混合物在76°C下加热1.5小时，然后逐渐冷却至环境温度，并在室温下搅拌过夜。将混合物过滤，并将固体用庚烷与异丙醇（11，vV，3L的混合物洗涤，然后转移回原烧瓶中，并在庚烷8L中搅拌一小时。通过过滤收集固体，用庚烷（IL洗涤，并在对流烘箱中于40°C和真空下干燥至恒重，得到呈白色至灰白色结晶固体的（3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈磷酸盐（⑻-14,磷酸盐，634.2g，理论上755g，84%收率）。对于R-14磷酸盐）：熔点197WC51HNMRDMS0-d6,500MHzδρρπι12.10s，lH,8.78s，lH,8.68s，lH,8.36s1Η,7.58dd,IHJ=1.9,3.5Hz,6.97d，lH,J=3.6Hz,4.52td,lH,J=3.9,9.7Hz,3.25dd,IH,J=9.8,17.2Hz,3.16dd,lH,J=4.0,17.0Hz,2.41,m,lH,1.79m,lH,1.59m,lH,1.51m,2H,1.42m,lH,1.29m,2H,1.18m，lH;13C匪RDMS0-d6，125MHzSppm152.1,150.8,149.8,139.2,131.0,126.8,120.4,118.1,112.8,99.8,62.5,44.3,29.1,29.0,24.9,24.3,22.5；Ci7Hi8N6Mff,306.37，游离碱1^1^伍111163071++!1，基峰），329.11++他）。[1509]4-1H-吡唑-4-基）-7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基）-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶17。在0-5°C冰浴）下，向氢化钠NaH，60重量％油分布，4.05g，101·3mmol，1·54当量于1，2_二甲氧基乙烷DME，20.OmL，192.4mmo1的悬浮液中缓慢添加1，2-二甲氧基乙烷DME，80.OmL，769.6mmol中的4-氯吡咯并[2，3-d]嘧啶（1，10.08g，65.6mmol，使得温度保持低于5°C_7°C至5°C。引入底物（1溶液后立即放出大量气体。将所得反应混合物在0-5°C下搅拌30分钟，然后缓慢添加三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯SEM-C1，12.56g，75.3mmol，1.15当量），同时使反应温度保持低于5°C。在添加后，将反应物在TC下搅拌1小时，然后升温至室温达23小时。当HPLC和TLC显示确认反应完成时，在室温下将反应混合物用水46mL淬灭，并将含有所需产物（15的淬灭反应混合物在不经进一步处理和纯化的情况下直接用于下一步Suzuki偶合反应。[1510]在室温下，向含有按上述得自先前反应的粗4-氯-7-[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（15，18.63g，65.64mmol的淬灭反应混合物中添加1，2-二甲氧基乙烷DME，38mL、碳酸钾粉末K2⑶3，23.56g，170.5mmol，2.6当量）、I-1-乙氧基乙基-4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑（3，18·60g，69·89mmol，1.06当量）。使所得混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后在室温下用四（三苯基膦钯0PdPPh34，244.2mg，0.2Immo1，0.003当量处理。使所得反应混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后升温至80°C达4-8小时。当TLC和HPLC显示确认反应完成时，将反应混合物逐渐冷却至室温，并通过娃藻土短床（IOg过滤。将娃藻土床用乙酸乙酯EtOAc，20mL洗涤。将两层滤液分离，并将水层用乙酸乙酯EtOAc，2X30mL萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液20mL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，并在减压下浓缩。然后将含有所需Suzuki偶合粗产物（16的残留物用THF22mL转移至500mL圆底烧瓶中，以在不经进一步纯化的情况下用于后续的脱保护反应。[1511]将Suzuki偶合粗产物（16于THF中的溶液（22mL用水（108mL和10%HC1水溶液通过将19.6mL浓HCl与64mLH2O混合制备来处理。将所得反应混合物在室温下搅拌4-6小时。当TLC和HPLC显示确认脱保护反应完成时，将30%氢氧化钠NaOH水溶液通过将10.4gNaOH溶解于21.OmLH2O中制备缓慢添加到反应混合物中，同时将温度保持低于25°C。在10分钟后，固体逐渐溶解并且再沉淀。将混合物在室温下搅拌1-2小时，然后通过过滤收集固体，并用H2O5OmL洗涤。将湿滤饼转移到25OmL三颈烧瓶中，并在室温下用乙腈（MeCN，112mL处理。将混合物加热回流2小时，然后逐渐冷却至室温，并在室温下搅拌1小时。通过过滤收集固体，用MeCN36mL洗涤，并在真空烘箱中于40-45°C下干燥，得到4-1H-吡唑-4-基）-7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基）-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（17,15.3g，理论上20.7g，73.9%收率，经三个步骤），为白色结晶固体99.4面积％，通过HPLC分析）。对于17:1HNMRDMSO-de,400MHz5ppm13.41bs,lH,8.74s,1H,8.67bs,lH,8.35bs,lH,7.72d,lH,J=3.7Hz,7.10d,IH,J=3.7Hz,5.61s,2H,3.51t,2H,J=8.2Hz,0.81t，2H，J=8.2Hz,0.13s，9H;Ci5H2iN5〇SiMff，315.45，LCMSEIme316M++H。[[1513]3-环戊基丙炔酸甲酯（18。在_78°C下，向环戊基乙炔7,17.49mL,150.0mmol于无水四氢呋喃（THF，20OmL，2466mmo1中的搅拌溶液里添加己烷中的2.5OM正丁基锂66.OmL，165mmol，1.1当量）。将所得乳状悬浮液在-78°C下搅拌30分钟。然后添加氯甲酸甲酯（17.6mL，225mmol，1.5当量）。反应混合物变为澄清溶液。然后移除冷却浴，并使反应混合物升温至室温，并在室温下搅拌1小时。反应混合物再次变为悬浮液。当TLC5%EtOAc己烷，KMn04染色）显示确认反应完成时，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液（150mL淬灭，并用二乙醚Et20,2X200mL萃取。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物在真空99-10ΐΓ16毫巴）下蒸馏，得到呈无色油状物的3-环戊基丙炔酸甲酯（18,21.8568，理论上22.838,96%收率）。对于18:1!1匪1?0：13，400ΜΗζδρρπι3.74s，3H,2.73m，lH,1.95m，2H,1.72m，4H,1.57m，2H。[1515]⑵-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-卜基丙烯腈（19。在室温下，向4-1H-吡唑-4-基-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（17，7·260g，23·Olmmol和3-环戊基丙-2-炔腈8，6·140g，34·52mmo1，1·5当量于N，N-二甲基甲酰胺DMF，40·OmL，516mmo1中的搅拌溶液里添加固体碳酸钾K2CO3，318mg，2.30mmo1，0.1当量）。将所得反应混合物在室温下搅拌30分钟。当LCMS显示确认反应完成时，将反应混合物用水80mL淬灭，用EtOAc2X150mL萃取。合并的有机层用水80mL和盐水50mL洗涤，经硫酸镁MgS〇4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过快速色谱法Si02,0-30%Et0Ac己烷梯度洗脱纯化，得到呈无色浆料的（Z-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙烯腈（19,8.256g，理论上10.Og，82.6%收率）。对于Ih1H匪RCDCl3,300MHzSppm9.15bs，lH，8.96s，lH，8.56s，lH，7.51d，lH，J=3.5Hz,6.93d,lH,J=3.5Hz,5.75s,2H,5.29s,lH,3.62m,lH,3.60t,2H,J=8.2Hz,2.16m,2H,1.81m,4H,1.59m,2H,0.98t,2H,J=8.2Hz,0.00s,9H；C23H30N6OSiMW,434.61，LCMSEIme435.2M++H。[1516]⑻-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙腈（⑻-20和⑸-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（S-20。[1517]不对称氢化的一般筛检程序，使用底物⑵-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙烯腈（19得到光学富集的产物3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（R-20或（S-20:在氮气下，向具有玻璃小瓶20mL的300mL体积高压爸中装填底物（19、催化剂金属、配体和催化剂前体和无氧溶剂4-6mL。向此高压釜中装填氢气以达到所需压力，并在室温下搅拌或用油浴加热。氢气释放后，将反应混合物在减压下浓缩。使用乙酸乙酯与甲醇vv=9l的混合物，通过硅胶垫洗脱来纯化残留物，得到产物3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙腈（R-20或⑸-20，供化学转化率HPLC和手性HPLC、LCMS和NMR光谱法和对映体过量（％ee，通过手性HPLC分析的测定。[1518]通过手性HPLC分析进行产物的对映体过量（％ee的测定。开发了一种手性HPLC方法，其使用Chiralce丨Chiralce丨㊣OD-H柱（4.6X250mm,5μπι，该柱购自ChiralTechnologies,Inc.，填充有涂以纤维素三氨基甲酸3,5-二甲基苯酯）的娃胶Ghiraleel®0D。通过在室温下使用由10%乙醇和90%己烷制成且流速为lmLmin的流动相以大于3.0的拆分度resolution来分离两种对映体⑻-20或⑸_20。群检测波长为220nm。（S-对映体（S-20和⑻-对映体（⑻-20的保留时间为分别为10.3分钟（第一个Λ#和13.1分钟第二个峰）。[1519]对于⑻-20或⑸-20:1H匪RDMS0-d6,400MHzδρρπι8.83s，lH,8.75s，lH，8.39s,lH,7.77d,lH,J=3.7Hz,7.09d,IH,J=3.7Hz,5.63s,2H,4.53td,IHJ=19.4,4.0Hz,3.51t,2H,J=8.1Hz,3.23dq,2H,J=9.3,4.3Hz,2.41m,lH,1.79m,1H,1.66-1.13m,7H,0.81t,2H,J=8.2Hz,0.124s,9H!C23H32N6OSiMff,436.63,LCMSEIme437M++H和459M++Na。[1520]下表汇总了对此不对称氢化的分析和反应条件。[1523]此研究中所用的手性膦配体的结构在下文列出。[1[1525]下面描述代表性制备型不对称氢化程序。[1526]⑸-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H_吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（S-20。在氮气下，将压力玻璃管中的⑵-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙烯腈（19,116mg于二氯甲烷CH2Cl2,4.OmL中的溶液用催化剂[Ru对甲基异丙基苯）（S-C3-TunePhosCl]Cl8.5mg处理，然后将反应混合物用氢气加压至60巴压力。在此氢压力下，将反应混合物在75°C下搅拌19小时。当HPLC分析显示底物已完全消耗时，使反应混合物冷却至室温。通过手性HPLC分析测定，反应混合物的对映体过量为34.1%ee第一个峰67.05%，（S-20;第二个峰32.95%，（R-20。然后将反应混合物通过薄硅胶垫过滤，并将该垫用二氯甲烷CH2Cl2,5mL洗涤。将滤液在减压下浓缩至干。通过手性HPLC分析对所得泡沫状固体（l〇7mg进行分析，结果显示对映体过量为34.1%，偏向第一个峰（第一个峰67·05%，（S-20;第二个峰32·95%，⑻-20。[[1528]⑻-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H_吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙烯酸甲酯（21。在室温下，向4-1H-吡唑-4-基-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（17，12.08g，38.31mmol和3-环戊基丙-2-炔酸甲酯（18，8.970g，45.97mmol，1.2当量于乙腈76mL，HOOmmol中的搅拌悬浮液里添加1，8-二氮杂双环[5·4·0]i^一-7-烯DBU，2·92mL，19·2mmo1，0·5当量）。将所得反应混合物在室温下搅拌2小时。当LCMS显示确认反应完成时，将反应混合物用水50mL和INHCl水溶液20mL萃取。在用INHCl水溶液处理后，将淬灭反应混合物调节至pH4。然后将混合物用EtOAc2XIOOmL萃取，并将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过CombiflashSiO2，0-50%EtOAc己烷梯度洗脱）纯化，得到呈无色极粘性油状物的⑹-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）-IH-吡唑-1-基）丙烯酸甲酯（21，6.838g，理论上17.92g，收率38%。对于19:¾NMRCDCl3,400MHzδρρπι8.93s，lH,8.55bs，lH,8.44s,lH,7.49d,lH,J=3.5Hz,6.86d,IH,J=3.5Hz,6.34s,lH,5.74s,2H,4.56m,1H,3.84s,3H,3.60t,2H,J=8.2Hz,2.01m,2H,1.96m,4H,1.77m,2H,0.98t,2H，J=8.2Hz，0·00s，9H!C24H33N5O3SiMW,467.64，LCMSEIme468.2M++H。