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申请/专利权人：安徽申亚农业发展有限公司

摘要：本发明公开了一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，包括以下步骤：用右旋糖酐蔗糖酶发酵液和右旋糖酐酶发酵液的双酶协同发酵体系制备低分子量的右旋糖酐，采用大孔树脂柱获到纯化的右旋糖酐；采用过氧化物酶混合液作为氧化剂氧化右旋糖酐，制备获得氧化型右旋糖酐；采用磷酸钠滴定络合制备右旋糖酐铁，并在高温高pH值条件下固化获得右旋糖酐铁；采用离子柱除去未反应的右旋糖酐和小分子右旋糖酐、铁以及其中的离子，得到纯化后的右旋糖酐铁。本发明利用右旋糖酐蔗糖酶和右旋糖酐酶的协同作用，并通过适当的粘度控制，制备低分子量的右旋糖酐，由此所得右旋糖酐铁分子量分布均匀，稳定性高，杂质含量少，环境污染少。

主权项：1.一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：以蔗糖为底物，在右旋糖酐蔗糖酶发酵液的存在下先合成高分子量的右旋糖酐，再加入右旋糖酐酶发酵液，降解高分子量的右旋糖酐得到分子量5000～7500Da的右旋糖酐；步骤2：通过离心5000转5分钟，除去菌种，离心液通过大孔树脂柱得到低分子右旋糖酐，将得到的低分子量的右旋糖酐用纯水加热到35-75℃溶解获得质量浓度20％的右旋糖酐溶液，以过氧化物混合液作为氧化剂，制备获得氧化型右旋糖酐；步骤3：在搅拌下向步骤2获得的氧化型右旋糖酐溶液中同时滴加质量浓度为40-50％的三氯化铁溶液以及质量浓度为20％的磷酸钠溶液控制pH值，滴加过程中控制体系的pH在3-5，滴加时间为4h，络合温度为40℃，获得右旋糖酐铁，随后用氢氧化钠调节体系的pH值至10.5-11.5，升温至75℃反应5h以上获得固化右旋糖酐铁；步骤4：将步骤3获得的反应液冷却至室温，然后用20000-80000Da的超滤膜除去未反应的右旋糖酐和低分子量的右旋糖酐铁，然后再用100-500Da的超滤膜除去其中的盐离子，喷雾干燥后获得纯化后的右旋糖酐铁，所述步骤1的反应体系中，蔗糖的浓度为120-200mgmL，右旋糖酐蔗糖酶发酵液中右旋糖酐蔗糖酶的浓度为0.2IUmL，右旋糖酐酶发酵液中右旋糖酐酶的浓度为0.2IUmL，反应温度为16-37℃，反应时间为48-72小时，所述步骤1的反应置于一个特制发酵罐中，发酵罐内设置圆筒状陶瓷半透膜，陶瓷半透膜内置有发酵体系且设置有搅拌器，陶瓷半透膜与发酵罐壁之间的环形空腔内置有纯水，反应15h内为发酵初期，保持陶瓷半透膜内外液体的静压比为5:1，避免反应体系的蔗糖浓度及粘度过低；发酵二期为15h-20h，匀速降低陶瓷半透膜内反应体系的静压，直至发酵20h时，内外静压比为3:1，菌种发育进入对数期，反应体系粘度及产物浓度逐渐增加；发酵三期为20-30h，匀速降低陶瓷半透膜内反应体系的静压，直至发酵30h时，内外静压比为1:1，此时为反应体系粘度及产物浓度暴增时期，维持低压使外侧水得以渗透至反应体系中，降低体系浓度；发酵四期为30-40h，反应维持平稳，菌种发育至最高峰，粘度达到最高峰，适当增加陶瓷半透膜外侧静压，使至发酵30h时，内外静压比为1:2；发酵40h-结束前，降解反应占主导，粘度逐渐下降，逐步降低陶瓷半透膜外侧静压，使发酵结束前内外静压比为1:1；发酵结束后，快速增加陶瓷半透膜内反应体系静压使发酵结束前内外静压比为10:1，并逐步排出陶瓷半透膜外液体，得到相对粘度低于100的反应液，所述陶瓷半透膜与发酵罐壁之间的环形空腔中纯水的温度维持在16-37℃，保证反应体系温度的稳定性。

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