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一种肿瘤类器官与自体外周血单个核细胞共培养模型及其构建方法与应用 

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申请/专利权人:零壹人工智能科技研究院(南京)有限公司

摘要:本发明提供了一种肿瘤类器官与自体外周血单个核细胞共培养模型及其构建方法与应用,属于肿瘤类器官模型构建技术领域。本发明将肿瘤患者自体PBMC与肿瘤类器官进行共培养获得的模型,更接近患者体内肿瘤微环境。本发明采用两次共刺激的方式,能够刺激T细胞增殖,激活T细胞,复现肿瘤患者体内抗原刺激T细胞活化、增殖、分化的过程。本发明方法能够有效地构建高度肿瘤细胞异质性以及免疫微环境异质性的3D模型,能够用于针对癌症病人抗肿瘤免疫药物的筛选,以及能够用于免疫治疗疗效评估且能够提供真实、有效的数据,为免疫治疗做出助力。

主权项:1.一种肿瘤类器官与自体外周血单个核细胞共培养模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:将肿瘤类器官与IFN-γ混合孵育,得IFN-γ处理过的肿瘤类器官;将IFN-γ处理过的肿瘤类器官消化成单个类器官细胞,用培养液重悬,得单个类器官细胞悬液1;将单个类器官细胞悬液1与第二次共刺激混合液混合,得共培养混合细胞悬液;将共培养混合细胞悬液置于经anti-CD3包被的容器中,得肿瘤类器官与自体外周血单个核细胞共培养模型;所述培养液由T细胞培养基和10%体积分数基质胶组成;所述T细胞培养基由RPMI-1640培养基、10%体积分数人AB血清、1%体积分数青霉素和链霉素、100-500IUmLIL-2和1-50μgmLanti-CD28组成;所述第二次共刺激混合液的制备方法为:将所述单个类器官细胞用T细胞培养基重悬,得单个类器官细胞悬液2;将自体外周血单个核细胞用T细胞培养基培养,得培养后外周血单个核细胞悬液;将培养后外周血单个核细胞悬液和单个类器官细胞悬液2混合,得第一次混合细胞悬液;将第一次混合细胞悬液置于经anti-CD3包被的容器中培养,得第一次共刺激混合液;将第一次共刺激混合液和单个类器官细胞悬液2混合,得第二次混合细胞悬液;将第二次混合细胞悬液置于经anti-CD3包被的容器中培养,得第二次共刺激混合液。

全文数据:

权利要求:

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