[1529]⑻-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙酸甲酯（⑻-22和⑸-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙酸甲酯（S-22〇[1530]不对称氢化的一般筛检程序，使用底物⑹-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙烯酸甲酯（21得到光学富集的产物3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸甲酯（⑻-22或⑸-22:在氮气下，向具有玻璃小瓶20mL的300mL体积高压釜中装填底物21、催化剂金属、配体和催化剂前体和无氧溶剂4-6mL。向此高压釜中装填氢气以达到所需压力，并在室温下搅拌或用油浴加热。氢气释放后，将反应混合物在减压下浓缩。使用乙酸乙酯与甲醇vv=9l的混合物，通过硅胶垫洗脱来纯化残留物，得到产物3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸甲酯（⑻-22或⑸-22，供化学转化率HPLC和手性HPLC、LCMS和NMR光谱法和对映体过量（％ee，通过手性HPLC的测定。[1531]通过手性HPLC分析进行产物的对映体过量（％ee的测定。开发了一种手性HPLC方法，其使用Chimlcel®©D_H柱（4.6X250mm，5ym，该柱购自ChiralTechnologies，Inc·，填充涂以纤维素三氨基甲酸3,5-二甲基苯酯）的硅胶aiiralcel®〇D。通过在室温下使用由15%乙醇和85%己烷制成且流速为lmLmin的流动相以大于3.0的拆分度来分离两种对映体⑻-22或⑸-22。群检测波长为254nm。⑸-对映体（S-22和⑻-对映体（⑻-22的保留时间为分别为5.3分钟第一个峰和8.2分钟第二个峰）。[1532]对于⑻-22或⑸-22:C24H35N5O3SiMff,469.65，LCMSEIme470M++H和492M++Na〇[1533]下表汇总了对此不对称氢化的分析和反应条件。[1536]此研究中所用的手性膦配体的结构在下文列出。[1538]下面描述代表性制备型不对称氢化程序。[1539]⑸-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H_吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸甲酯（S-22。在氮气下，将压力玻璃管中⑻-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙烯酸甲酯（21，109mg于乙酸乙酯EtOAc，5.OmL中的溶液用催化剂[RhCOD+-DuanPhos]BF45.5mg处理，然后将反应混合物用氢气加压至20巴压力。在此氢压力下，将反应混合物在在室温下搅拌19小时。当HPLC分析显示底物已完全消耗时，使反应混合物冷却至室温。通过手性HPLC分析测定，反应混合物的对映体过量为97.9%ee第一个峰98.95%，（S-22;第二个峰1.05%，⑻-22。然后将反应混合物通过薄硅胶垫过滤，并将该垫用乙酸乙酯EtOAc，5mL洗涤。将滤液在减压下浓缩至干。通过手性HPLC分析对所得泡沫状固体（98mg进行分析，结果显示的对映体过量为97.9%，偏向第一个峰（第一个峰98.95%，（S-22;第二个峰1.05%，⑻-22。[1540]⑻-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸甲酯（⑻-22。在氮气下，将压力玻璃管中的E-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙烯酸甲酯（21，815mg于四氢呋喃（THF，8.0mL中的溶液用催化剂[Rh⑶D㈠-DuanPhos]BF44.6mg处理，然后将反应混合物用氢气加压至50巴压力。在此氢压力下，将反应混合物在35°C下搅拌22小时。当HPLC分析显示底物几乎完全消耗时，使反应混合物冷却至室温。通过手性HPLC分析测定，反应混合物的对映体过量为94.7%ee第二个峰97.35%，⑻-22;第一个峰2.65%，（S-22。然后将反应混合物通过薄硅胶垫过滤，并将该垫用四氢呋喃THF，5mL洗涤。将滤液在减压下浓缩至干。通过手性HPLC分析对所得泡沫状固体（778mg进行分析，结果显示的对映体过量为94.7%，偏向第二个峰（第二个峰97·35%，⑻-22;第一个峰2·65%，（S-22。[1542]3R-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H_吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸（⑻-23。在室温下，向（3R-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸甲酯R-22，2.47g，5.26mmol于THF30mL中的搅拌溶液里添加氢氧化锂一水合物〇^0!1-H2O，265mg，6.31mmol，1.2当量于水（15mL中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌3小时。当LCMS显示反应完成时，然后用INHCl水溶液将反应混合物酸化至pH5,然后将其用EtOAc2X25mL萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩，得到呈无色油状物的（3R-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸（R-23，2.40g，理论上2.40g，100%收率），其在室温下于真空中静置时固化。对于⑻-23:¾匪RCDCl3,300MHzδρρπι8.95s，1Η,8.95bs,lH,8.36s,lH,7.57d,1H,J=3.7Hz,6.99d,1H,J=3.7Hz,5.74s,2H,4.65dt,lH,J=3.1,10.3Hz,3.58t,2H,J=8.2Hz,3.24dd,IHJ=16.5,10.3Hz,3.04dd,lH,J=16.2,3.1Hz,2.59m,lH,2.00m,lH,1.77-1.24m,7H,0.97t,2H,J=8·2Hz，0·00s，9H;C23H33N5O3SiMW，455·63，LCMSEIme456·IM++H。[1543]3R-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基）-IH-吡唑-1-基）丙酰胺（R-24。在室温下，向（3R-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酸R-23，20mg，0.044mmol于DMFImL中的搅拌溶液里添加N，N-羰基二咪唑（CDI，21mg，0.13mmol，3.0当量）。然后将反应混合物在室温下搅拌，并用TLC追踪形成酰基咪唑的反应用30%Et0Ac己烷消耗酸至较高的Rf斑点）。当TLC显示酰基咪唑转化完成时，然后将氨气经30分钟鼓泡通过搅拌溶液，从而得到酰胺然后进行LCMS。通过使氮气剧烈鼓泡通过溶液来蒸发过量的氨气。将DMF中的粗产物（3R-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酰胺（⑻-24直接用于下述反应，以将酰胺（⑻-24转化成相应的腈（⑻-20。[1544]3R-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（R-20。方法A:在TC下，向（3R-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙酰胺（〇?_24，20mg，0.044mmol于DMFImL中的搅拌溶液里添加二氯甲烷（ImL和三乙胺（0.12mL，0.88mmo1，20.0当量），然后添加三氯乙酰氯0.052mL，0.462mmoI，10.5当量）。将所得反应混合物在〇°C下搅拌1小时。当LCMS显示反应完成时，将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液NaH⑶3,5mL淬灭，然后用EtOAc2XIOmL萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过硅胶色谱法0-75%EtOAc己烷梯度洗脱纯化，得到（3R-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（R-20,IOmg，理论上19mg，53%收率）。对于（R-20:1HNMRDMS0-d6,400MHz5ppm8.83s,lH,8.75s,lH,8.39s,lH,7.77d,1H,J=3.7Hz,7.09d,lH,J=3.7Hz,5.63s,2H,4.53td,IH,J=19.4,4.0Hz,3.51t,2H,J=8.1Hz,3.23dq,2H,J=9.3,4.3Hz,2.41m,lH,1.79m,lH,1.66-1.13m,7H,0.81t,2H,J=8·2Ηζ,0.124s,9H!C23H32N6OSiMW,436.63,LCMSEIme437M++H和459M++Na。[1545]3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-I-基]丙腈（⑻-13，游离碱）。方法B:在室温下，向（3R-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（⑻-20，463g，1·06mol，98·6%ee于乙腈4·5L中的溶液里添加水（400mL，接着立即添加四氟硼酸锂LiBF4,987.9g，10.5mol，10.0当量）。观察到在添加水时反应温度从环境温度降至12°C，然后在添加四氟硼酸锂LiBF4期间升至33°C。将所得反应混合物加热回流约80°C过夜。将液份淬灭到乙酸乙酯水中，并通过LCMS和TLC95:5乙酸乙酯甲醇，vv检验。当LCMS和TLC分析显示羟甲基中间体（⑻-25和所产生的完全脱保护物质（R-13，游离碱两者，但无起始物质（R-20留下时，将反应混合物逐渐冷却至〈2〈2〈2改变成〈2〈2〈3〈1，以提高萃取残液的纯度，并通过增加SMB区域III的长度来提高通过量。[1590]实例l:50g规模[1591]柱:ChiralceKDOD[1592]流动相异丙醇和正庚烷2080vv[1593]柱长度IOcm[1594]柱内径IOmm[1595]柱个数8[1596]进料浓度80gl[1597]温度:25°C。[1600]实例2:25kg规模[1601]柱:ChiralcelROD[1602]流动相异丙醇和正庚烷2080vv[1603]柱长度9.5cm[1604]柱内径49mm[[[1605]柱个数8[1606]进料浓度80gl[1607]温度：25Γ。[.[.[1610]实例3:100kg规模[1611]柱：Chiralcel®D[1612]流动相异丙醇和正庚烷2080vv[1613]柱长度9.Ocm[1614]柱内径200mm[1615]柱个数8[1616]进料浓度53.7gl[1617]温度:25°C。[[[1620]实例4:1OOg规模[1621]柱：（s，sWheIk-CTI[1622]流动相甲基-叔丁基醚[1623]柱长度10.Ocm[1624]柱内径IOmm[1625]柱个数8[1626]进料浓度90gl[1629]3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基吡唑[1630]-1-基]丙腈（R-12，游离碱）。方法A:在室温下，向（3R-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（⑻-10,463g，1.06mol，98.6%ee于乙腈4.5L中的溶液里添加水400mL，接着立即添加四氟硼酸锂1^8?4,987.98，10.5111〇1，10.0当量）。观察到在添加水时反应温度从环境温度降至12°：，然后在添加四氟硼酸锂LiBF4期间升至33°C。将所得反应混合物加热回流约80°C过夜。将液份淬灭到乙酸乙酯水中，并通过LCMS和TLC95:5乙酸乙酯甲醇，vv检验。当LCMS和TLC分析显示羟甲基中间体（⑻-11和所产生的完全脱保护物质（⑻-12,游离碱），但无起始物质（R-10留下时，将反应混合物逐渐冷却至〈5°C，然后逐渐添加20%的氢氧化铵NH4〇H，450mL水溶液，以将反应混合物的pH调节至9用pH条检验）。移除冷浴，并使反应混合物逐渐升温至室温，并在室温下搅拌过夜。将液份淬灭到乙酸乙酯水中，并通过LCMS和TLC95:5乙酸乙酯甲醇，vv检验，以确认完全脱保护。当LCMS和TLC显示确认反应完成时，将反应混合物过滤，并将固体用乙腈（IL洗涤。然后将合并的滤液在减压下浓缩，并将残留物在乙酸乙酯（6L与半饱和盐水（3L之间分配。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯2L萃取。将合并的有机层用半饱和碳酸氢钠（NaHC03,3L和盐水（3L洗涤，经硫酸钠Na2SO4干燥，并在减压下浓缩，得到呈橙色油状物的粗产物。然后将粗物质通过快速柱色谱法（Si02,40至100%乙酸乙酯庚烷梯度洗脱纯化，得到呈白色泡沫物的（3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈（R-12,游离碱，273g，理论上324.9g，84%收率）。将此物质通过19FNMR检验以确保无四氟硼酸锂LiBF4残留，并通过手性HPLCChimlcelKD，90:10己烷乙醇）确认对映体纯度98.7%ee，其不经进一步纯化便用于制备相应的磷酸盐。对于⑻-12游离碱）=1HNMRDMS0-d6,400MHzδρρπι12.1bs，1H,8.80d，lH，J=O·42Ηζ,8.67s，lH,8.37s，lH,7.59dd，lH，J=2.34,3.51Hz，6.98dd，lH，J=1.40,3·44Ηζ,4.53td，lH，J=19.5，4.63Hz,3.26dd，lH，J=9.77，17.2Hz,3.18dd，lH，J=4.32,17.3Hz,2.40m，lH,1.79m，lH，1.65to1.13m，7H;CnHi8N6MW，306·37LCMSEIme307M++H。[1632]R-3-4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-I-基）-3-环戊基丙腈⑻-10。将⑻-3-环戊基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（R-10，75·Og，0·172mol，98·8%ee于乙腈600mL中的溶液冷却至0-5°C。经10分钟向冷却溶液中添加三氟化硼乙醚化物54.4mL，0.429mol，同时使内部反应温度保持低于5°C。添加后，移除冷浴，并使反应混合物升温至室温。当HPLC分析显示⑻-10的含量低于1%时，脱保护反应的初始阶段视为完成。然后将反应冷却至〇_5°C，随后缓慢添加水（155mL。添加水后，移除冷浴，使所得反应混合物升温至13-17Γ，并再搅拌2-3小时。将所得反应混合物再次冷却至0-5°C。向冷却的反应混合物中缓慢添加氨于水中的溶液[通过将28%氨水溶液（104.5mL与水210.5mL混合制成]，同时使内部反应温度保持低于5°C。