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申请/专利权人：华亘科技(云南)有限公司

摘要：本发明公开了一种酶解卵白蛋白的制备方法，属于酶解卵白蛋白生产技术领域，该酶解卵白蛋白由以下重量份的原料组成：鸟氨酸0.21‑0.51份、赖氨酸1.50‑6.00份、组氨酸0.80‑1.80份、精氨酸2.25‑5.50份、苏氨酸0.80‑3.80份、丝氨酸1.50‑6.00份、谷氨酸1.41‑8.24份、脯氨酸1.00‑2.58份、甘氨酸0.30‑2.98份、丙氨酸1.86‑5.17份，余量为水，本发明能够使酶解过程更加可控，同时可回收固定化酶，也可反复多次的使用，从而降低了制备成本的投入，且能够简便固定化酶的回收，不仅省时省力，还保障了酶解卵白蛋白的生产效率。

主权项：1.一种酶解卵白蛋白的制备方法，其特征在于，该酶解卵白蛋白由以下重量份的原料组成：鸟氨酸0.21-0.51份、赖氨酸1.50-6.00份、组氨酸0.80-1.80份、精氨酸2.25-5.50份、苏氨酸0.80-3.80份、丝氨酸1.50-6.00份、谷氨酸1.41-8.24份、脯氨酸1.00-2.58份、甘氨酸0.30-2.98份、丙氨酸1.86-5.17份、胱氨酸2.20-5.20份、缬氨酸3.32-8.03份、亮氨酸4.34-8.03份、异亮氨酸1.17-3.86份、酪氨酸0.41-1.44份、苯丙氨酸2.25-7.33份、天冬氨酸1.03-2.44份和蛋氨酸2.49-8.40份，余量为水；该酶解卵白蛋白的制备方法具体步骤如下：步骤一：获取卵白：浸泡收集到的鸡蛋，直至鸡蛋外表面上的杂物与鸡蛋分离，再将鸡蛋捞出，并用清水冲洗，再利用消毒水进行消毒，并在4-6℃的无菌条件下破碎鸡蛋，再将蛋清与蛋黄分离，保留蛋清，最后采用巴氏杀菌法处理蛋清，并冷却至4℃，即得卵白；步骤二：制备固定化酶：将木瓜蛋白酶和胰蛋白酶混合，形成混合酶，再制备混合酶载体，并将混合酶载体与混合酶进行共价连接，即得固定化酶；所述制备混合酶载体的具体操作为：S1、将多壁碳纳米管、纳米二氧化钛和四氧化三铁粉末依次放入研磨设备中研磨搅拌，使得上述原料充分混合，即得混合料粉，并干燥混合料粉，再将混合料粉分散于聚乙二醇水溶液中，再滴加乙烯基三乙氧基硅烷，并利用搅拌设备进行搅拌处理，最后加入正硅酸四甲酯溶液进行混合，混合完成后，即得混合液；S2、混合液体石蜡和三氯甲烷，混合完成后再加入乳化剂持续搅拌，此过程中温度始终维持于60℃，再在乳化剂搅拌的同时加入混合液，并再次搅拌0.5h，冷却至室温后放入离心机中离心，形成上清液和预载体；S3、去除步骤S2中的上清液，保留预载体，再用乙酸乙酯清洗预载体，最后使用清水洗涤，即得混合酶载体；步骤三：酶解：称取步骤一中的卵白，并加水搅拌成乳状，再调节合适的PH值和温度，形成反应底物，再将步骤二中的固定化酶放入反应底物中进行水解反应，反应时间为6-8h，反应完成后，即得酶解溶液；所述合适的PH值和温度分别为6-8和36-40℃；步骤四：回收固定化酶：对电磁铁通电，并将电磁铁放入酶解溶液中搅拌，使得电磁铁吸附酶解溶液中的固定化酶，再取出电磁铁，并对电磁铁断电，使得吸附于电磁铁上的固定化酶脱落，重复上述过程，直至没有固定化酶吸附，即完成固定化酶的回收；所述电磁铁的磁场强度为0.4-0.6T；步骤五：离心筛分：将经过步骤四的酶解溶液加热至90-95℃，并保温20-30min，再冷却至室温，使得酶解溶液中残留的混合酶钝化，再将酶解溶液放入离心机中离心分离，形成上清液和残渣，去除残渣保留上清液，即为酶解卵白蛋白液；步骤六：后处理：对酶解卵白蛋白液进行灭菌、浓缩和干燥，即得酶解卵白蛋白。

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