龙图腾网&IPTOP
- 微信扫码登录
- 账号密码登录
- 短信登录/注册
买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！
申请/专利权人：温达生物科技(苏州)有限公司
摘要：一种基于CRISPRCas9基因编辑构建斑马鱼高尿酸模型的方法，包括：将pCS2‑Cas9质粒用XbaⅠ酶切线性化，并将酶切产物纯化并体外转录为Cas9mRNA，‑80℃保存；使用CHOPCHOP在线网站选择uov基因候选Cas9靶位点，合成上游引物和下游引物，并用PCR扩增获得sgRNA体外转录模板，最后体外转录合成sgRNA，‑80℃保存；将Cas9mRNA和sgRNA混合均匀并放置于冰上得到混合液，然后收集斑马鱼受精卵并注射1nl所述混合液，得到注射组斑马鱼胚胎；对注射组斑马鱼胚胎和对照组斑马鱼胚胎进行培养，得到斑马鱼成鱼；最后获得稳定遗传的斑马鱼纯合系。本发明能提供一种构建斑马鱼高尿酸模型的方法，该方法快速有效、成本低廉，产量高，喂养空间小、遗传性状稳定，适于推广应用。
主权项：1.一种基于CRISPRCas9基因编辑构建斑马鱼高尿酸模型的方法，其特征在于：包括下列步骤：步骤1：将pCS2-Cas9质粒用XbaⅠ酶切线性化，并将酶切产物纯化并体外转录为Cas9mRNA，-80℃保存；步骤2：使用CHOPCHOP在线网站选择uov基因候选Cas9靶位点，合成上游引物和下游引物，并用PCR扩增获得sgRNA体外转录模板，最后体外转录合成sgRNA，-80℃保存；步骤3：将Cas9mRNA和sgRNA混合均匀并放置于冰上得到混合液，然后收集斑马鱼受精卵并注射1nl所述混合液，得到注射组斑马鱼胚胎；对注射组斑马鱼胚胎和对照组斑马鱼胚胎进行培养，得到斑马鱼成鱼；步骤4：对斑马鱼成鱼进行剪尾鉴定，筛选突变体F0代；步骤5：将突变体F0代与野生型斑马鱼杂交获得杂合F1代；步骤6：将杂合F1代自交，筛选得到纯合系斑马鱼F2；步骤7：将纯合系斑马鱼F2培养至3个月成鱼，即得斑马鱼高尿酸模型。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 温达生物科技(苏州)有限公司 一种基于CRISPR/Cas9基因编辑构建斑马鱼高尿酸模型的方法
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
主营中国专利交易买卖与专利转让许可,高校科技成果推广与科技成果转化,知识产权运营管理与平台开发,科技人才专家库与科技猎头等科技服务
开放平台
担保交易
惠及多方
会员特惠
专属平台
适合多方
数据共享
功能齐全
皖公网安备 34010402703815号