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申请/专利权人:上海健康医学院
摘要:本发明公开了一种人类多能干细胞诱导为类听觉神经元的方法,包括以下步骤:S1:从人类多能干细胞诱导为听觉神经前体细胞;S2:听觉神经前体细胞的纯化;S3:听觉神经前体细胞增殖和分化为类听觉神经元。本发明提供了一种新颖、高效的方法,将hPSCs细胞分化为ONs,不仅可以通过生长因子将多能干细胞诱导为ONs,还可以通过对信号通路的调控和培养基的调整优化ONs的诱导和繁殖。这项技术不仅可以应用于治疗听神经病等疾病,也为感觉神经系统损伤等多种疾病提供新的治疗策略。
主权项:1.一种人类多能干细胞诱导为类听觉神经元的方法,其特征在于包括以下步骤:S1:从人类多能干细胞诱导为听觉神经前体细胞;S2:听觉神经前体细胞的纯化;S3:听觉神经前体细胞增殖和分化为类听觉神经元;其中,S1的诱导过程如下:将人类多能干细胞细胞铺板,待细胞密度长至60%左右时开始进行诱导:第0~3天:在含有20μM的SB431542的BGM培养基中添加50nM的LDN1931892HCl及2μM的IWP-2进行培养;第4~5天:停止使用LDN1931892HCl,并继续在BGM培养基中添加2μM的IWP-2进行培养;第5~7天:继续使用BGM培养基培养;第8~13天:继续使用BGM培养基培养,并在培养基内加入50ngml的人源重组FGF3和FGF10;第14~19天:将BGM培养基替换为DFBN培养基,并在培养基内加入50ngml的人源重组FGF3和FGF10。
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权利要求:
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