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一种用于制备两碱基重复STR的等位基因分型标准物的方法 

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申请/专利权人:苏州阅微基因技术有限公司

摘要:本发明属于生物技术领域,公开了一种用于制备两碱基重复STR的等位基因分型标准物alleleladder的方法,其包括以下步骤:1根据STR基因座的重复数在重复区适当插入碱基,合成质粒;2根据STR基因座序列设计并合成引物对;3以合成质粒作为模板,使用引物对进行PCR扩增反应,得到的扩增产物即为相应的STR基因座的alleleladder中一个分型。本发明解决了两碱基重复STR由于stutter比例过大无法制作ladder的问题,能够极大地提高两碱基重复基因座分型判断的准确性。

主权项:1.一种用于制备两碱基重复STR的等位基因分型标准物的方法,其特征在于,包括以下步骤:根据STR基因座的重复数在重复区插入碱基,合成质粒;在重复区重复数超过15个重复;所述的插入碱基为两碱基重复每隔6个重复插入一个碱基;插入的碱基为重复区重复碱基拆开分别插入适当位置,保持最终重复数和片段长度不变;根据STR基因座序列设计并合成引物对;所述的引物对引物范围在重复区前后,正向引物F的5’端采用荧光素修饰,反向引物R的5'末尾添加三碱基修饰;所述荧光素为FAM、HEX、JOE、VIC、NED、TAMRA或ROX,所述三碱基为ATT;以合成质粒作为模板,使用引物对进行PCR扩增反应,得到的扩增产物即为相应的STR基因座的等位基因分型标准物中一个分型。

全文数据:

权利要求:

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