申请/专利权人：扬州大学附属医院(扬州市第一人民医院)

申请日：2023-10-07

公开（公告）日：2024-05-24

公开（公告）号：CN117347347B

主分类号：G01N21/65

分类号：G01N21/65;C12Q1/682

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.24#授权;2024.01.23#实质审查的生效;2024.01.05#公开

摘要：本发明属于生物标志物分析检测领域，具体涉及一种用于检测喉癌标志物CYFRA21‑1的检测试剂及其应用。该检测试剂包括SERS探针、捕获探针和多肽‑DNA偶联探针；SERS探针的制备方法包括：将4‑MBA标记金纳米双锥修饰上活化后的hpDNA1得到SERS探针；捕获探针的制备方法包括：将活化后的MBs表面修饰上活化的hpDNA2得到捕获探针；多肽‑DNA偶联探针的制备方法包括：将DNA1和DNA2分别修饰到Ab1和Ab2表面得到多肽‑DNA偶联探针。基于该检测试剂的检测方法相比现有的蛋白类标志物检测技术，具有更低的检出限，其中CYFRA21‑1的检出限低至0.76pgmL。

主权项：1.用于检测喉癌标志物CYFRA21-1的检测试剂，其特征在于，包括SERS探针、捕获探针和多肽-DNA偶联探针；SERS探针的制备方法包括：将4-MBA标记金纳米双锥修饰上活化后的hpDNA1得到SERS探针；捕获探针的制备方法包括：将活化后的MBs表面修饰上活化的hpDNA2得到捕获探针；多肽-DNA偶联探针的制备方法包括：将Ab1和Ab2溶液与N-马来酰亚胺甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯的磷酸缓冲盐溶液反应得混合液a；硫代寡链核苷酸DNA1和DNA2与二硫苏糖醇在磷酸缓冲盐溶液中孵育得混合液b；将混合液a和混合液b纯化得多肽-DNA偶联探针；SERS探针的制备方法包括：将GNBPs溶液和4-MBA溶液孵育，离心和纯化得4-MBA修饰GNBPs溶液；将hpDNA1溶液使用三2-羧乙基膦缓冲液活化得活化hpDNA1溶液；将4-MBA修饰GNBPs溶液和活化hpDNA1溶液混合孵育，纯化得SERS探针；捕获探针的制备方法包括：将MBs溶液、1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺溶液和N-羟基琥珀酰亚胺溶液混合孵育得到MBs表面活化溶液；将活化hpDNA2溶液与MBs表面活化溶液混合孵育，分离，洗涤得捕获探针。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 扬州大学附属医院(扬州市第一人民医院) 一种用于检测喉癌标志物CYFRA21-1的检测试剂及其应用

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