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一种结核分枝杆菌高效率核酸提取方法 

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申请/专利权人:上海康黎诊断技术有限公司

摘要:本发明提供了一种结核分枝杆菌高效率核酸提取方法,具体步骤为在样本离心后加入专有的液化超声液对样本进行液化超声,然后经过离心去上清并加裂解液重悬样本,经过磁珠法提取后获得纯净结核分枝杆菌核酸。该液化超声液包括愈甘醚、NaOH和裂解液,其中裂解液包括异硫氰酸胍、TritonX‑100、乙二胺四乙酸二钠、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、L‑二硫苏糖醇、异丙醇。与其他方法相比,通过本发明处理的结核类样本,能够显著提升结核分枝杆菌检出的阳性率,显著提升所提取结核分枝杆菌的核酸浓度,为后继试验提供更多和更高质量的核酸。

主权项:1.一种结核分枝杆菌高效率核酸提取方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、将待测样本移入离心管中,置于离心机中高速离心,结束后去除上清液,获得分离样本;S2、向所述分离样本中加入超声液,然后进行液化超声;S3、液化超声结束后,将样本置于离心机中再次高速离心,结束后去除上清液,加入超声液吹打重悬样本,然后全部转入核酸提取试剂盒的孔板;S4、样本经裂解、洗涤、洗脱后获得核酸提取液;所述超声液包括如下重量份的组分:1.8-2.2%NaOH,280-320mM愈甘醚,前两种组分混合后,用稀释3倍裂解液定容至所需要的体积;所述裂解液由如下组分组成:2.7-3.0uM异硫氰酸胍,1.5-2.5%TritonX-100,0.01-0.02uM乙二胺四乙酸二钠,30-35uM三羟甲基氨基甲烷盐酸盐,0.05-0.06uML-二硫苏糖醇,30-35%异丙醇。

全文数据:

权利要求:

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