添加氨水溶液后，移除冷浴，并使反应升温至室温。当通过HPLC分析羟甲基中间体的含量低于1%时，确认水解完成。[1633]将所得反应混合物用乙酸乙酯（315mL稀释，并用20%盐水315mL洗涤。将含水级份用乙酸乙酯315mL反萃取。将有机级份合并，并在真空下以40°C的浴温浓缩至体积为38011^。将浓缩的残留物用乙酸乙酯（6001^稀释，并用11他!1〇323451^和20%盐水345mL洗涤。将含水洗液合并，并用乙酸乙酯（345mL反萃取。将有机级份合并，并精密过滤到洁净的2L圆底烧瓶中。将有机级份用温水50°C，2X450mL洗涤，然后用活性炭在65°C下搅拌处理1.5小时。将浆料通过硅藻土床过滤。将滤液在真空下浓缩，其中浴温为40°C。将所得浆液置于高真空下，以提供呈淡黄色泡沫物的（R-3-4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基-3-环戊基丙腈[⑻-12，54.2g，103%收率]。将此物质通过19FNMR来检验，以确保产物未被任何氟化杂质所污染。分离的游离碱的化学纯度为96.3%。通过手性HPLCchiralcel㈤，90:10己烧乙醇测定，游离碱的手性纯度为98.8%。游离碱不经进一步纯化便用于制备磷酸盐。1HNMRDMS0-d6,400MHz12.11bs，lH,8.79d，lH，J=0.43Hz,8.67s,lH,8.37s,lH,7.59q,IH,J=2.3Hz,6.98q,1H,J=1.6Hz,4.53td,lH,J=19.2,4.1Hz,3.22dq,2H,J=9.8,4.3Hz,2.40m,lH,1.79m,lH,1.65-1·13m，7H。CnHi6N6MW，306·37，LCMSEIme307M++H。[1635]3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-I-基]丙腈磷酸盐（⑻-13，磷酸盐）。方法A:在60-65°C下，向（3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈（R-12,游离碱，572g，1.87mol于异丙醇（IPA，8L中的溶液里添加磷酸186.2g，1.9mol，1.10当量于异丙醇（I.6L中的溶液。在添加磷酸溶液时未观察到放热，并且几乎立即形成沉淀。然后将所得混合物在76°C下加热1.5小时，然后逐渐冷却至环境温度，并在室温下搅拌过夜。将混合物过滤，并将固体用庚烷与异丙醇（11，vv，3L的混合物洗涤，然后转移回原烧瓶中，并在庚烷8L中搅拌一小时。通过过滤收集固体，用庚烷（IL洗涤，并在对流烘箱中于40°C和真空下干燥至恒重，得到呈白色至灰白色结晶固体的（3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈磷酸盐（R-13，磷酸盐，634.2g，理论上755g，84%收率）。对于⑻-13,磷酸盐：熔点：197.61:;¾匪RDMS〇-d6，500MHz5ppm12.10s,lH,8.78s,lH,8.68s,lH,8.36s1H,7.58dd,IHJ=1.9,3.5Hz,6.97d,1H,J=3.6Hz,4.52td,IH,J=3.9,9.7Hz,3.25dd,IH,J=9.8,17.2Hz,3.16dd，lH，J=4·0,17.0Hz,2.41，（m，lH,1.79m，lH,1.59m，lH,1.51m,2H,1.42m，lH,1.29m，2H,1.18m，lH;13C匪RDMS0-d6，125MHzSppm152.1,150.8,149.8,139.2,131.0,126.8,120.4,118.I,112.8,99.8,62.5,44.3,29.1,29.0,24.9,24.3，22.5;71118他丽，306.37，游离碱1^1^伍111163071++!1，基峰），329.11++似）。[1636]方法B:在回流下，经47分钟时间向⑻-3-4-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基-3-环戊基丙腈（⑻-12，54.2g，177mol于二氯甲烷782mL和2-丙醇（HMmL中的溶液里添加磷酸（19.9g，0.173mol，1.15当量于2-丙醇34.OmL中的溶液。添加酸后，将所得混合物另加热回流1小时。将混合物逐渐冷却至环境温度并搅拌3小时。通过过滤收集固体，并用二氯甲烷390mL洗涤，然后用正庚烷390mL洗涤。将固体在真空和室温下，然后在真空和62°C下部分干燥，得到呈白色至灰白色结晶固体的⑻-3-4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基-3-环戊基丙腈磷酸盐60.lg，84%收率）。通过手性HPLCchiralcel0D，90:10己烷乙醇）分析，得到对映纯度为NMRDMS〇-d6，400MHz12.11bs,lH,8.79d,IHJ=O.59Hz,8.67s,lH,8.36s,lH,7.59q,lH,J=2.3Hz,6.98q,1H,J=I,6Hz,4.53td,IH,J=19.6,4.4Hz,3.22dq,2H,J=9.6,4.3Hz,2.40m,lH,1.79m,lH,1.65-1.13m,7H〇Ci7H2IN6O4PMff,404.36,LCMSEIme307M++H和me329M++Na。[1638]R-3-4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）-IH-吡唑-I-基）-3-环戊基丙腈磷酸盐。向配备有搅拌棒、蒸馏头、加料漏斗和加热罩的IL圆底烧瓶中装填甲醇520mL和〇?-3-4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基-3-环戊基丙腈磷酸盐（⑻-13，磷酸盐，40.0克，98.92mmol。将浆料加热至55°C，以产生微粉红色溶液。将溶液冷却至50°C，并过滤至配备有顶置式搅拌器、蒸馏头、加料漏斗和加热罩的2L烧瓶中。将IL圆底烧瓶和过滤漏斗用另外的甲醇（104.OmL冲洗。在大气压力下，将滤液溶液加热回流1小时以蒸馏甲醇281mL。经由加料漏斗经80分钟缓慢装填异丙醇（IPA320mL，同时使内部温度保持在大约65°C。在IPA添加过程中，观察磷酸盐的沉淀。当IPA添加完成后，在相同的温度下缓慢添加正庚烷（175mL。在大气压下继续蒸馏。以大约等于蒸馏速率的速率添加另外的正庚烷825mL，同时使内部温度保持在大约65°C。当馏出物的体积达到742mL不包括得自先前蒸馏的281mL甲醇的体积时，蒸馏完成。蒸馏花费大约1小时。蒸馏期间的蒸汽温度在54-64Γ的范围内，并且蒸馏完成时的内部温度为67°C。将混合物缓慢冷却至室温，并再搅拌3小时。通过过滤收集固体。将湿滤饼用正庚烷384.OmL中16.7%vv的异丙醇洗涤，然后用正庚烷280.OmL洗涤，并在55°C下真空干燥，以提供呈白色固体的36.1克所需产物，收率为90%。通过HPLC分析的化学纯度为99.79%。通过手性HPLC分析的手性纯度为99.8%。1H匪R499.7MHz，DMS0-d6δppm:12.21s，lH,10.71s，3H，8·80s，lH，8·72s，lH，8.40s,lH,7.60d,J=3.5Hz,1H,7.00d,J=3.5Hz,1H,4.51td,J=9.75,4.0Hz,1H,3.25dd,J=17.3,9.75Hz,lH,3.14dd,J=17.0,4.OHz,1H,2.43-2.35m,lH,1.79-1.73m,lH,1.58-1.42m,3H,1.41-1.33m,1H,1.30-1.23m,2H,1.19-1.12m,1H；13CNMR125.7MHz，DMS0-d6δppm:152.8,151.2,150.3,140.0,131.8,127.7,120.8,118.8，113·5，100·7，63·3，45·0，29·8，25·6，25·0，23·2;LCMSmz:Ci7Hi8N6M+H+的计算值：307·2。（M+H+实测值:307·0。[1640]4-1H-吡唑-4-基）-7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基）-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶5。方法B:在室温下，向配备有顶置式搅拌器、冷凝器、温度计套管和氮气入口的反应器中装填4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基）-IH-吡唑（4，600g，3.09mol、甲苯4.21^和乙基乙烯基醚（334.58,4.64111〇1，0.4礼，1.50当量），然后滴加21!1：1于二乙醚3911^，0.078111〇1，0.025当量）中的溶液。将所得反应混合物加热至35-40°：达4-8小时。当HPLC分析显示确认反应完成时，将反应混合物冷却至15-25°C，然后用NaHCO3水溶液处理至pH8。将两层分离，并将有机层在减压下浓缩，得到粗1-1-乙氧基乙基-4-4,4,5,5_四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基）-IH-吡唑（14，其不经进一步纯化便直接用于随后的Suzuki偶合反应。[1641]在室温下，向配备有顶置式搅拌器、冷凝器、温度计套管和氮气入口的反应器中装填水H2O，1.5L、碳酸钾K2CO3，1047g，7.58mo1，2.45当量）、4-氯-7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7!1-吡咯并[2,3-1]嘧啶（3，7558,2.66111〇1、按上述制备的粗1-1-乙氧基乙基-4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑（14，822g按100%转化率计），3.09!11〇1，1.16当量和1-丙醇6〇。使所得混合物脱气三次，每次用氮气回填，然后在室温下用四（三苯基膦钯⑼（9.2g，0.008mol，0.0026当量处理。将所得反应混合物加热至缓缓回流约90°C1-4小时。当通过HPLC确认反应完成时，将反应混合物在减压下浓缩以移除溶剂。然后将残留物冷却至室温，用乙酸乙酯（9L和水4L稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯2X2.5L萃取。将合并的有机层用水2X2L洗涤，并在减压下浓缩，得到粗4-I-1-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（15，其不经进一步纯化便直接用于后续酸促进的脱保护反应。[1642]在室温下，向配备有顶置式搅拌器、冷凝器、温度计套管和氮气入口的反应器中装填粗4-I-1-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（15，1030·9g按100%转化率计），2·66mol、四氢呋喃THF，0·9L、水H2O，4.4L和10%HC1水溶液2.7L、10.64mol、3.44当量）。将所得反应混合物在室温下搅拌2-5小时。当通过HPLC分析确认反应完成时，将反应混合物在室温下用30%氢氧化钠NaOH水溶液940mL，11.70mol，3.78当量处理。将所得反应混合物在室温下搅拌1-2小时。通过过滤收集固体，用水2X0.75L洗涤，并在真空烘箱中于45-55°C下干燥至恒重，得到粗4-1H-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（5，826.8g，理论上839.1g，98.5%收率），为灰白色固体94.2面积％的纯度，通过HPLC分析）。随后将此粗物质在乙腈中再结晶，得到纯化合物5738.4g，理论上839.Ig，88%收率），为白色晶体99.5面积％，通过HPLC分析），经证实其在每一可比较的方面均与方法A所制备的物质相同。[1644]4-1H-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶5。方法C:在室温下，向配备有顶置式搅拌器、冷凝器、温度计套管和氮气入口的反应器中装填水OfeO，9·OL、碳酸钾K2CO3，446Ig，32·28mol，2·42当量）、4-氯-7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（3a，3597g，12·67mol、I-1-乙氧基乙基）-4-4，4,5,5-四甲基-1，3,2-二氧杂戊硼烷-2-基）-1!1-吡唑（14,3550，13.34111〇1丄05当量）和卜丁醇27L。使所得混合物脱气三次，每次用氮气回填，然后在室温下用四（三苯基膦钯046g，0.040mol，0.003当量处理。将所得反应混合物加热至缓缓回流约90°C1-4小时。当通过HPLC确认反应完成时，将反应混合物冷却至室温，然后通过娃藻土床过滤。将娃藻土床用乙酸乙酯（2X2L洗涤，然后合并滤液和洗涤溶液。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯12L萃取。将合并的有机层在减压下浓缩以移除溶剂，将粗4-I-1-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（15和四氢呋喃THF，4.2L—起直接装回反应器中，以在不经进一步纯化的情况下用于后续酸促进的脱保护反应。[1645]在室温下，向反应器中的按上述制备的粗4-α-α-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基）-7Η-吡咯并[2,3-d]嘧啶（15于四氢呋喃（THF，4.2L中的悬浮液里装填水H2O，20.8L和10%HC1水溶液（16.2，45.89mol，3.44当量）。将所得反应混合在16-30°C下搅拌2-5小时。当通过HPLC分析确认反应完成时，将反应混合物在室温下用30%氢氧化钠NaOH水溶液4L，50.42mol，3.78当量处理。将所得反应混合物在室温下搅拌1-2小时。通过过滤收集固体，并用水2X5L洗涤。将湿滤饼与乙腈21.6L一起装回至反应器中，并将所得悬浮液加热至缓缓回流1-2小时。然后将澄清溶液逐渐冷却至室温并搅拌，固体随冷却而从溶液中沉淀出来。将反应混合物在室温下再搅拌1-2小时。通过过滤收集固体，用乙腈2X3.5L洗涤，并在烘箱中于减压和45-55Γ下干燥至恒重，得到4-1H-吡唑-4-基）-7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基）-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（5，3281.7g，理论上3996.8g，82.1%收率），为白色结晶固体99.5面积％，通过HPLC分析），经证实其在每一可比较的方面均与方法A和B所制备的物质相同。[[1647]4-1H-吡唑-4-基）-7_2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基）-7H_吡咯并[2,3-d]嘧啶5。