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申请/专利权人：复旦大学

摘要：本发明提供一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法，具体步骤如下：S1：配制混合标准储备液；S2：配制内标混合液；S3：绘制标准曲线；S4：样品前处理：取血清于玻璃试管中，依次加入内标混合液、甲酸以及乙腈，涡旋混匀后离心，分离得到上清液和残余部分；转移上清液于另一玻璃试管中，再向残余部分加入乙腈，离心后取上清液；合并上清液后进行氮吹浓缩，加乙腈水溶液，超声复溶，最后将复溶液通过尼龙针式滤膜转移至进样小瓶中，留待上机检测；S5：检测和结果分析：采用液相色谱‑质谱仪进行血清中有机酸磷酯含量的检测和结果分析。本发明开发的方法具有灵敏度高、定量准确、血清用量少、操作简单和分析时间短的特点，可用于人群OPEs的常规生物监测。

主权项：1.一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法，其特征在于，具体步骤如下：S1：配制混合标准溶液：依次准确吸取浓度均为100μgmL的TBP、TCEP、TDCPP、TBEP、TPrP、TPhP、TCIPP、TEP和TDBPP的标准溶液各20μL加于2mL容量瓶中，使用乙腈定容，得到浓度为1μgmL的混合标准溶液；S2：配制内标混合液：依次准确吸取浓度均为20μgmL的氘代同位素内标TBP-d27、TPhP-d15、TCEP-d12、TCIPP-d18、和TPrP-d21的标准溶液各100μL加于2mL容量瓶中，使用乙腈定容得到浓度为1μgmL的内标储备液；接着取400μL内标储备液加于1mL容量瓶中，使用乙腈定容，得到浓度为400μgL的内标混合液；S3：绘制标准工作曲线：取浓度为1μgmL的混合标准溶液400μL加于1mL容量瓶中，乙腈定容后得到浓度为400μgL的混合标准液，然后逐级稀释得到浓度为200、100、40、20、10、4和2μgL的混合标准液，在工作曲线制作过程中，则分别取上述标准溶液10μL于200μL血清中，经过前处理得到浓度分别为0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20ngmL的标准工作曲线；S4：样品前处理：取200μL血清于玻璃试管中，依次加入10μL浓度为400ngmL的内标混合液、40μL甲酸以及4mL乙腈，涡旋混匀1min后，以4000rpm的转速离心10min，分离得到上清液和残余部分；转移上清液于另一玻璃试管中，再向残余部分加入2mL乙腈，接着在4000rpm的转速下离心5min，取上清液；合并所述上清液后进行氮吹浓缩，氮吹温度为40℃，在氮吹至干的样品中加入200μL乙腈水溶液，超声复溶5min；最后将复溶液通过0.22μm尼龙针式滤膜转移至带有玻璃内衬管的进样小瓶中，留待上机检测；S5：检测和结果分析：采用液相色谱-质谱仪进行血清中有机酸磷酯含量的检测和结果分析。

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