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申请/专利权人：江苏科技大学;镇江市粮食和物资储备质量监测中心(镇江市军粮供应管理中心)
摘要：本发明属于生物传感器技术领域，涉及一种同时检测AFB1和OTA的荧光探针的制备方法，包括：取0.5mLCQDs、20mgEDC和10mgNHS混合于1mL去离子水中，避光反应30min后得到羧基活化的CQDs，加入500μL浓度为1μM的Probe1Probe2，置于4℃摇床孵育过夜；将偶联完成的荧光探针用超滤管以8000rpm的转速离心5min以除去未偶联的Probe1Probe2，所制备的CQDs‑Probe于4℃保存。本发明还公开了将所制得的探针的应用。本发明以碳量子点修饰DNARNA链构建的荧光探针被Cas蛋白反式切割稳定性强；操作检测时间较短，没有干扰和交叉反应，背景信号低，适用于高灵敏快速检测分析。该方法使用荧光光谱仪进行荧光信号检测，对AFB1的检测限为3.1pg·mL‑1，对OTA的检测限为3.5pg·mL‑1。本发明所公开的方法能够应用于测定实际阳性样本中的AFB1和OTA含量。
主权项：1.一种同时检测AFB1和OTA的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取0.5mLCQDs、20mgEDC和10mgNHS混合于1mL去离子水中，避光反应30min后得到羧基活化的CQDs，加入500μL浓度为1μM的Probe1Probe2，置于4℃摇床孵育过夜；将偶联完成的荧光探针用超滤管以8000rpm的转速离心5min以除去未偶联的Probe1Probe2，所制备的CQDs-Probe于4℃保存；其中，所述CQDs，其制备方法包括：将抗坏血酸溶于乙醇和去离子水的离心管中，剧烈搅拌形成均一溶液，密封在高温高压高压釜中，140~180℃水热反应50~70min，自然冷却至室温，先用0.22μm的滤膜过滤，再以12000rpm的转速离心10min，即可得到双发射碳量子点CQDs，其中，抗坏血酸、乙醇和去离子水的反应物料比为0.5~1g:12~15mL:6~8mL。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏科技大学 镇江市粮食和物资储备质量监测中心(镇江市军粮供应管理中心) 一种同时检测AFB1和OTA的荧光探针的制备方法及其应用
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