方法D:在0-5°C冰浴）下，向氢化钠NaH，60重量％油分布，4·05g，101·3mmo1，1·54当量于1，2-二甲氧基乙烷DME，20.OmL,192.4mmol中的悬浮液里缓慢添加1，2-二甲氧基乙烷DME，80·OmL，769·6_〇1中的4-氯吡咯并[2，3-d]嘧啶（1，10·08g，65·6_〇1，使得温度低于5°C_7°C至5°C。立即放出大量气体。将所得反应混合物在0-5°C下搅拌30分钟，然后缓慢添加三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯2，12.56g，75.3mmol，1.15当量），同时使反应温度保持〈5°C。在添加后，将反应物在0°C下搅拌1小时，然后升温至室温达23小时。当HPLC和TLC显示确认反应完成时，在室温下将反应混合物用水46mL淬灭，并将含有所需产物3a的淬灭反应混合物在不经进一步处理和纯化的情况下直接用于下一步Suzuki偶合反应。[1648]在室温下，向含有按上述得自先前反应的粗4-氯-7-[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶3a，18.63g，65.64mmol的淬灭反应混合物中添加1，2-二甲氧基乙烷DME，38mL、碳酸钾粉末K2⑶3，23.56g，170.5mmol，2.6当量）、I-1-乙氧基乙基-4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑（14，18·60g，69·89mmol，1.06当量）。使所得混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后在室温下用四（三苯基膦钯0244.2mg，0.21mmol，0.003当量处理。使所得反应混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后升温至80°C达4-8小时。当TLC和HPLC显示确认反应完成时，将反应混合物逐渐冷却至室温，并通过娃藻土短床（IOg过滤。将娃藻土床用乙酸乙酯®t0Ac，20mL洗涤。将两层滤液分离，并将水层用乙酸乙酯2X30mL萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液20mL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，并在减压下浓缩。然后用THF22mL将含有所需Suzuki偶合粗产物（15的残留物转移至500mL圆底烧瓶中，以在不经进一步纯化的情况下用于后续的脱保护反应。[1649]将Suzuki偶合粗产物（15于THF中的溶液（22mL用水（108mL和10%HC1水溶液通过将19.6mL浓HCl与64mLH2O混合制备来处理。将所得反应混合物在室温下搅拌4-6小时。当TLC和HPLC显示确认脱保护反应完成时，将30%氢氧化钠NaOH水溶液通过将10.4gNaOH溶解于21.OmLH2O中制备缓慢添加到反应混合物中，同时将温度保持低于25°C。在10分钟后，固体逐渐溶解并且再沉淀。将混合物在室温下搅拌1-2小时，然后通过过滤收集固体，并用H205OmL洗涤。将湿滤饼转移到25OmL三颈烧瓶中，并在室温下用乙腈（MeCN，112mL处理。将混合物加热回流2小时，然后逐渐冷却至室温，并在室温下搅拌1小时。通过过滤收集固体，用MeCN36mL洗涤，并在烘箱中于40-45°C下干燥，得到4-1H-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基）-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（5,15.3g，理论上20.7g，73.9%收率），为白色结晶固体99.4面积％，通过HPLC分析），经证实其在每一可比较的方面均与方法A、B和C所制备的物质相同。I[1651]外消旋3-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈9，外消旋SEM-保护的化合物）。方法B:在室温下，向配备有搅拌棒、热电偶、冷凝器和氮气入口的250mL四颈圆底烧瓶中装填3S-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基）-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（S-10，13.9g，31.5mmol、乙腈（84mL和3-环戊基丙稀腈（8E和Z异构体的混合物，3.82g，31.5mmol，1.0当量）。然后将所得混合物用碳酸铯Cs2CO3，2.57g，7.88mmol，0.25当量在室温下处理。使反应混合物升温至65°C，并在12小时后通过手性HPLC检验，以确定化合物⑻-10与化合物S-10的对映体比。当化合物⑻-10与化合物⑸-10的比例达到1比1时，则使反应混合物逐渐冷却至室温，然后在室温下搅拌24至48小时。反应混合物通过HPLC监测，以测定4-1H-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶5的含量。当通过HPLC面积％证实化合物5的含量96面积％，通过HPLC分析），并在不经进一步纯化的情况下直接用于后续的手性分离。[1652]4-1H-吡唑-4-基）-7_2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基）-7H_吡咯并[2,3-d]嘧啶5。方法E:在室温下，向配备有顶置式搅拌器、热电偶、2L加料漏斗和氮气入口的22L四颈烧瓶中装填3S-3-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（S-10,491g，I.llmol和乙腈4.5L。将混合物冷却至0-10°C，然后经由加料漏斗经1.5小时以叔丁醇钾于THF中的IM溶液KOtBu，2.OL，2.Omo1，1.8当量逐滴处理。添加碱后，使反应混合物回到室温，并在室温下搅拌12-24小时。当LCMS显示确认反应完成时，将反应混合物用乙酸乙酯EtOAc，6L和50%ww氯化铵水溶液NH4Cl，4L稀释。将两层分离，并将含水级份用乙酸乙酯2L反萃取。将合并的有机级份用水2L和盐水（3L洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，并在减压下浓缩，得到呈琥珀色油状物的粗4-1H-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶5，354g，理论上350.lg，101.1%收率），其在室温下于真空中静置时固化。随后将此粗物质在乙腈中再结晶，得到纯化合物5308g，理论上350.Ig，88%收率），为白色晶体99.5面积％，通过HPLC分析），经证实其在每一可比较的方面均与方法A、B、C和D所制备的物质相同。[1654]2S，3S-2，3-双苯甲酰氧基）琥珀酸-3R-环戊基-3-[4-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丙腈（I:I;17。在室温下，向配备有搅拌棒和氮气入口的250mL圆底烧瓶中装填外消旋3-环戊基-3-[4-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丙腈9，6·92g，O·0158mol、乙腈（89·OmL,1·70mol、四氢呋喃（15mL,O·185mol和丙酮（15·OmL,0.204mol。使所得溶液升温至50°C，然后以一份+-2，3-二苯甲酰-D-酒石酸（16，8.52g，0.0238mol，1.5当量处理。然后将所得均匀溶液在50°C下搅拌10分钟，然后逐渐冷却至室温，并在室温下搅拌21小时。然后通过过滤收集固体，用小体积的己烷冲洗，并在减压下干燥，得到呈白色晶体的（2S，3S-2，3-双苯甲酰氧基琥珀酸-3R-环戊基-3-[4-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丙腈（1:1;17，6.85g，理论上12.6g，54%收率）。通过手性HPLC分析分离盐的对映体纯度，发现为74:26,偏向所需的R-对映体。对于17:¾NMRDMS0-d6,400MHzδρρπι8.86s，lH，8.78s，lH，8.42s,lH,8.04dd,4H,J=l.l,8.4Hz,7.80d,IH,J=3.5Hz,7.76tt,2H,J=7.5,1.3Hz,7.73dd,4H,J=7.9,7.4Hz,7.12d,1H,J=3.7Hz,5.90s,2H,5.66s,2H,4.55td,lH,J=4.2,9.6Hz,3.54t,2H,J=7.8Hz,3.30dd,IHJ=10.1,17.6Hz,3.22dd,lH,J=4.2,16.9Hz,2.43m,lH,1.82m,lH,1.70-1.14m,7H,0.85t,2H,J=7.8Hz,-0.083s，9H。[1655]3R-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（⑻-10。方法B:在室温下，向250mL圆底烧瓶中装填对映体提高的（2S，3S-2，3-双苯甲酰氧基琥珀酸-3R-环戊基-3-[4-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2,3-1]嘧啶-4-基）-1!1-吡唑-1-基]丙腈（1:1，17,6.858，0.00862mol、乙酸乙酯（Et0Ac，70mL，0.717mol和水（20mL，l.llmol，并将所得溶液冷却至12°C，然后用3N氢氧化钠水溶液NaOH，10.711^，0.0321111〇1，3.72当量处理，以将?!1调节至8-9。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯（30mL萃取。将合并的有机级份用20%盐水溶液20mL洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩，得到呈无色油状物的对映体提高的3R-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈（⑻-10，3.31g，理论上3.76g，88%，将其通过手性HPLC分析，发现为74:26，偏向所需的R-对映体。对于⑻-Hh1HNMRCD30D，300MHzδρρπι8.77s，lH,8.68s，lH，8.43s,lH,7.66d,lH,J=3.7Hz,7.06d,IH,J=3.7Hz,5.7s,2H,4.53td,IHJ=4.5,10.2Hz,3.62dd,2H,J=8.0,16.0Hz,3.26dd,IH,J=9.7,17.2Hz,3.17dd,lH,J=4.0,17.0Hz,2.59m,lH,1.97m,lH,1.80-1.25m,7H,0.92t,2H,J=8.4Hz,-0.03s，9H!C23H32N6OSiMW,436.63,LCMSEIme437M++H。[1657]{4-[I-1-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（18。在室温下，向配备有搅拌棒、冷凝器和三通阀的250mL圆底烧瓶中装填4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（3f，30g，O·112mol、1，4-二噁烷（300mL，4.0mol、1-1-乙氧基乙基-4-4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二氧杂戊硼烷-2-基-1!1-吡唑14,35.8g，0.134mol，1.2当量）、水（150mL，8.3mol和碳酸钾（K2C03,61.9g，0.448mol，4.0当量）。使所得混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后装填四（三苯基膦）钯（O5.Og，0.00433!11〇1，0.039当量）。使反应混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后升温至85°：。将反应混合物在85°C下搅拌2-5小时。当确认反应完成时，使反应混合物冷却至室温，然后用20%盐水溶液250mL和乙酸乙酯（250mL稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯（250mL萃取。将合并的有机级份用水和盐水洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，并在减压下浓缩。将残留物通过快速柱色谱法Si02,25%至40%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈橙色油状物的{4-[I-1-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯18，其直接用于后续的反应，假定为理论收率。对于18:C19H25N5〇3MW，371.43,LCMSEIme372M++H〇[1658][4-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（19。方法A:在室温下，向配备有搅拌棒和氮气入口的IL圆底烧瓶中装填按上述制备的乙氧基乙基）-IH-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（18,理论量41.6g，0·112mol和四氢呋喃THF，610mL，7·5mol，并在室温下，将所得混合物用2·ON盐酸水溶液140mL，0.28mol，2.5当量处理。随后将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。当确认反应完成时，将反应混合物冷却至〇-5°C，然后用3M氢氧化钠NaOH水溶液95mL将pH调节至9-10。然后将混合物用乙酸乙酯（2X300mL萃取，并将合并的有机萃取物用20%盐水溶液250mL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，并在减压下浓缩，得到呈灰白色至淡黄色固体的粗产物。将粗产物用甲基叔丁基醚MTBE，200mL处理，并使浆料升温回流30分钟，然后冷却至室温。通过过滤收集固体，并用MTBE2X40mL洗涤，在减压下干燥，得到呈白色至灰白色固体的[4-1H-吡唑-4-基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（19，30.5g，理论上33.528,91%，经两个步骤）。对于19:1!1匪1?015〇-16,30010^5??11113.40〇^8，1!1，8.75s,lH,8.66s,lH,8.32s,lH,7.68d,IH,J=3.8Hz,7.11d,IH,J=3.8Hz,6.21s,2H，I·06s，9H;C15H17N5O2MW，299·33，LCMSEIme300M++H。[1659]外消旋4-Q-2-氰基-l-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（20。方法A:在室温下，将3-环戊基丙烯腈8，14.6g，0.12mo1，1.20当量）和DBU18·2mL，0·12mol丄2当量）添加到4-1H-吡唑-4-基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（19,30.0g，0.Imol于乙腈45mL中的悬浮液里。