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申请/专利权人：中国医学科学院基础医学研究所
摘要：本发明公开了一种单链DNA修复模板及其联合M3814小分子抑制剂提高基因编辑效率的方法，属于基因编辑领域。该方法包括联合使用含RAD51高亲和性核酸序列的单链DNA修复模板和M3814小分子抑制剂对细胞的外源基因位点或者内源基因位点进行基因编辑；其中，所述RAD51高亲和性核酸序列为AACTCCCCCTCCATCATTCACTGT。通过实验验证发现该方法能够显著提高细胞外源基因位点或者内源基因位点的绝对编辑效率，并且对细胞类型具有普适性，本发明对临床上基因编辑奠定了理论基础。
主权项：1.一种提高基因编辑的绝对编辑效率的方法，其特征在于，包括联合使用含RAD51高亲和性核酸序列的单链DNA修复模板和M3814小分子抑制剂对细胞的外源基因位点或者内源基因位点进行基因编辑；其中，所述RAD51高亲和性核酸序列为AACTCCCCCTCCATCATTCACTGT；所述方法包括以下步骤：利用电穿孔法将CRISPR编辑系统和所述含RAD51高亲和性核酸序列的单链DNA修复模板导入细胞进行基因编辑；待电穿孔结束后，将所述细胞置于含有所述M3814小分子抑制剂的培养基中培养40-50h，之后更换新鲜的培养基继续培养2-4天；所述M3814小分子抑制剂在所述培养基中的终浓度为2μM；所述单链DNA修复模板的序列包括如SEQIDNO：1-7所示的任一项序列；所述细胞包括HEK293T细胞和K562细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国医学科学院基础医学研究所 一种单链DNA修复模板及其联合M3814小分子抑制剂提高基因编辑效率的方法
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