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一种别藻蓝蛋白免疫荧光探针的制备方法 

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申请/专利权人:宝天生物科技(上海)有限公司

摘要:本发明公开了一种别藻蓝蛋白免疫荧光探针的制备方法,通过可荧光法控制偶联位点数目,而且无需铜离子催化的叠氮‑炔环加成SPAAC反应的二级反应动力学常数可达到1;如此目标蛋白上能够稳定可控的结合所需数量的别藻蓝蛋白,别藻蓝蛋白标记效率更高,稳定性更好,获得的别藻蓝蛋白免疫荧光探针可以长时间稳定保存,在进行免疫检测时,也能获得更强的阳性信号,进一步提高信噪比。本发明的别藻蓝蛋白免疫荧光探针的制备方法,制得的别藻蓝蛋白免疫荧光探针稳定性好保质期长,在进行免疫检测时,阳性信号强、信噪比高。

主权项:1.一种别藻蓝蛋白免疫荧光探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,准备交联过的别藻蓝蛋白;S2,采用胺反应性二苯并环辛炔对步骤S1中的交联过的别藻蓝蛋白做活化处理,得到活化别藻蓝蛋白,并用荧光法鉴定活化别藻蓝蛋白上偶联的二苯并环辛炔基团数量;S3,用胺反应性叠氮修饰剂对目标蛋白做修饰,得到修饰后目标蛋白,并用荧光法鉴定修饰后目标蛋白上偶联的叠氮基团数量;S4,将步骤S2获得的活化别藻蓝蛋白与步骤S3获得的修饰后目标蛋白偶联,获得别藻蓝蛋白免疫荧光探针。

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