将所得反应混合物加热至50-60°C达17小时澄清溶液在加热中途形成），然后至室温达8小时。当LCMS分析显示确认反应完成时，将反应混合物在减压下浓缩，并将残留物溶解于2L乙酸乙酯中。将所得溶液用水3X200mL洗涤，经硫酸钠Na2SO4干燥，并在减压下浓缩，得到呈粘稠油状物的粗产物20。然后将粗产物通过快速色谱法Si02,0-50%Et0Ac己烷梯度洗脱纯化，得到呈白色固体的外消旋4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（20，13.Og，理论上42.Hg，30.8%收率）。对于20:1HNMRDMS〇-d6，400MHz5ppm8.84s,lH,8.78s,lH,8.39s,lH,7.74d,IH,J=3.7Hz,,7.11d,lH,J=3.8Hz,6.23s,2H,4.53ddd,IH,J=9.9,9.6,4.2Hz,3.26dd,IH,J=17.4,9.9Hz,3.19dd,lH,J=17.2,4.3Hz,2.41m,lH,1.87-1.13m,8H,1.07s,9H；C23H28N6O2Mff,420.51，LCMSEIme421.4M++H。[1660]方法B:在室温下，向[4-1H-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（19,158mg，0·50mmol和3-环戊基丙稀腈（8,122mg，1·Ommol，2·0当量）于二甲基亚砜DMS0，1·OmL，14mmol中的悬浮液里添加碳酸钾粉末（K2⑶3，10·4mg，0·075mmol，0·15当量）。然后将反应混合物在室温下搅拌5小时。反应混合物在2小时内变为澄清溶液。当LCMS显示确认反应完成时，将反应物用水H2O，5mL萃取，并用乙酸乙酯EtOAc，3X15mL萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液（IOmL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，并在减压下浓缩。然后将残留物通过快速色谱法Si02,0_50%Et0Ac己烷梯度洗脱纯化，得到呈白色固体的外消旋（4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（20，172.6mg，理论上210mg，82%收率）。对于20:¾NMRCDC13,400MHzSppm8.87s,1H,8.30s,lH,8.29s,lH,7.47d,IH,J=3.9Hz,6.75d,IH,J=3.9Hz,6.24s,2H,4.25m,lH,3.12dd,1H,J=17.0,8.7Hz,2.95dd,IHJ=17.0,3.9Hz,2.58m,lH,1.95m,lH,1.72-1.52m,5H,1.25m,2H,1.14s,9H；C23H28N6O2Mff,420.51，LCMSEIme421.4M++H。[1661]⑻-4-I-2-氰基-I-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-21。将外消旋4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯20，5.2g，12.36mmol于乙醇和己烷（1:9体积比）混合物中的溶液注入到配备有手性柱30X250mm的制备型HPLC系统中，该柱填充了涂以纤维素三氨基甲酸3,5_二甲基苯酯）的硅胶基填料可以“Chiralce丨㊣0D-H”得自DaicelChemicalIndustries，Ltd.Daicel5μηι。在室温下用由体积比为1比9的乙醇EtOH与己烷的混合物制备且流速为32mLmin的流动相来洗脱手性柱。通过在220nm波长下的UV来监测柱的洗脱。在这些条件下，实现了两种对映体的基线分离，保留时间分别为16.4分钟峰1，非所需（S-对映体⑸-21和21.0分钟（峰2,所需⑻-对映体⑻-21。每次注射为1.4mL浓度为50mgmL的进料溶液，并且使用堆叠注射的每个操作周期为14分钟。此分离方法采取总计75次注射。每次注射后单独收集峰1非所需（S-对映体（S-21和峰2所需R-对映体R-21的级份，并将每个峰收集的级份在减压下浓缩。将得自每个蒸发器的残留物在高真空下进一步干燥至恒重，得到（峰2呈灰白色固体的⑻-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（R-21，2.36g，理论上2.6g，90.8%收率）和（峰1呈灰白色固体的⑸-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基）-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（S-21，2.4g，理论上2.6g，92.3%收率）。[1662]开发了一种手性HPLC方法，其通过使用GMmleefiOD-H柱4.6X50mm，5ym来对两种对映体POM-R-21和⑸-21的手性纯度进行评估，该柱购自ChiralTechnologies,Inc。通过在室温下使用由10%乙醇和90%己烷制成且流速为lmLmin的流动相以大于3.5的拆分度分离两种对映体（⑻-21和⑸-21。群检测波长为220nm。（S-21和⑻-21的保留时间分别为14.1分钟和18.7分钟。[1663]对通过制备型手性HPLC分离的各对映体的品质包括化学纯度HPLC面积％、手性纯度手性HPLC面积％进行分析，通过匪R和LCMS确认其结构。对于⑻-21:非手性纯度（99.2面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度（99.6面积％，通过手性HPLC分析；99.2%ee!1HNMRDMS〇-d6,400MHz5ppm8.84s,lH,8.78s,1H,8.39s,1H,7.74d,lH,J=3.7Hz,,7.11d,IH,J=3.8Hz,6.23s,2H,4.53ddd,IH,J=9.9,9.6,4.2Hz,3.26dd,lH,J=17.4,9.9Hz,3.19dd,IHJ=17.2,4.3Hz,2.41m,lH,1.87-1.13m,8H，l·07s，9H;C23H28N602Mff，420·51，LCMSEIme421·4M++H。对于⑸-21:非手性纯度（99.3面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度（99.8面积％，通过手性HPLC分析；99.6%ee!1HNMRDMS〇-d6,400MHz5ppm8.84s,lH,8.78s,1H,8.39s,1H,7.74d,lH，J=3.7Hz，），7.11d，lH，J=3.8Hz,6.23s，2H,4.53ddd，lH，J=9·9,9·6，4·2Ηζ，3.26dd,lH,J=17.4,9.9Hz,3.19dd,IHJ=17.2,4.3Hz,2.41m,lH,1.87-1.13m,8H,I·07s,9H;C23H28N6O2MW，420·51，LCMSEIme421·4M++H。[1664]3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-丨-基]丙腈（⑻-12，游离碱）。方法B:在室温下，向（4-{1-[IR-2-氰基-1-环戊基乙基]-IH-吡唑-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-21，376mg，0·894mmol于甲醇4·OmL，99mmol中的搅拌溶液里添加氢氧化钠于水中的I.OM溶液NaOH，179L，0.179mmol，2.0当量）。将反应混合物在室温下搅拌过夜（15小时）。当LCMS显示反应彻底完成时，将反应混合物用水IOmL和饱和NaCl水溶液20mL淬灭，并用EtOAc2XIOmL萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，[1665]经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩，得到呈浅黄色泡沫物的（3R-环戊基Ι-Κ-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈（⑻-12，游离碱，274mg，理论上274mg，100%收率），经证实其与方法A所制备的物质相同。[1667][4-1!1-吡唑-4-基-7!1-吡咯并[2,3-1]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（19。方法8:向配备有搅拌棒、隔片、热电偶、500mL加料漏斗和氮气入口的烘干的3L4颈圆底烧瓶中装填氢化钠NaH，矿物油中60重量％，32.82g，0.82mol，1.20当量）和无水1，2-二甲氧基乙烷DME，500mL，4.8mol，并将所得混合物冷却至0-3°C。向烘干的IL圆底烧瓶中装填4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（1，105·Og，0·684mol和1，2-二甲氧基乙烷DME，750mL，7·2mol，然后在5-12°C下，将所得浆料经由大口径套管经30分钟分次添加到氢化钠于DME中的悬浮液里。所得反应混合物为不均匀的。在添加后，移除冷浴，并使混合物逐渐升温至室温且在室温下搅拌1小时，然后冷却至〇-5°C。将特戊酸氯甲酯（特戊酰氧甲基氯，P0M-CI，112mL，0.752mol，1.1当量经30分钟滴加到反应混合物中，同时在0-5°C下进行搅拌。特戊酸氯甲酯的添加为温和放热的，并使反应温度至高达14°C。在添加特戊酸氯甲酯后，移除冷却浴，并使反应混合物回到室温且在室温下搅拌90分钟。当通过HPLC确认后确认反应完成时，将反应用水（IOOmL小心淬灭。并将此含有粗POM-保护的氯脱氮杂嘌呤3f的淬灭反应混合物在不进一步处理和纯化的情况下直接用于后续的Suzuki偶联反应。[1668]在室温下，向按上述制备的含有粗POM保护的氯脱氮杂嘌呤3f的淬灭反应混合物中添加4-4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二氧杂戊硼烷-2-基）-1!1-吡唑（14,20^，0.75111〇1，1.10当量和碳酸钾K2C03,189g，1.37mol，2.0当量）。通过使氮气流通过溶液15分钟使所得混合物脱气，然后用四（三苯基膦钯⑼（7.9g，0.68mmol，0.01当量处理，并将所得反应混合物加热回流约82°C10小时。当通过TLC1:1庚烷乙酸乙酯和LCMS确认反应完成时，将反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯（24L和水4L稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯500mL萃取。将合并的有机层用水2X1L和盐水IL洗涤，然后在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状物的粗{4-[I-1-乙氧基乙基-IH-吡唑-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（18，其不经进一步纯化便直接用于后续的脱保护反应。在室温下，将粗18于THF中的溶液（1L，12.3mol用4NHCl水溶液500mL处理。随后将所得反应混合物在室温下搅拌5小时。当确认反应完成时，将反应混合物冷却至0-5°C，然后用IM氢氧化钠NaOH水溶液2L将pH调节至9-10。将混合物在减压下浓缩以移除大部分THF，并将所得悬浮液在室温下搅拌2小时。通过过滤收集固体，用水3X500mL洗涤，并在真空中干燥，得到呈白色至灰白色固体的[4-1H-吡唑-4-基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]甲基特戊酸酯（19，157.5g，理论上204.43g，77%收率，经三个步骤），经证实其纯度足以（98面积％，通过HPLC分析）在不经进一步纯化的情况下进行后续的反应。对于19=1H匪RDMS〇-d6，400MHzδppml3.42brs,lH,8.76s,lH,8.67s,lH,8.33s,lH,7.68d,IH,J=3.8Hz,7.11d，lH，J=3.8Hz,6.21s，2H,1.06s，9H;13C匪RDMS0-d6，100MHzSppm177.74，152.31,152.09,151.91,139.52,130.39,120.51,113.93,101.91,67.26,38.98,27.26;C15H17N5O2MW，299·33，LCMSEIme300M++H。[1670]2S，3S-2，3-双苯甲酰氧基琥珀酸-⑻-4-Q-2-氰基-!-环戊基乙基-1H_吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（1:1;22。[1671]将室温下的外消旋（4-I-2-氰基-1-环戊基乙基）-IH-吡唑-4-基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（20，200mg，0.47mmol于乙腈、四氢呋喃和丙酮混合物411^，6:1:1中的溶液升温至50°：，接着以一份（+-2,3-二苯甲酰-0-酒石酸（16,8411^，0.235mmol，0.5当量处理。然后将所得均匀溶液在50°C下搅拌10分钟，然后逐渐冷却至室温，并在室温下搅拌23小时。然后通过过滤收集固体，用小体积的己烷冲洗，并在减压下干燥，得到呈白色晶体的（2S，3S-2，3-双苯甲酰氧基琥珀酸-⑻-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（1:1;22，145mg，理论上183mg，79.2%收率）。通过手性HPLC分析经分离盐的对映体纯度，发现比例为87:13，偏向所需的R-对映体。[1672]对于22:C23H28N6O2Mff,420.51，LCMSEIme421.4M++H。[1673]⑻-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-21。方法B:在室温下，将对映体提高的（2S，3S-2，3-双苯甲酰氧基琥珀酸-⑻-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（1:1;22，120mg，0.154mmo1于乙酸乙酯（IOmL和水5.OmL中的溶液冷却至12°C，然后用2N碳酸钾水溶液K2CO3，0.39mL，0.77mmol，5.0当量处理，以将pH调节至8-9。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯（30mL萃取。将合并的有机级份用20%盐水溶液20mL洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的对映体提高的⑻-4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（⑻-21，55·7mg，理论上64·8mg，86%收率），通过手性HPLC分析，发现其比例为87:13，偏向所需的尺-对映体。