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申请/专利权人：华南农业大学;广东温氏大华农生物科技有限公司;肇庆大华农生物药品有限公司;岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

摘要：本申请属于生物制药技术领域，公开了一种MD疫苗的制备方法，该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞，随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存，其中冻存时使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃min的速率将苗温降至‑40℃；再以8～12℃min的速率将苗温降至‑100℃，移入液氮保存，本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法，该方法具有制备速度快，疫苗数量大等优点，更加适合MD疫苗的大规模制备，此外，本申请还公开了一种MD疫苗。

主权项：1.一种MD疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；步骤2：将病毒毒株接种至步骤1制得的鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞；步骤3：将步骤2收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存；步骤3中，使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃min的速率将苗温降至-40℃；再以8～12℃min的速率将苗温降至-100℃，移入液氮保存；步骤2中，使用第二细胞培养液对接种病毒毒株的鸡胚成纤维细胞进行培养，所述第二细胞培养液包括M-199培养液和缓冲液且M-199培养液和缓冲液的质量比为100：3～4；所述缓冲液含有质量分数为1.8～2.2％的Hepes、质量分数为1.3～1.5％的NaHCO3。

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权利要求：

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