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申请/专利权人：江西省、中国科学院庐山植物园
摘要：本发明涉及植物基因工程技术领域，具体公开了一种VIGS沉默体系及构建方法和应用，通过将目的基因片段和参与叶绿素合成的指示基因ChlH共同表达，构建获得表达载体，然后通过子叶注射法侵染荆芥，构建获得荆芥VIGS沉默体系。本发明提供的方法以肉眼观察黄化苗取代传统基因表达检测的分子实验，大大降低了阳性苗筛选的难度、周期和成本；并可直观指示叶片上VIGS干扰区域，通过精准取材，提高了基因功能鉴定的成效。
主权项：1.一种VIGS沉默体系的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：构建干扰示踪载体TRV2-ChlH-目的基因：以荆芥cDNA为模板，用核苷酸序列如SEQIDNO.1-2所示的NeChlH-F1-EcoRI和NeChlH-R1-BamHI为引物进行PCR扩增获得叶绿素合成关键基因ChlH片段；将扩增获得的基因ChlH片段插入到TRV2质粒的EcoRI和BamHI位点，形成TRV2-ChlH可视化载体；将需要示踪的目的基因片段插入到TRV2-ChlH载体的XhoI和SmaI酶切位点中，获得TRV2-ChlH-目的基因表达载体，即干扰示踪载体；将获得的TRV2-ChlH-目的基因表达载体转化农杆菌后于目的植株子叶进行注射侵染，构建获得VIGS沉默体系；所述目的植株为荆芥属植株；所述目的基因选自荆芥属植株的任意基因。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江西省、中国科学院庐山植物园 一种VIGS沉默体系及构建方法和应用
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