对于（恥-21:1!1匪1?0150-16,4001〇^5??1118.848，1!1，8.788，1H,8.39s,lH,7.74d,lH,J=3.7Hz,,7.11d,IH,J=3.8Hz,6.23s,2H,4.53ddd,IH,J=9.9,9.6,4.2Hz,3.26dd,IH,J=17.4,9.9Hz,3.19dd,IHJ=17.2,4.3Hz,2.41m，lH,1.87-1.13m，8H,1.07s，9H!C23H28N6O2MW,420.51，LCMSEIme421·4M++H。[1675]外消旋3-环戊基-3-4-4，4，5，5-四甲基-I，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基丙腈23。在室温下，向配备有搅拌棒、冷凝器和氮气入口的500mL圆底烧瓶中装填3-环戊基丙烯腈（84和2异构体的混合物，8.468,0.067111〇1，1.3当量）、乙腈（24211^，4.64mol、4_4,4,5,5_四甲基-1，3,2_二氧杂戊硼烷-2-基）-IH-吡唑（4,lO.Og，0·0515mol和1，8-二氮杂双环[5·4·0]^-一-7-烯（DBU，16·2mL，0·108mol，2·1当量）。然后使所得溶液升温回流，并将混合物搅拌回流18小时。当确认反应完成时，使反应混合物冷却至室温，然后在减压下浓缩。将残留物通过快速柱色谱法（Si02,0%至30%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈灰白色固体的3-环戊基-3-[4-4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基]丙腈23,13.Ig，理论上16.2g，81%。此外消旋混合物不经进一步纯化便直接用于后续的手性柱分离。对于23:1!1匪1?0130-16,4001〇^6卯1118.071，1H,J=0.53Hz,7.65s,lH,4.42td,1H,J=19.2,4.5Hz,3.14dd,IH,J=9.39,17.2Hz,3.08dd,lH,J=4.58,17.2Hz,2.31m,lH,1.75m,lH,1.62-1.32m,4H,1.29-1.01m,15H；Ci7H26BN3O2Mff,315.22LCMSEIme316[M++H]〇[1676]⑻-3-环戊基-3-4-4，4，5，5-四甲基-!，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-1H_吡唑-丄―基丙腈（⑻-24和⑸-3-环戊基-3-4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基丙腈（S-24。将外消旋3-环戊基-3-[4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基]丙腈23，13.Ig，41.56mmol于乙醇和己烷8:2混合物中的溶液注射到配备有手性柱20X250mm的制备型HPLC系统中，该柱填充了固定在硅胶上的直链淀粉三（3,5-二甲基苯基）氨基甲酸酯（ChiralpakKIA，购自ChiralTechnologies1nc。在室温下用由体积比为1比9的乙醇Φ10H与己烧的混合物制备且流速为18mLmiη的流动相来洗脱手性柱。通过在220nm波长下的UV来监测柱洗脱。在这些条件下，实现了两种对映体的基线分离，保留时间分别为7.0分钟（峰1，非所需（S-对映体S-24和8.3分钟峰2，所需⑻-对映体⑻-24。每次注射0.8mL浓度为lOOmgmL的进料溶液，并且使用堆叠注射的每个操作周期为14分钟。此分离方法采取总计164次注射。每次注射后单独收集峰1非所需⑸-对映体⑸-24和峰2所需⑻-对映体⑻-24的级份，并将每个峰收集的级份在减压下浓缩。将得自每个蒸发器的残留物在高真空下进一步干燥至恒重，得到峰2呈灰白色固体的⑻-3-环戊基-3-4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基）丙腈（⑻-24，6.19g，理论上6.55g，94.5%收率和（峰1呈灰白色固体的⑸-3-环戊基-3-4-4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基）丙腈（S-24,6.08g，理论上6.55g，92.8%收率）。[1677]开发了一种手性HPLC方法，其通过使用ChiraIpakgiIA柱4.6X50mm，5ym来对化合物24的两种对映体（（R-24和（S-24的手性纯度进行评估，该柱购自ChiralTechnologies，Inc。通过在室温下使用由15%乙醇和85%己烧制成且流速为lmLmin的流动相以大于3.0的拆分度分离两种对映体（⑻-24和⑸-24WV检测波长为220nm。保留时间分别为6.4分钟⑸-24和7.6分钟⑻-24。[1678]对通过制备型手性HPLC分离的各对映体的品质包括化学纯度HPLC面积％、手性纯度手性HPLC面积％进行分析，并通过NMR和LCMS确认其结构。对于⑻-24:非手性纯度98.8面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度99.8面积％，通过手性HPLC分析；99.6%ee!1HNMRDMSO-de,400MHz5ppm8.07d,IHJ=O.53Hz,7.65s,1H,4.42td,IH,J=19.2,4.5Hz,3.14dd,IH,J=9.39,17.2Hz,3.08dd,IH,J=4.58,17.2Hz,2.31m,lH,1.75m,lH,1.62-1.32m,4H,1.29-1.01m,15H；Ci7H26BN3O2Mff,315.22LCMSEIme316M++H。对于⑸-24:非手性纯度98.6面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度99.6面积％，通过手性HPLC分析;99.2%ee;1HNMRDMS〇-d6，400MHzδρρπι8.07d,lH,J=0.53Hz,7.65s,lH,4.42td,1H,J=19.2,4.5Hz,3.14dd,1H,J=9.39,17.2Hz,3.08dd，lH，J=4.58,17.2Hz,2.31m，lH,1.75m，lH,1.62-1.32m，4H，1.29-1.01m,15H；Ci7H26BN3O2Mff,315.22LCMSEIme316[M++H].[1680]外消旋3-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈9，外消旋SEM-保护的化合物）。方法C:在室温下，向配备有搅拌棒、冷凝器、热电偶和三通阀的25mL圆底烧瓶中装填3-环戊基-3-[4-4,4,5,5-四甲基_1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基]丙腈23，0·697g，2·21mmol，1·3当量）、4_氯-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（3a，0·506g，1·69mmol、I，4-二噁烷（4·44mL、水（4·44mL和碳酸氢钠NaHCO3，0·666g，7·93mmol，4·7当量）。使所得混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后添加四（三苯基膦钯（091.6mg，0.079mmol，〇.047当量）。使所得反应混合物脱气四次，每次用氮气回填。然后使反应物升温至90°C达2-6小时。当TLC和HPLC显示确认偶联反应完成时，使反应混合物冷却至室温，然后用水5mL和乙酸乙酯（IOmL稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯（IOmL反萃取。将合并的有机级份用水（IOmL和饱和NaCl水溶液（IOmL洗涤，经硫酸镁MgSO4干燥，并在减压下浓缩，得到呈琥珀色油状物的粗产物9。将粗产物通过快速柱色谱法（Si02,0%至40%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈黄色油状物的外消旋3-环戊基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈9,外消旋SEM-保护的化合物，61711^，理论上737.911^，83.6%收率）。对于9:1!1匪1?0150-16,4001〇^5??1118.838，1H,8.75s,lH,8.39s,lH,7.77d,IH,J=3.7Hz,7.09d,IH,J=3.7Hz,5.63s,2H,4.53td,IHJ=19.4,4.0Hz,3.51t,2H,J=8.1Hz,3.23dq,2H,J=9.3,4.3Hz,2.41m，lH,1.79m，lH,1.66-1.13m，7H,0.81t，2H，J=8.2Hz,0.124s，9H!C23H32N6OSiMff，436.63，LCMSEIme437M++Handme459M++Na〇[1681]外消旋4-a-2-氰基-卜环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-啦咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯20。方法B:在室温下，向配备有搅拌棒、冷凝器和连接至氮和真空的三通阀的50mL圆底烧瓶中装填4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（3f，700mg，2·61mmol、3-环戊基-3-[4-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基]丙腈（23,93511^，2.97111111〇1，1.13当量）、1，2-二甲氧基乙烷01^，1011^，96111111〇1、水5mL，0·28mol和碳酸钾K2CO3，1·82g，7·84mmol，3·0当量）。使所得混合物脱气三次，每次用氮气回填，然后装填三苯基膦钯⑼（30mg，0.026mmo1，0.010当量）。使所得反应混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后升温至82°C。将反应混合物在82°C下搅拌6小时。当确认反应完成时，将反应混合物冷却至室温，然后用乙酸乙酯45mL和水（IOmL稀释。搅拌所得混合物直至大部分固体已进入溶液。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯（lX25mL萃取。将合并的有机级份用盐水溶液2X25mL洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过快速色谱法Si02,0-50%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈无色油状物的外消旋4-1-2-氰基-1-环戊基乙基-IH-吡唑-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基）甲基特戊酸酯（20，0.97g，理论上I.Ig，88.6%收率），其在室温下于真空中静置时固化。对于20:1HNMRCDCl3,300MHz8.85s,lH,8.29s,lH,8.27s,lH,7.45d,IH,J=3.8Hz,,6.73d,lH,J=3.8Hz,6.22s,2H,4.23ddd,1H,J=10.0,8.6,4.0Hz,3.10dd,1H,J=17.0,8.6Hz,2.92dd,1H,J=17.0,4.0Hz,2.56m,lH,2.00-1.25m,8H,1.12s,9H；C23H28N6O2MW,420·51，LCMSEIme421M++H。[1683]3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-丨-基]丙腈（⑻-12，游离碱）。方法C:在室温下，向配备有搅拌棒、冷凝器和连接至氮和真空的三通阀的25mL圆底烧瓶中装填4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（I，154mg，I.OOmmol、（3R-3-环戊基-3-[4-4，4,5,5_四甲基-1，3,2-二氧杂戊硼烷-2-基）-1Η-吡唑-1-基]丙腈（（R-24,445mg，1·4Immol，1·41当量）、1，4-二噁烷（2·78mL，35·6mmo1、水（1·39mL，77·2mmo1和碳酸钾K2CO3，693mg，5.02mmol，5.0当量）。使所得混合物脱气三次，每次用氮气回填，然后装填四三苯基膦钯⑼（207mg，0.180mmol，0.18当量）。使所得反应混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后升温至95°C。将反应混合物在95°C下搅拌17小时。当确认反应完成时，使反应混合物冷却至室温，然后用乙酸乙酯（20mL和20%盐水溶液（IlmL稀释。将混合物在室温下剧烈搅拌，直至大部分固体已进入溶液。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯（20mL萃取。将合并的有机萃取物用饱和盐水（IOmL洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。然后将残留物通过快速色谱法Si02,0-100%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈无色油状物的3R-3-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）-IH-吡唑-1-基]丙腈（R-12，19711^，理论上306.411^，64.3%收率），其在室温下静置时固化。对于恥-12:1!1匪1?0130-d6,400MHz5ppm12.1bs,lH,8.80d,1H,J=O.42Hz,8.67s,1H,8.37s,1H,7.59dd,lH,J=2.34,3.51Hz,6.98dd,IHJ=1.40,3.44Hz,4.53td,IH,J=19.5,4.63Hz,3.26dd,IH,J=9.77,17.2Hz,3.18dd,IH,J=4.32,17.3Hz,2.40m,lH,1.79m,lH,I·65toI·13m,7H;CnHi8N6MW，306·37LCMSEIme307[M++H]。[1684]S-3-环戊基-3-4-7-二乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（S-25。在室温下，向配备有搅拌棒、冷凝器和连接至氮和真空的三通阀的IOOmL圆底烧瓶中装填4-氯-7-二乙氧基甲基）-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（3b，3.30g，0·0129mol、（3S-3-环戊基-3-[4-4，4，5，5-四甲基-I，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑-1-基]丙腈（3-24,5.128,0.0146111〇1，1.13当量）、1，4-二噁烷（33.411^，0.428111〇1、水16·7mL，0·929mol和碳酸钾K2CO3，8·03g，0·0581mo1，4·5当量）。