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一种靶向肺部且高表达NKG2D的NK细胞的培养试剂盒及其应用 

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申请/专利权人:深圳泽医细胞治疗集团有限公司

摘要:本发明公开了一种靶向肺部且高表达NKG2D的NK细胞的培养试剂盒及其应用,所述试剂盒包括活化培养基;所述活化培养基为包含以下至少一种的基础培养基:白细胞介素、干细胞因子、干扰素、BMP信号通路激活剂、维生素、糖皮质激素、酪氨酸激酶抑制剂、白细胞介素受体激动剂、TLR激动剂、自体血浆。本发明提供的试剂盒能够培养出一群靶向肺部且高表达NKG2D受体的NK细胞,可以用于解决现有技术中NK细胞体外扩增中存在的NK细胞组织靶向性弱、NKG2D受体表达低导致靶向性杀伤活性较差的问题。

主权项:1.一种靶向肺部且高表达NKG2D的NK细胞的培养试剂盒,其特征在于,包括活化培养基;所述活化培养基为以下组分组成的基础培养基:白细胞介素、干细胞因子、干扰素、BMP信号通路激活剂、维生素、糖皮质激素、酪氨酸激酶抑制剂、白细胞介素受体激动剂、TLR激动剂、自体血浆;所述活化培养基中的白细胞介素由IL-2、IL-7、IL-15、IL-18、IL-21组成;所述白细胞介素在活化培养基中的终浓度为500UmLIL-2、4000~11000UmLIL-7、20ngmLIL-15、20ngmLIL-18和20ngmLIL-21;所述干细胞因子在活化培养基中的终浓度为20UmL;所述干扰素为终浓度50pgmL的干扰素-α;所述BMP信号通路激活剂为终浓度25μM的芹菜素;所述维生素为终浓度20μgmL的L-抗坏血酸;所述糖皮质激素为终浓度5μM的氢化可的松;所述酪氨酸激酶抑制剂为终浓度0.1nM的尼洛替尼;所述白细胞介素受体激动剂为终浓度0.1nM的SOT101中;所述TLR激动剂为终浓度5~15nM的TLR7agonist3、终浓度5~15nM的TLR8agonist5和终浓度5~15nM的ODNM1018;所述自体血浆在活化培养基中的终浓度为4~12vv%;所述试剂盒还包括包被液,所述包被液为以下组分组成的溶液:NCR抗体、CD52抗体、CD137抗体;所述包被液的NCR抗体由NKp30抗体、NKp44抗体、NKp46抗体组成;所述NCR抗体在包被液中的终浓度为NKp30抗体5~15μgmL、NKp44抗体5~15μgmL、NKp46抗体5~15μgmL;所述CD52抗体在包被液中的终浓度为10μgmL;所述CD137抗体在包被液中的终浓度为10μgmL。

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