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申请/专利权人:武汉纤然生物科技有限公司
摘要:本发明公开一种提升大片段基因编辑效率的转染剂及其应用,涉及基因编辑技术领域。本发明通过在需要转染的载体质粒上连接膜定位信号肽和分选标志物的编码序列,在磁珠上连接有与所述分选标志物结合的抗体;在外加磁场的作用下,将所述载体质粒转入宿主细胞进行DNA转染,同时加入含有所述磁珠的缓冲液;转染结束后移除缓冲液和未被磁珠结合的细胞,备用;继续在外加磁场的作用下,加入含有水解酶的孵育液进行孵育,所述水解酶为水解所述抗体的酶;再洗脱分离磁珠,得到含有转染靶细胞的混合液。整个方法不需要用任何流式细胞仪或者荧光显微镜来检测和分离转染靶细胞,获得的转染靶细胞纯度高,操作更方便,耗时更短,成本更低。
主权项:1.提升大片段基因编辑效率的转染分选方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、在需要转染的载体质粒上连接膜定位信号肽和分选标志物的编码序列,在磁珠上连接有与所述分选标志物结合的抗体;S2、在外加磁场的作用下,将所述载体质粒转入宿主细胞进行DNA转染,同时加入含有所述磁珠的缓冲液;转染结束后移除缓冲液和未被磁珠结合的细胞,备用;S3、继续在外加磁场的作用下,加入含有水解酶的孵育液进行孵育,所述水解酶为水解所述抗体的酶;再洗脱分离磁珠,得到含有转染靶细胞的混合液。
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权利要求:
百度查询: 武汉纤然生物科技有限公司 提升大片段基因编辑效率的转染分选方法和转染系统
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