使所得混合物脱气三次，每次用氮气回填，然后装填四（三苯基膦钯⑼（1.49g，0.00129mOl，0.10当量）。使混合物脱气四次，每次用氮气回填，然后升温至95°C。将反应混合物在95°C下搅拌21小时。当确认反应完成时，将反应混合物冷却至室温，然后用乙酸乙酯45mL和水20mL稀释。搅拌所得混合物直至大部分固体已进入溶液。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯50mL萃取。将合并的有机级份用20%盐水溶液50mL洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过快速色谱法Si02,0%至50%乙酸乙酯己烷梯度洗脱纯化，得到呈无色油状物的（3S-3-环戊基-3-{4-[7-二乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-IH-吡唑-1-基}丙腈⑸-25,4.11g，理论上5.27g，78%收率），其在室温下静置时固化。对于⑸-25:1H匪RDMS0-d6,400MHz5ppm8.84s,lH,8.74s,lH,8.38s,lH,7.71d,1H,J=3.8Hz,,7.12d,lH,J=3.8Hz,6.76s,lH,4.53td,1H,J=19.4,4.3Hz,3.68m,2H,3.52m,2H,3.26dd，lH，J=9.6，17.3Hz,3.19dd，lH，J=4.3,17.2Hz,2.41m，lH,1.80m,1H,1.63-1.09m，13H;C22H28N6〇2MW,408.50，LCMSEIme409M++H。[1686]3-环丙基丙烯腈27。将氰甲基磷酸二乙酯（7,779.58,4.4!11〇1，1.1当量于无水四氢呋喃THF，5.75L中的溶液在氮气下于冰-水-甲醇浴中进行搅拌，并以使得温度保持低于O°C的速率添加IM叔丁醇钾于THF中的溶液KOtBu，4.2L，4.2mo1，1.05当量）。叔丁醇钾溶液添加结束后，在〇_5°C下继续搅拌1小时，并以使得温度保持低于TC的速率添加环戊烷羧甲醛26，280g，4.Omol于无水THF290mL中的溶液。移除冷浴，使反应混合物逐渐升温至室温，并在室温下搅拌过夜。当确认反应完成时，将反应混合物在MTBE14L、水（IOL与盐水6L之间分配。将有机相用盐水6L洗涤。将水相用甲基叔丁基醚MTBE，10L萃取，并用盐水6L洗涤。将合并的有机萃取物在减压下浓缩，并将残留物蒸馏，得到呈无色油状物的3-环丙基丙烯腈27，342.7g，理论上372.5g，92%收率），其经证实为E-异构体和Z-异构体的混合物。对于27:1HNMRDMSO-Cl6，400MHz，对于E-异构体δρρπι6·33dd，IH，J=16·3，10.3Hz,5.69d，lH，J=16.4Hz,1.66m，lH,1.02m，lH，），0.93m，lH,0.69m，2H和对于Z-异构体）δρρπι6.05t，lH，J=10.8Hz,5.45d，lH，J=9.7Hz,1.82m，lH,1.02m，lH,0.93m，lH,0.69m，2H;13CNMRDMS0-d6，100MHz，对于E-异构体δρρπι160.9，118.4,95.4,15.4,8.64和（对于Z-异构体）δρρπι160.0,117.3,95.2,14.8,8.4;C6H7NMW，93·13，GCMSEIme92M+-H。[1687]外消旋3-环丙基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-7H_吡咯并[2,3_d]嘧啶-4-基]吡唑-1-基}丙腈28，外消旋SEM-保护的化合物）。向4-1H-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（5，1.115kg，3.54moI，I.O当量于乙腈（I1L中的悬浮液里添加3-环丙基丙烯腈27，428.7g，4.60mol，1.3当量和1，8-重氮双环[5.4.0]i^一-7-烯DBU，55mL，0.37mol，0.105当量）。将所得反应混合物加热至缓缓回流大约18小时。当HPLC和TLC显示确认反应完成时，将为澄清溶液的反应混合物冷却至室温，然后在减压下浓缩，得到呈深红色油状物的粗Michael加成产物（28。然后将粗产物用二氯甲烷稀释，分成三份，并吸附在硅胶3X2kg上。将吸附至硅胶上的粗产物通过柱色谱法在三个2kg硅胶柱上纯化（以87.5:12.5庚烷EtOAc填充，以87.5:12.5至25:75庚烷EtOAc洗脱）。将含有所需纯产物28的级份合并，并在减压下浓缩，转移，得到呈琥珀色浆料的外消旋3-环丙基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]-吡唑-1-基}-丙腈（28,外消旋SEM-保护的化合物，1.310kg，理论上1.446kg，90.6%收率），其不经进一步纯化便用于手性柱分离。对于28:：21!128沌^丽，408.57，^^EIme409M++H〇[1688]3R-3-环丙基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（⑻-29和3S-3-环丙基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基）丙腈（S-29。在150巴的填充压力下，将由Daicel在3.OL异丙醇（IPA中制成的1.5kg20微米Chira丨cel1"㈤手性固定相CSP的浆料填充到PR0CHR0M动态轴向压缩柱LCl10-1IIcm内径X25cm长度;柱空隙体积:大约1.5L中。然后将填充柱安装在NovasepHipersepHPLC单元上。将柱和HPLC系统用甲醇（17L冲洗，并用由异丙醇和己烷2:8体积比，17L的混合物所制成的流动相冲洗。然后通过将3-环丙基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈28,外消旋SEM-保护的化合物，2500g，6.119mol溶解于流动相中达到80gL的浓度来制备进料溶液。然后将进料溶液依次注射到制备型HPLC手性柱中（每次注射120mL，以供分离。在室温下，将手性柱用流动相以570mLmin的流速洗脱。通过在330nm波长下的UV来监测柱洗脱。在这些条件下，实现了两种对映体的基线分离。每次注射的周期为11分钟，并且就此分离方法而言，进行总计261次注射。每次注射后单独收集峰1非所需⑸-对映体⑸-29和峰2所需⑻-对映体⑻-29的级份，并将每个峰收集的级份在40°C和减压40-120巴）下连续浓缩。将得自每个蒸发器的残留物在高真空下进一步干燥至恒重，得到：（峰2呈淡黄色油状物的（3R-3-环丙基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）-IH-吡唑-1-基）丙腈（R-29，115^，125^理论上，92%其在室温下于真空中静置时固化）和（峰1呈黄色油状物的3S-环丙基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（S-29,1200g，1250g理论上，96%其在室温下于真空中静置时固化）。[1689]开发了一种手性HPLC方法，其通过使用ChiralcellftOD-H柱4·6X50mm，5μπι来对SEM-保护的化合物的两种对映体（⑻-29和⑸-29的手性纯度进行评估，该柱购自ChiralTechnologies，Inc。通过在室温下使用由15%乙醇和85%己烧制成且流速为lmLmin的流动相以大于4.0的拆分度分离SM-保护的化合物的两种对映体。UV检测波长为220nm。（S-对映体（S-29和⑻-对映体（⑻-29的保留时间分别为9.4分钟和12.4分钟。[1690]对通过制备型手性HPLC分离的各对映体的品质包括化学纯度HPLC面积％、手性纯度手性HPLC面积％进行分析，并通过NMR和LCMS确认其结构。对于⑻-29:非手性纯度99.1面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度99.4面积％，通过手性HPLC分析；98.8%ee;C2IH28N5OSiMW,408.57，LCMSEIme409M++H。对于⑸-29:非手性纯度98.5面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度（99.2面积％，通过手性HPLC分析；98·4%ee;C2IH28N5OSiMff,408.57，LCMSEIme409M++H。[1691]3R-3-环丙基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈（⑻-30。将3R-3-环丙基-3-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-吡唑-1-基}-丙腈（⑻-29，102g，0·25mol，1·0当量）于MeCN900mL和H2O75mL中的溶液用固体四氟硼酸锂LiBF4，186.Og，2.Omol，8.0当量分次处理在添加时，反应温度从15°增至38°。然后将所得反应混合物在缓缓回流形成淡悬浮液下加热20小时。当LCMS显示SEM基团裂解完成时，将反应混合物冷却至室温，随后至12°，然后通过添加NH4OH水溶液20%，80mL调节至pH9-10。将所得悬浮液在室温下搅拌，直至LCMS显示无N-羟甲基中间体M++H=309残留，通常在24-36小时内。在此期间，反应混合物的pH降至7-8，添加另外的NH4OH水溶液20%，以将混合物的pH再调节为9-10。将混合物用乙腈300mL稀释，过滤，用乙腈500mL洗涤固体。将混浊滤液在减压下浓缩以移除大部分MeCN，得到包含一些固体的粘稠油状物。将混合物用H2O500mL缓慢稀释，向混浊溶液中加入晶种。然后将溶液在减压和室温下浓缩，直至已形成粘稠悬浮液。将该悬浮液用H2OIL进一步稀释，并将所得悬浮液在室温下搅拌2小时。通过过滤收集固体，用H2O2X500mL洗涤，并在漏斗上抽气干燥1.5小时。19FNMR显示存在少量的无机氟化物，且TLC5%Me0HEt0Ac显示存在少量的基线物质。因此，通过机械搅拌1小时将粗固体在H2OIL中再配成浆料，然后通过过滤收集，并用H2O500mL洗涤。将湿滤饼在漏斗上抽气干燥1.5小时，然后在真空烘箱中于45-50°C下干燥16小时，得到呈灰白色固体的（3R-3-环丙基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈（R-30，60.8g，理论上69·6g，87·4%收率）。对于（R-30:C15HmN6MW，278.31，LCMSEIme279M++H。[1692]3R-3-环丙基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈磷酸盐⑻-31，磷酸盐）。将3R-3-环丙基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈（⑻-30，60·Og，0·2158mol，1·0当量于异丙醇（IPA，900mL中的悬浮液加热至77°C，得到浅黄色的澄清溶液。在77-79°C下，经加料漏斗以稳定流添加结晶H3P0423.3g，0.2374mol，1.1当量于IPA200mL中的溶液，用IPA25mL冲洗加料漏斗。形成即时浊度，随后形成白色悬浮液。在已添加约一半量的H3PO4溶液后，该悬浮液变得极为粘稠。添加另外量的IPAIOOmL以利于搅拌。当添加结束时，将悬浮液在75°C下加热1小时，该悬浮液的流动性增加但保持极为粘稠。将悬浮液经1小时冷却至室温，通过过滤收集固体，并用50%IPA庚烷750mL洗涤并干燥。将固体用庚烷1.2L研磨、搅拌过夜，然后通过过滤收集，并用庚烷300mL洗涤，然后在真空烘箱中于40-50°C下干燥至恒重，得到呈白色微细结晶固体的（3R-3-环丙基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈磷酸盐（⑻-31，磷酸盐，76·7g，理论上81·2g，94·5%收率）。对于⑻-31:1HNMRDMSO-Cl6，400MHzδρρπι12.2bs，lH,9.62bs，3H，H3P〇4,8.77s，lH,8.69s，lH,8.39s，lH，7.59q，lH，J=2.0Hz,6.98d,lH,J=2.7Hz,4.04m,lH,3.37dd,IHJ=16.8,8.0Hz,3.28dd,lH,J=16·8,5·1Ηζ，1.43m，lH，0.68m，lH，0.49m，3H;13C匪RDMS0-d6，100MHzSppm152.2,150.9,149.9,139.3,130.4,127.0,120.8,118.I,112.9,100.0,62.6,23.3,15.7，4.3,3.8;Ci5Hi4N6MW，278.31，LCMSEIme279.1M++H。[[1694]外消旋4,4,4-三氟-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基）-7!1-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-I-基丁腈33，外消旋SEM-保护的化合物）。向配备有机械搅拌器、氮气入口和温度计套管的烧瓶中添加化合物4-1H-吡唑-4-基-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶5，1424g，4.52mol和乙腈（14L。向所得悬浮液中添加4,4,4-三氟巴豆腈（32,601.68,4.97111〇1，1.1当量），然后添加1，8-重氮双环[5.4.0]i^一-7-烯⑽U，67mL，0.452mol，0.1当量）。在添加DBU时注意到轻微放热（5°C。当TLC和LCMS显示确认反应完成时，将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物在减压下浓缩以移除大部分溶剂，并将残留物通过两个硅胶柱每个柱3kg纯化，以进行色谱纯化。将柱用2:1庚烷乙酸乙酯30L洗脱，然后用1:1庚烷乙酸乙酯30L洗脱。将含有所需纯产物（33的级份合并，并在减压下浓缩，得到呈粘稠油状物的外消旋4,4,4_三氟Ια-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丁腈33，外消旋SEM-保护的化合物，1802g，理论上1973g，91.3%收率），其不经进一步纯化便用于随后的手性柱分离。对于33:NMRDMSO-Cl6，400MHzδρρπι8.99s，1H，8.79s，1Η,8.56s,lH,7.80d,IH,J=3.7Hz,7.09d,IH,J=3.7Hz,6.05m,lH,5.63s,2H,3.82dd,IH,J=17.5,10.6Hz,3.66dd,IH,J=17.0,4.9Hz,3.50t,2H,J=7.9Hz,0.80t，2H，J=8.2Hz,-0.145s，9H;13C匪RDMS〇-d6,100MHzδρρπι151.7,151.3,149.5,140.8,132.9,130.4,123.2Jcf=282Hz,121.9,116.2,113.5,100.2,72.3,65.7,57.8Jcf=32.4Hz，17.1，-1.46;Ci9H23F3N60SiMff，436.51，LCMSEIme437M++H。