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申请/专利权人：西北农林科技大学
摘要：本发明提供了一种元宝枫种胚获得无菌苗和无菌苗带芽茎段直接诱导腋芽的方法，包括外植体的消毒、萌发培养、继代培养、腋芽诱导培养。本发明具有外植体污染率低、繁殖速度快、培育周期短的优点，不仅为快速繁殖优良无菌苗提供了一条途径，也为工厂化育苗及遗传转化体系建立提供了可能。
主权项：1.一种诱导元宝枫带芽茎段快速增殖的方法，其特征在于：将消毒完毕的元宝枫种子置于无菌滤纸上吸干水分后，用手术刀和镊子小心的挑开内种皮，并分离合子胚的胚轴和子叶，将合子胚的胚轴接入培养基中进行萌发培养；培养基为MS+0.5-2.0mgLGA3+蔗糖30gL+PVP0.75mgL+琼脂7gL；或培养基为MS+0.5-2.0mgL2,4-D+蔗糖30gL+PVP0.75mgL+琼脂7gL；pH调至5.5-5.8；暗处理3d后转至光照条件下培养28-35天，得到元宝枫无菌苗；将得到的元宝枫无菌苗置于超净工作台中，剪去叶片，留下1cm长叶柄；将其切成至少带一个腋芽、长1-3cm的带芽茎段；将带单芽的元宝枫茎段接种到MS+3mgL6-BA+0.1mgLIBA+蔗糖30gL+PVP0.75mgL+琼脂7gL，pH调至5.5-5.8的培养基中进行腋芽诱导培养；暗培养后转到光照条件下进行培养；所述暗处理3d后转至光照条件下培养28-35天；培养温度为28±1℃，光照培养强度为2100-2200lx，光照培养时间12-15hd；元宝枫种子外植体消毒包括如下步骤：（1）外植体选择：饱满、无病虫害的元宝枫种子；（2）外植体处理：将采集的元宝枫种子置于4℃冰箱冷藏，1d后取出；加入适量洗衣粉，将其置于自来水下冲洗20-50min后将外种皮剥去，继续冲洗1h，最后用无菌水清洗3-5次；（3）外植体消毒：将用无菌水洗净后的外植体置于超净工作台中，使外植体浸泡在体积浓度为70%的酒精溶液中30s-60s，用无菌水冲洗3次；再将元宝枫种子置于体积浓度为0.1%的升汞溶液中，控制浸泡时间为3-10min，用无菌水反复清洗5-8次；最后将其置于无菌滤纸上，以吸收种子表面多余的水分。
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百度查询： 西北农林科技大学 一种获得元宝枫无菌苗及直接诱导无菌芽的方法
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