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申请/专利权人：苏州近岸蛋白质科技股份有限公司
摘要：本发明提供了一管法酶促合成加帽mRNA的方法。本发明的方法省略了IVT后的纯化mRNA的步骤，并获得了加帽效率更高、副产物更少的加帽产物。本发明提供了工艺简便、流程较短、快速高效的酶促合成加帽mRNA的方法，简化了mRNA加帽产物的生产工艺、降低了生产成本，有利于工业化的生产。
主权项：1.一种体外合成加帽mRNA的方法，其特征在于，包括步骤：S1提供一目标DNA；S2提供第一反应体系，并在第一反应体系中对上述目标DNA进行体外转录反应，获得含有目标mRNA分子的第一反应混合物；S3将所述第一反应混合物与加帽试剂进行混合，从而提供第二反应体系，并在所述第二反应体系中使用病毒加帽酶和二氧甲基转移酶对上述获得的目标mRNA分子进行加帽反应，获得含有加帽产物的第二反应混合物，其中，所述加帽产物为加帽的目标mRNA，所述第二反应体系包含SAM，其中SAM的浓度为0.2-1.5mM，并且第二反应体系中，游离态Mg离子浓度为0.5-6.0mM，加帽反应的温度为40-45℃；和S4从所述第二反应混合物中，分离出加帽的目标mRNA；其中，在S3中，所述第一反应混合物未经纯化处理。
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权利要求：
百度查询： 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司 一管法酶促合成加帽mRNA的方法
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