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摘要:本发明提供了一种基于单点校准高效液相色谱‑同位素稀释质谱法检测人尿样中尿酸含量的方法,属于医学检验技术领域。本发明将待测尿样与尿酸标记物溶液混合进行第一平衡,得到第一平衡液;将尿酸纯度标准物质溶液与尿酸标记物溶液混合进行第二平衡,得到第二平衡液;将第一平衡液与第二平衡液分别进行前处理,得到第一待测液与第二待测液;将第一待测液与第二待测液分别进行高效液相色谱‑同位素稀释质谱分析,根据所得第一待测液的色谱图与第二待测液的色谱图,通过单点法计算得到所述待测尿样中尿酸的含量。采用本发明方法能够实现尿样中尿酸高效准确测定,且重复性好,结果可靠,为进一步研制尿基体如人尿基体尿酸标准物质提供了定值方法。
主权项:1.一种基于单点校准高效液相色谱-同位素稀释质谱法检测人尿样中尿酸含量的方法,包括以下步骤:将待测尿样与尿酸标记物溶液混合进行第一平衡,得到第一平衡液;将尿酸纯度标准物质溶液与尿酸标记物溶液混合进行第二平衡,得到第二平衡液;将所述第一平衡液与第二平衡液分别进行前处理,得到第一待测液与第二待测液;将所述第一待测液与第二待测液分别进行高效液相色谱-同位素稀释质谱分析,根据所得第一待测液的色谱图与第二待测液的色谱图,通过单点法计算得到所述待测尿样中尿酸的含量;所述高效液相色谱-同位素稀释质谱分析的高效液相色谱条件包括:流动相包括流动相A和流动相B,所述流动相A为体积分数为0.1%的甲酸水溶液,所述流动相B为乙腈;梯度洗脱程序为:0~2.0min,流动相A的体积分数为97.0%;2.0~2.5min,流动相A的体积分数由97.0%匀速降低至20.0%;2.5~3.5min,流动相A的体积分数为20.0%;3.5~5.0min,流动相A的体积分数由20.0%匀速提高至97.0%。
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