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一种抗毒素血清及制备方法 

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申请/专利权人:深圳市中医院

摘要:本申请涉及血清技术领域,尤其涉及一种抗毒素血清及制备方法,方法包括步骤1.选取准备蛇毒采集样本;步骤2.提取、混合同种蛇毒,一次冻干处理;步骤3.溶解、测定蛇毒样品的蛋白质浓度;步骤4.二次冻干处理;步骤5.免疫作业;步骤6.溶解二次冻干样品;步骤7.减毒处理后的溶液与弗氏不完全佐剂混合制备免疫原。步骤8.蛇毒注射;步骤9.抗毒素血清抗体分离纯化。本申请采用三种蛇毒样品分别结合缓冲液的冲洗与稀释的方法,得到抗体,与现有技术相比减少了过滤以及沉淀步骤,实现了低成本且更快速制备抗海蛇蛇毒血清的目的。

主权项:1.一种抗毒素血清制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1.选取准备蛇毒采集样本,样本为中国南海海域区域采集的8条青环海蛇以及16条平颏海蛇成体;步骤2.提取样本蛇毒,混合同种蛇毒,一次冻干处理,并冷冻保存,保存温度为-60℃~-55℃保存,获得第一蛇毒样品、第二蛇毒样品以及混合蛇毒样品;步骤3.溶解第一蛇毒样品、第二蛇毒样品以及混合蛇毒样品,测定第一蛇毒样品、第二蛇毒样品以及混合蛇毒样品的蛋白质浓度;步骤4.二次冻干处理,得到二次冻干样品;步骤5.免疫作业,选用20只雄性大白兔用于免疫,将兔子从1到20开始编号,随机分成三组,为第一组、第二组以及第三组;步骤6.溶解二次冻干样品,将二次冻干样品称重并溶解在生理盐水中配制成15μgμl蛇毒溶液,用生理盐水稀释1min-2min,接着用85.5℃-87℃的水浴蛇毒溶液15min-21min进行减毒处理;步骤7.减毒处理后的溶液与弗氏不完全佐剂混合制备免疫原。步骤8.对步骤5中的第一组用青环海蛇毒素注射,对第二组用平颏海蛇毒素注射,对第三组用混合青环海蛇以及平颏海蛇混合蛇毒注射;步骤9.抗毒素血清抗体分离纯化。

全文数据:

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