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申请/专利权人：中日友好医院(中日友好临床医学研究所)
摘要：本发明提供了一种基于酪胺信号放大技术的足细胞免疫荧光染色方法及其应用，涉及组织荧光染色技术领域。本发明的免疫荧光染色方法包括如下步骤：对肾组织石蜡切片进行脱蜡、水化后，使用高压热修复处理组织切片后室温冷却，分别进行过氧化氢和山羊血清封闭；依次用一抗、带有辣根过氧化酶二抗、带有荧光素标记的酪胺分子孵育封闭处理后的切片，封片保存。本发明利用酪胺信号放大的组织荧光染色切片可于受激发射损耗显微镜拍摄和成像，对足细胞的亚细胞结构形态学参数进行评估，可以实现对足细胞解剖学特征的信号均一的免疫染色和荧光信号放大。在不同疾病状态下，还能显示足细胞三级解剖学结构的变化，为足细胞三维形态学研究提供了新的技术手段。
主权项：1.一种基于酪胺信号放大技术的足细胞免疫荧光染色方法，其特征在于，包括如下步骤：对肾组织石蜡切片进行脱蜡、水化后，使用高压热修复处理组织切片5~15min后室温冷却，分别进行过氧化氢和山羊血清封闭；依次用一抗、酶标二抗、荧光素酪胺孵育封闭处理后的切片，封片保存；所述荧光素酪胺使用量为每样本滴加50μL，室温孵育50s~70s；将所述免疫荧光染色后的切片置于STED显微成像设备下观察足细胞整体形态；所述足细胞的形态学参数包括初级突起长度、初级突起宽度、终末足突长度、初级突起宽度和足细胞的胞体面积；所述荧光素酪胺为霓虹DendronFluor®NEON520荧光染料。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中日友好医院(中日友好临床医学研究所) 一种基于酪胺信号放大技术的足细胞免疫荧光染色方法及其应用
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