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一种检测样本中目标核酸的存在的方法 

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申请/专利权人:四川大学

摘要:本发明属于纳米孔检测领域,具体涉及一种检测样本中目标核酸的存在的方法,其包括如下步骤:S1将样本置于核酸扩增体系并进行核酸扩增,确定所述核酸扩增体系中底物核苷酸的数量,获得所述样本的核酸扩增产物;S2将所述样本的核酸扩增产物加入单通道电生理检测系统,所述单通道电生理检测系统包括:跨膜孔、绝缘膜、第一介质、第二介质,所述样本的核酸扩增产物被加入到所述第一介质;S3向所述第一介质和所述第二介质之间施加驱动力,所述样本的核酸扩增产物中剩余核苷酸穿过所述跨膜孔并产生电信号;S4对所述电信号进行量化,获得所述剩余核苷酸的数量;S5将所述剩余核苷酸的数量与所述底物核苷酸的数量进行对比,确定所述样本中所述目标核酸是否存在。本发明还提供了一种病毒快速检测试剂盒。

主权项:1.一种非诊断目的的检测样本中目标核酸的存在的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1将样本置于核酸扩增体系并进行核酸扩增,确定所述核酸扩增体系中底物核苷酸的数量,获得所述样本的核酸扩增产物;所述核酸扩增包括聚合酶链反应、链置换扩增技术和环介导等温扩增技术;S2将所述样本的核酸扩增产物加入埃米孔系统,所述埃米孔系统包括:埃米孔、绝缘膜、以及被所述绝缘膜分隔开而形成的反式隔室和顺式隔室,所述绝缘膜包括DPHPC、DOPC、E.colilipid和或高分子膜,所述高分子膜包括三嵌段共聚物高分子膜,所述埃米孔为野生型PaMscS蛋白埃米孔和或突变型PaMscS蛋白埃米孔,所述野生型PaMscS蛋白埃米孔的序列为SEQIDNO:1,所述突变型PaMscS蛋白埃米孔为所述野生型PaMscS蛋白埃米孔的以下变体中的一种或多种:180R、271I和130A;所述样本的核酸扩增产物被加入到所述顺式隔室;S3施加电压后,所述样本的核酸扩增产物中剩余核苷酸与所述埃米孔相互作用并产生电信号;S4对所述电信号进行量化,获得所述剩余核苷酸的数量;S5将所述剩余核苷酸的数量与所述底物核苷酸的数量进行对比,以从底物核苷酸的特异性消耗来确定所述样本中所述目标核酸是否存在;所述核苷酸为dNTP。

全文数据:

权利要求:

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