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一种生产L-苏氨酸的基因工程菌及其制备方法和发酵工艺 

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申请/专利权人:哈尔滨象柏生物科技有限公司

摘要:一种生产L‑苏氨酸的基因工程菌及其制备方法和发酵工艺,属于基因工程技术领域。本发明为解决现有技术中发酵合成L‑苏氨酸的菌种对碳的消耗较大,转化率较低,副产物积累的技术问题,提供一种生产L‑苏氨酸的基因工程菌的制备方法,通过对大肠埃希氏菌ACThr1032进行ptsI、pyk、pck和ackA基因的敲除,glk、galp、xfpk和ppc基因的引入,获得基因工程菌XY‑Ta33,并提供一种利用上述工程菌生产L‑苏氨酸的发酵工艺。本发明提供的基因工程菌XY‑Ta33及发酵工艺,在提高L‑苏氨酸产量和糖酸转化率的同时,降低了副产物乙酸的产生,提高了发酵生产的效率,适用于大规模工业化生产L‑苏氨酸。

主权项:1.一种生产L-苏氨酸的基因工程菌的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:S1:将载体转入出发菌株的感受态细胞中,并制成电转感受态细胞,获得待改造菌株;S2:利用基因组编辑工具载体pGRB,对S1中获得的待改造菌株进行glk基因和galp基因的插入,同时敲除ptsI基因,获得基因工程菌XY-Ta36;S3:利用基因组编辑工具载体pGRB,对S2中获得的基因工程菌XY-Ta36进行pykA和pykF基因的敲除,获得基因工程菌XY-Ta38;S4:利用基因组编辑工具载体pGRB,对S3中获得的基因工程菌XY-Ta38进行xfpk基因的插入,获得基因工程菌XY-Ta40;S5:利用基因组编辑工具载体pGRB,对S4中获得的基因工程菌XY-Ta40进行ppc基因的插入,以及Pck基因的敲除,获得基因工程菌XY-Ta57;S6:利用基因组编辑工具载体pGRB,对S5中获得的基因工程菌XY-Ta57进行ackA基因的敲除,获得基因工程菌XY-Ta33。

全文数据:

权利要求:

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