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申请/专利权人:河北轻舟生物科技有限公司
摘要:本申请涉及基因检测技术领域,公开了心脑血管药物基因快速检测方法,包括S1.采集患者的血液样本;S2.对采集的血液样本进行预处理分离出基因组DNA;S3.采用特定的引物和探针组合进行PCR扩增;S4.对扩增产物进行实时荧光检测;S5.根据检测得到的荧光信号值,利用预先建立的标准曲线计算基因的表达水平;S6.基因表达水平与预设的阈值进行比较,判断患者对心脑血管药物的敏感性;S7.输出检测结果。通过检测多个与心脑血管药物相关的基因位点,考虑个体基因差异,能为患者制定更精准的用药方案,避免治疗效果不佳和不良反应,提高治疗的有效性和安全性,通过优化检测方法流程与参数,大大缩短了检测时间,并且提高了检测的准确率。
主权项:1.心脑血管药物基因快速检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.采集患者的血液样本,血液样本的采集量为2-5毫升;S2.对采集的血液样本进行预处理,包括在35-45℃下孵育20-30分钟,以分离出基因组DNA;S3.采用特定的引物和探针组合进行PCR扩增,PCR反应体系为15-25μL反应体系,包含10×PCR缓冲液1.5-2.5μL,20-30mmolL的MgCl20.8-1.2μL,8-12mmolL的dNTPs0.3-0.5μL,上下游引物各0.6-1μL,探针0.3-0.5μL,3-7UμL的TaqDNA聚合酶0.1-0.2μL,模板DNA1-2μL,余量为双蒸水,反应条件为:在92-96℃下变性3-5分钟,然后进行25-35个循环,每个循环包括在55-60℃下退火20-30秒,在68-72℃下延伸20-30秒;S4.对扩增产物进行实时荧光检测,检测使用的荧光染料为ROX,检测仪器的激发波长为480-490nm,发射波长为510-520nm;S5.根据检测得到的荧光信号值,利用预先建立的标准曲线计算基因的表达水平,标准曲线通过对已知浓度的基因标准品进行检测绘制而成;S6.将计算得到的基因表达水平与预设的阈值进行比较,以判断患者对心脑血管药物的敏感性;S7.输出检测结果,检测结果包括基因表达水平、药物敏感性判断以及相应的建议用药方案。
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