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用于非小细胞肺癌CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器及检测方法 

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申请/专利权人:重庆医科大学

摘要:本发明提供了一种用于非小细胞肺癌CYFRA21‑1检测的电化学免疫传感器,将PCN222FeAuNPs用于构建免疫传感器来检测CYFRA21‑1,显示出较强的信号放大作用。本发明生物传感器以MB为电活性物质,以KBPEI‑AuNPs为传感界面,一方面增加了电极的导电性,另一方面能固载更多的捕获探针,与信号探针通过Ab1‑Ag‑Ab2特异性结合构建三明治夹心型传感器,通过类芬顿反应破坏MB,实现对CYFRA21‑1的高灵敏检测。本发明检测方法具有线性范围宽、特异性强、分析时间短,稳定性和重现性好等优点,适合大面积推广应用。

主权项:1.一种用于CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器,其特征在于,构建用于CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器的方法为:将MBPEI溶液滴加到清洁的玻碳电极表面上,室温干燥后再将KBPEI-AuNPs分散液滴加到电极表面,室温干燥,将Ab1滴加在电极上,4-5℃冰箱过夜孵育12-13h;用DEPC水冲洗干净后滴加1%牛血清蛋白BSA溶液4-5℃孵育40-45min;最后将获得的电极用DEPC水冲洗干净后,滴加PCN222FeAuNPsAb2信号探针溶液于室温孵育1-2h,即得到用于CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器;PCN222FeAuNPsAb2信号探针溶液的制备方法为:向PCN222FeAuNPs分散液中加入的CYFRA21-1的多克隆抗体Ab2,冰浴搅拌12-13h形成复合物,离心和洗涤后将复合物重新溶解在PBS溶液中,形成PCN222FeAuNPsAb2信号探针溶液;PCN222FeAuNPs分散液的制备方法为:PCN222Fe溶解于超纯水中,超声至分散均匀,加入AuNPs,置于搅拌器上常温搅拌4-5h,离心、洗涤,再将沉淀物分散在超纯水中,得到PCN222FeAuNPs分散液;PCN222Fe的制备方法为:DMF中加入氯化锆、冰醋酸和H2O,再加入Fe-TCPP,室温下保持磁力搅拌10-12分钟,将得到的溶液转移到反应釜中,然后在120-130℃下反应18-20小时;然后在10000-12000转分的条件下离心10-12分钟,然后用乙醇洗涤,60℃烘箱中干燥,得到棕色的粉末为PCN222Fe;KBPEI-AuNPs的基底材料分散液的制备方法为:将AuNPs溶液加入到KBPEI分散液中,然后在室温下搅拌4-5h,离心、洗涤,再将沉淀物分散在超纯水中,得到KBPEI-AuNPs的基底材料分散液;KBPEI溶液的制备方法为:将KB加入超纯水中,超声溶解后加入1%的PEI溶液,磁力搅拌4-5h后,用超纯水离心、洗涤两次后,得到分散均匀的KBPEI溶液。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 重庆医科大学 用于非小细胞肺癌CYFRA21-1检测的电化学免疫传感器及检测方法

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