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一种提高毕赤酵母支链氨基酸合成能力的方法 

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申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所;天工生物科技(天津)有限公司

摘要:本发明属于生物技术领域,提供了一种提高毕赤酵母支链氨基酸合成能力的工程菌株构建方法。在本发明中,以巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)为宿主,过表达BCAA前体物质α‑酮异戊酸合成的关键酶的基因ILV3,进一步对缬氨酸反馈抑制途径中编码关键酶的基因中缬氨酸结合位点进行理性改造获得改造菌株,其产支链氨基酸的能力在甲醇含量为0.5%(vv)的最小培养基中摇瓶水平可达8.534mgg,较出发菌株HTX‑33提升23.8%,为支链氨基酸的工业生产提供新思路。

主权项:1.一种提高毕赤酵母支链氨基酸合成能力的工程菌株构建方法,其特征在于,所述工程菌株是在出发菌的PNSII-8染色体上整合过表达编码前体物质α-酮异戊酸的二羟酸脱氢酶DHAD的基因,进一步对缬氨酸反馈抑制途径中编码乙酰乳酸合酶AHAS调节亚基的PAS_chr2-1_0864基因(GeneID:8198017)引入氨基酸取代破环缬氨酸结合位点的突变体。

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