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摘要:本发明提供了液相色谱串联质谱测定血清中和肽素的方法,包括:向离心管中依次加入血清、内标溶液、和肽素抗体包被的磁珠,并充分混匀;将离心管置于磁力架上,分离磁珠和液体;使用磷酸盐缓冲液清洗磁珠,向清洗后的磁珠加入甲酸水溶液,充分混匀后加入氨水溶液,形成样本;向样本中加入胰蛋白酶溶液,放在摇床上充分反应,形成酶切后的样本;对酶切后的样本进行固相萃取形成萃取后的样本;使用LC‑MSMS系统对萃取后的样本进行分析检测得到血清中和肽素的色谱图。本发明通过对血清进行免疫磁珠富集和固相萃取可以有效去除血清样品中的杂质,然后使用LC‑MSMS系统,可以直接检测血清样品的质荷比,增加检测特异性,避免复杂血液成分中的干扰,有高灵敏度、高特异度的特点。
主权项:1.液相色谱串联质谱测定血清中和肽素的方法,其特征在于,包括:步骤1:向离心管中依次加入血清、内标溶液、和肽素抗体包被的磁珠,并充分混匀;步骤2:将离心管置于磁力架上,分离磁珠和液体,弃去上清;步骤3:使用磷酸盐缓冲液清洗磁珠,并除去缓冲混合液;步骤4:向清洗后的磁珠加入甲酸水溶液,充分混匀后加入氨水溶液,形成样本;步骤5:向所述样本中加入胰蛋白酶溶液,放在摇床上充分反应,形成酶切后的样本;步骤6:对所述酶切后的样本进行固相萃取形成萃取后的样本;步骤7:使用LC-MSMS系统对所述萃取后的样本进行分析检测得到血清中和肽素的色谱图。
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百度查询: 中国医学科学院北京协和医院 液相色谱串联质谱测定血清中和肽素的方法
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