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申请/专利权人：河北万邦复临药业有限公司

摘要：本发明属于中药技术领域，具体涉及一种乳香HPLC高质量指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱。所述构建方法包括以下步骤：1供试品溶液制备：取乳香药粉，加入有机溶剂中，加热的同时超声提取30‑90min，再称定重量，用同样的有机溶剂补足减失重量，滤过，取得滤液，即得所述供试品溶液；2进样洗脱：采用色谱柱AgilentZORBAXEclipsePlusC1，柱温：40～55℃；进样量：5‑15μL；流速：0.5‑2.0mLmin，流动相A为乙腈，流动相B为纯化水，梯度洗脱；3重复：重复步骤1～25～20批次，得到5～20批乳香色谱图；4对照色谱图的建立；5生成高质量指纹图谱，相比现有的指纹图谱，分离效果好，保留时间适中、峰形及基线稳定，能够快速准确的鉴定乳香药材。

主权项：1.一种乳香HPLC高质量指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1）供试品溶液制备：取乳香药粉，加入有机溶剂中，加热的同时超声提取30-90min，再称定重量，用同样的有机溶剂补足减失重量，滤过，取得滤液，即得所述供试品溶液；2）进样洗脱：采用色谱柱AgilentZORBAXEclipsePlusC18，柱温：40～55℃；进样量：5～15μL；流速：0.5～2.0mLmin，流动相A为乙腈，流动相B为纯化水，梯度洗脱；3）重复：重复步骤1）～2）5～20批次，得到5～20批乳香色谱图；4）对照色谱图的建立：将步骤3）生成的多张乳香色谱图导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件进行数据处理，通过峰匹配，计算相似度生成叠加图谱，以中位数法生成对照色谱图；5）生成高质量指纹图谱：根据各批次样品中各成分相对保留时间的一致性，从中选择了5～20个共有峰作为指纹图谱的特征峰，得到所述乳香HPLC高质量指纹图谱；所述选择的共有峰的相似度结果均大于0.90，相对保留时间RSD值均小于5.0%；所述步骤1）中的提取溶剂为甲醇溶液或乙醇溶液；所述步骤2）中的梯度洗脱包括以下步骤：0～25min，所述流动相A的体积百分比由55变化至81，所述流动相B的体积百分比由45变化至19；25～53min，所述流动相A的体积百分比由81变化至95，所述流动相B的体积百分比由19变化至5；53～68min，所述流动相A的体积百分比保持为95，所述流动相B的体积百分比保持为5；68～73min，所述流动相A的体积百分比由95变化至55，所述流动相B的体积百分比由5变化至45；73～88min，所述流动相A的体积百分比保持为55，所述流动相B的体积百分比保持为45。

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