[1695]⑻-4，4,4-三氟-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H_吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丁腈（⑻-34和⑸-4，4，4-三氟-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-1Η-吡唑-1-基丁腈（S-34。在150巴的填充压力，将由Daicel在3.OL异丙醇（IPA中制成的1.5kg20微米ChiraIceP㈤手性固定相CSP的浆料填充到PROCHROM动态轴向压缩柱LCl10-1IIcm内径X25cm长度;柱空隙体积:大约1.5L中。然后将填充柱安装在NovasepHipersepHPLC单元上。将柱和HPLC系统用甲醇（17L冲洗，并用由异丙醇和己烷2:8,17L的混合物所制成的流动相冲洗。然后通过将4，4，4-三氟-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丁腈33,外消旋SEM-保护的化合物，3100g，7.Imol溶解于流动相中达到120gL的浓度来制备进料溶液。然后将进料溶液依次注射每次注射120mL到制备型HPLC手性柱中，以供分离。在室温下，将手性柱用流动相以570mLmin的流速洗脱。通过在330nm波长下的UV来监测柱洗脱。在这些条件下，实现了两种对映体的基线分离。每次注射的周期为11分钟，并且就此分离方法而言，进行总计210次注射。每次注射后单独收集峰1非所需⑸-对映体⑸-34和峰2所需⑻-对映体⑻-34的级份，并将每个峰收集的级份在40°C和减压40-120巴）下连续浓缩。将得自每个蒸发器的残留物在高真空下进一步恒重，得到（峰2呈淡黄色油状物的（3R-3-环丙基-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基）-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）-IH-吡唑-1-基）丙腈（R-34，1457g，理论上1550g，94%其在室温下于真空中静置时固化和峰1呈黄色油状物的（3S-环丙基Ια-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丙腈（S-34,1488g，理论上1550g，96%其在室温下于真空中静置时固化）。[1696]开发了一种手性HPLC方法，其通过使用Chiralcel®〇D-H柱4·6X250mm，5μηι来对保护的化合物的两种对映体SEM-⑻-34和（S-34的手性纯度进行评估，该柱购自ChiralTechnologies，Inc。通过在室温下使用由15%乙醇和85%己烧制成且流速为lmLmin的流动相以大于9.0的拆分度分离SM-保护的化合物的两种对映体。UV检测波长为220nm。（S-对映体（S-34和⑻-对映体（⑻-34的保留时间分别为11.2分钟和22.2分钟。[1697]对通过制备型手性HPLC分离的各对映体的品质包括化学纯度HPLC面积％、手性纯度手性HPLC面积％进行分析，并且其结构通过NMR和LCMS确认。对于⑻-34:非手性纯度99.2面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度99.4面积％，通过手性HPLC分析；98.8%ee;NMRDMS0-d6,400MHzSppm8.99s，lH，8.79s，lH，8·56s，lH，7.801,lH，J=3.7Hz,7.09d，lH，J=3.7Hz,6.05m，lH,5.63s，2H,3.82dd，lH，J=17.5，10.6Hz,3.66dd,lH,J=17.0,4.9Hz,3.50t,2H,J=7.9Hz,0.80t,2H,J=8.2Hz,-0·145s，9H;13C匪RDMS〇-d6，100MHzδρρπι151·7，151·3，149·5，140·8，132·9，130·4，123.2Jcf=282Hz,121.9,116.2,113.5,100.2,72.3,65.7,57.8Jcf=32.4Hz,17.1,-1.46;Ci9H23F3N60SiMW,436.51，LCMSEIme437M++H。对于（S-34:非手性纯度（99.1面积％，通过HPLC在220nm下检测）；手性纯度99.2面积％，通过手性HPLC分析;98.4%ee;NMRDMS0-d6,400MHz5ppm8.99s,lH,8.79s,lH,8.56s,lH,7.80d,IH,J=3.7Hz,7.09d,lH,J=3.7Hz,6.05m,lH,5.63s,2H,3.82dd,IHJ=17.5,10.6Hz,3.66dd,IH,J=17.0,4.9Hz,3.50t,2H,J=7.9Hz,0.80t,2H,J=8.2Hz145s,9H；13CNMRDMS0-d6，100MHzδρρπι151.7,151.3,149.5,140.8,132.9,130.4,123.2Jcf=282Hz，121.9,116.2,113.5,100.2,72.3,65.7,57.8Jcf=32.4Hz,17.1,-1.46!Ci9H23F3N6OSiMff,436.51，LCMSEIme437M++H。[1698]4，4，4-三氟-3⑻-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-吡唑-I-基]-丁腈（R-35。向配备有温度计套管、回流冷凝器、机械搅拌器和氮气入口的烧瓶中添加4,4,4-三氟_3R-{4-[7-2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-吡唑-1-基}-丁腈（⑻-34，312g，0·716mol、乙腈4·5L和水376mL。然后，将所得混合物用固体四氟硼酸锂LiBF4,697g，7.16mol，10.0当量在室温下分次处理。将混合物加热回流13小时。当TLC显示无起始物质残留且产生两种产物完全脱保护和羟甲基类似物），将反应混合物冷却至室温，然后在冰水浴中冷却至0°C，然后在0-5°C下用氢氧化铵水溶液（NH40H，20%，245mL逐滴进行处理，使得pH介于9和9.5之间，如通过范围在5-10的pH条测定。移除冰浴，并将粘稠悬浮液在室温下搅拌过夜。当HPLC显示确认反应完成时，将反应混合物用水IL、盐水500mL和乙酸乙酯（7L处理。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯（2X2L萃取。将合并的有机层在减压下浓缩，并将残留物重新溶解于乙酸乙酯4L中，并用盐水2X2L洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，并将溶剂在减压下移除，得到稠浆料。将庚烷添加到稠浆料中，并继续移除溶剂直至移除大部分乙酸乙酯。通过过滤收集固体并在真空中干燥，得到呈白色粉末的粗产物（⑻-35，206g，理论上219.3g，94%收率，98%纯，通过HPLC分析）。将粗产物从乙醇700mL中再结晶，得到呈白色微细结晶固体的纯4,4,4_三氟-3⑻-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-吡唑-1-基]-丁腈（⑻-35，188·6g，理论上219·3g，86%收率，〉99·5%纯，通过HPLC分析）。对于⑻-35:1HNMRDMS0-d6,500MHzδppm12·2bs，lH，8·95s,lH,8.74s,lH,8.53s,lH,7.63d,IH,J=3.7Hz,6.97d,IH,J=3.8Hz,6.04m,1H,3.81dd，lH，J=17.1，10.1Hz，3.65dd，lH，J=17.1，5.0Hz·;13C匪RDMS〇-d6，125MHzδρρπι152.3,151.0,149.0,140.7,132.7,127.2,123.1Jcf=284Hz,122.2,116.2,113.1,99.5,57.7Jcf=33.0Hz，17.3;Ci3H9F3N6Mff,306.25，LCMSEIme307M++H。[[1700]3-[4-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丁腈37。在室温下，向配备有搅拌棒、冷凝器、热电偶和氮气入口的250mL三颈圆底烧瓶装填4-1H-吡唑-4-基-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（5，10.3g，0.033mol、2_丁烯腈（36,3.0mL，0.037mmol，l·12当量）和乙腈10011^，2.0111〇1。将所得混合物用1，8-二氮杂双环[5.4.0]^^—-7-烯（DBU，2·OmL，0.013111〇1，0.4当量处理，随后升温至55°：。将反应混合物在55°：下搅拌15-20小时。当^：MS显示确认反应完成时，将反应混合物在减压下浓缩，得到橙色油状物。将粗产物通过快速柱色谱法（3丨02,40-80%乙酸乙酯己烷梯度洗脱）纯化，得到呈无色油状物的3-[4-7_{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基]丁腈37,12.3g，理论上12.62g，97.5%收率），其在室温下于真空中静置时固化。对于37=1HNMRCDCl3,400MHz5ppm8.84s,lH,8.33s,lH,8.30s,lH,7.39d,IH,J=3.8Hz,6.79d,lH,J=3.8Hz,5.67s,2H,4.77m,lH,3.53t,2H,J=8.2Hz,3.05dd,IHJ=16.8,6.2Hz,2.98dd,lH,J=16.8,6.3Hz,1.79d,3H,J=6.5Hz,0.91t,2H,J=8.3Hz,-0·068s,9H;Ci9H26N6OSiMW,382.53，LCMSEIme383M++H。[1701]S-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丁腈（S-38和⑻-3-4-7-2-三甲基甲硅烷基）乙氧基）甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基-IH-吡唑-1-基丁腈（⑻-38。将外消旋3-[4-7-{[2-三甲基甲硅烷基）乙氧基]甲基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基）-IH-吡唑-1-基]丁腈（37，38.3g，0.Immol于乙醇和己烧（15:85混合物中的溶液注射到配备有手性柱30X250mm的制备型HPLC系统中，该柱填充了涂以纤维素三氨基甲酸3,5_二甲基苯酯）的硅胶可以〔:11丨瓜丨€6丨197.5%。将此物质储存于SureSeal瓶中，以将水解降至最低。[1723]1-乙氧基乙基）-4-4,4,5,5-四甲基[1，3,2]二氧杂戊硼烷-2-基）-1!1-吡唑19。向配备有机械搅拌器、温度计套管、加料漏斗和N2入口的22L4颈烧瓶中装填1-乙氧基乙基-4-碘-IH-吡唑（20，700.Og，2.63mol和THF5.5L。将所得溶液冷却至介于-12°C-15°C之间。经由加料漏斗经30分钟添加2Mi-PrMgCl于THF中的溶液（I513mL，3.03moI，1.15当量），同时使反应温度保持98%。[1726]4-溴-1-乙氧基乙基-IH-吡唑（22。向4-溴吡唑（21，70.0g，0.476mol于CH2Cl2600mL中的溶液里添加于二噁烷中的3.1MHC1溶液（4mL和乙基乙烯基醚（18，41g，0.569mol，1.2当量）。将所得反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应用NaHCO3水溶液淬灭，并将两层分离，。将有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，并在减压下浓缩至干，得到4-溴-1-乙氧基乙基-IH-吡唑（22，113g，理论上104.3g，97%收率），为油状物GC纯度:89%，其不经进一步纯化便用于后续的反应。[1727]1-乙氧基乙基）-4-4,4,5,5-四甲基[1，3,2]二氧杂戊硼烷-2-基）-1!1-吡唑19。在室温下，向iPrMgCl.LiCl50mmol，1.8当量）的IOOmL溶液中添加4-溴-1-乙氧基乙基-IH-吡唑（22,6.15g，28mmol。将所得反应混合物在室温下搅拌12小时，然后冷却至-20°C。然后将甲氧基硼酸频哪醇酯（23，10.68,67_〇1，2.4当量添加到反应混合物中。将所得混合物在O-HTC下搅拌1小时。添加NH4Cl水溶液，以使反应淬灭。然后将混合物用石油醚PE萃取。将合并的PE萃取物用饱和NaHCO3洗涤，经Na2SO4干燥，并在减压下浓缩。使粗产物在PE中结晶，得到1-乙氧基乙基-4-4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧杂戊硼烷-2-基-IH-吡唑（19,4.2g，理论上7.45g，56.4%收率），为白色至灰白色固体GC纯度：〜99%。对于19:咕匪1?0150-16,4001〇^3??1118.098，1!1，8.588，1!1，7.628，1!1，5.559，1!1，了=6.1Hz,3.37dq,lH,J=7.1,9.6Hz,3.12dq,IH,J=7.0,9.7Hz,1.56d,3H,J=6.0Hz,I·24s，12H,1.00t，3H，J=7.0Hz!Ci3H23BN2O3Mff，266.14，LCMSEIme267M++H。[1728]已对本发明的许多实施例进行了描述。然而，应当理解，可在不脱离本发明的精神和范围的情况下进行各种修改。因此，其它实施例均在以下权利要求的范围内。

权利要求：1.一种制备包含式πΓ化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物的方法：包括:使所述式Γ化合物：与三氟化硼乙醚化物、接着与氢氧化铵水溶液反应，以形成包含所述式Iir化合物的对映体过量的⑻-对映体的组合物;其中*为手性碳。2.—种制备3R-环戊基-3-[4-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐的方法，包括使3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈与磷酸在2-丙醇和二氯甲烷存在下反应。3.—种纯化3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基）吡唑-1-基]丙腈磷酸盐的方法，包括使3R-环戊基-3-[4-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐从包含甲醇、2-丙醇和正-庚烷的溶剂混合物中再结晶。4.根据权利要求3所述的方法，其中将所述2-丙醇和正-庚烷添加至（3R-环戊基Ι-Κ-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基吡唑-1-基]丙腈磷酸盐在甲醇中的混合物里。5.化合物，其为：6.化合物，其为：

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