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申请/专利权人:兰州大学
摘要:本发明公开了一种燕麦叶片和茎部原生质体的提取方法,该方法包括以下步骤:取新鲜燕麦叶片和茎部,将叶片纵切成细丝,置于叶片酶解液中,将茎部纵切后横切,置于茎部酶解液中;各酶解液均置于细胞培养板的孔中;将细胞培养板用锡箔纸包裹后,置于‑0.8MPa真空环境处理30min,取出后在室温、避光下摇动,酶解4小时以分离原生质体;在酶解液中加入等体积的W5solution,轻轻摇晃以释放原生质体,将含有原生质体的溶液进行过滤,将滤液在室温下以100g离心2min;除去上清液,用W5solution重悬清洗,室温下以100g离心2min,除去上清液,用W5solution重悬,得到燕麦叶片和茎部原生质体。本发明可以高效、稳定、快速地从组织分离出燕麦叶片和茎部原生质体。
主权项:1.一种燕麦叶片和茎部原生质体的提取方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:1取新鲜燕麦叶片和茎部,将叶片纵切成细丝,置于叶片酶解液中,将茎部纵切后横切,置于茎部酶解液中;各酶解液均置于细胞培养板的孔中;2将细胞培养板用锡箔纸包裹后,置于-0.8MPa真空环境处理30min,取出后在室温、避光下摇动,酶解4小时以分离原生质体;3在酶解液中加入等体积的W5solution,轻轻摇晃以释放原生质体,将含有原生质体的溶液进行过滤,将滤液在室温下以100g离心2min;4除去上清液,用W5solution重悬清洗,室温下以100g离心2min,除去上清液,用W5solution重悬,得到燕麦叶片和茎部原生质体。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 兰州大学 一种燕麦叶片和茎部原生质体的提取方法
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