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摘要:本发明提供了一种用于非小细胞肺癌CYFRA21‑1检测的电致化学发光免疫传感器,以AuNPs为传感界面、CS@La‑TCPPAuAb2为信号探针,经过Ab1、Ab2和CYFRA21‑1的特异性结合,成功构建了ECL免疫传感器。与传统的CYFRA21‑1检测方法相比,本发明的优点在于灵敏度高,特异性强,检测迅速,操作方便,设备材料价格低廉,无污染,从而为CYFRA21‑1的检测提供了新的分析方法。
主权项:1.一种用于CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器,其特征在于,用于CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器的构建方法为:将用食人鱼洗液浸泡后经Al2O3粉末抛光呈镜面的玻碳电极在0.5MH2SO4中进行电化学活化,然后用超纯水冲洗,干燥得到干燥的玻碳电极;将干燥的玻碳电极浸入1%HAuCl4溶液沉积30-35S,室温干燥后滴加抗体Ab1溶液,4-5℃孵育10-12h,然后滴加1%牛血清蛋白BSA溶液,4-5℃孵育0.5-1h,再滴加目标物CYFRA21-1溶液,4-5℃孵育1-1.5h,最后滴加信号探针CS@La-TCPPAuNPsAb2溶液,4-5℃孵育1.5-2h,即得到用于CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器;所述CYFRA21-1为细胞角蛋白片段抗原21-1;所述信号探针CS@La-TCPPAuNPsAb2溶液的制备步骤为:向CS@LaTCPPAuNPs分散液中加入抗体Ab2溶液,冰浴搅拌10-12h,离心和沉淀物水洗,将沉淀物重新分散于超纯水中,即得到CS@La-TCPPAuNPsAb2的信号探针溶液;所述CS@LaTCPPAuNPs分散液的制备步骤为:将AuNPs加入到CS@La-TCPP分散液中,在常温下搅拌7-8h,离心和沉淀物洗涤,再将沉淀物分散在超纯水中,即得到CS@La-TCPPAuNPs分散液;所述CS@La-TCPP分散液的制备步骤为:壳聚糖CS溶于0.1wt%冰醋酸溶液中,分散均匀,取La-TCPP分散在超纯水中,加入CS溶液,磁力搅拌10-12h得到分散均匀的CS@La-TCPP溶液;离心和沉淀物用超纯水洗涤后,再将沉淀物分散于超纯水中,得到CS@La-TCPP分散液;所述La-TCPP的制备步骤为:将LaNO33·6H2O、TCPP分别溶于N,N-二甲基甲酰胺溶液中,分别室温超声10-12min,然后,在硅油浴中将TCPP溶液加热到100-130℃,再加入LaNO33·6H2O溶液,在连续磁力搅拌下,将混合物在100-130℃条件下反应5-6h,冷却至室温后离心和沉淀用纯水洗涤三次,烘箱50-60℃干燥,得到黑色的La-TCPP。
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百度查询: 重庆医科大学 用于非小细胞肺癌CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器及检测方法
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