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一种体积缩小型SpCas9变体及其应用 

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申请/专利权人:广东轻工职业技术学院

摘要:本发明公开了一种SpCas9突变体及其应用,该SpCas9突变体将野生型SpCas9175–310位氨基酸删除,并用肽链GGGGSGGGGS将174和311位的氨基酸连接在一起,此突变体命名为S4,S4可以S4可以在只有1242个氨基酸的情况下,保持野生型SpCas9的46.6%剪切效率。实验显示,倘若直接将174位氨基酸和311位的氨基酸连接在在一起,得到的变体S0的剪切效率仅为野生型剪切效率的36.8%。因而,我们通过删除REC2结构域并添加柔性链的方式,在缩小SpCas9体积的同时,大大提高了剪切效率。

主权项:1.SpCas9突变体S4或其活性片段在基因编辑中的应用,其特征在于,所述SpCas9突变体或其活性片段为:在如SEQIDNO.1所示的野生型SpCas9的基础上175–310位氨基酸,并用肽链GGGGSGGGGS将174和311位的氨基酸连接在一起,其中,所述SpCas9突变体S4或其活性片段具有内切核酸酶活性;所述SpCas9突变体S4或其活性片段的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。

全文数据:

权利要求:

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