申请/专利权人：江苏汇先医药技术有限公司

申请日：2024-04-24

公开（公告）日：2024-07-05

公开（公告）号：CN118291384A

主分类号：C12N5/09

分类号：C12N5/09;C12N5/079;G01N33/569;G01N33/574;G01N33/68;G01N21/64

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开

摘要：本发明涉及神经母细胞瘤捕获技术领域，公开了一种神经母细胞瘤捕获方法，包括以下步骤：S1芯片预处理：1在金属筛网芯片上镀金，确保芯片孔径大小均一，镀金均匀；2将芯片置于无水乙醇中浸泡；3准备烧杯，并在烧杯中依次加入去离子水，氨水和双氧水，并放入油浴锅加热，然后将芯片置于烧杯中加热；4加热完成后，清洗芯片；5对芯片进行干燥，并保存备用。本发明能够在神经母细胞患者血液中实现对神经母细胞的检测，为神经母细胞患者提供一种低侵入、低成本、低风险、高准确率的检测手段，可以有效捕获肿瘤患者血液中的肿瘤细胞。

主权项：1.一种神经母细胞瘤捕获方法，其特征在于，包括以下步骤：S1芯片预处理：1在金属筛网芯片上镀金，确保芯片孔径大小均一，镀金均匀；2将芯片置于无水乙醇中浸泡；3准备烧杯，并在烧杯中依次加入去离子水，氨水和双氧水，并放入油浴锅加热，然后将芯片置于烧杯中加热；4加热完成后，清洗芯片；5对芯片进行干燥，并保存备用；S2高分子包被芯片：1取巯基化透明质酸钠HA-SH加入EP管中，随后向EP管内加入筛网，通过振荡器共混孵育；2孵育完成后，吸去巯基化透明质酸钠，加入PBS进行洗涤，取出芯片自然风干；3将芯片取出置于洁净的孔板中，在芯片上加入EDC和Sulfo-NHS溶液，避光孵育；4孵育完成后，加入PBS对芯片进行洗涤，取出芯片自然风干；5将风干芯片置于新的孔板中，并在芯片上加入含GD2抗体的MES缓冲液，孵育；6孵育完成后加入PBS对芯片进行洗涤；7BSA溶液，孵育；8孵育完成后加入PBS对芯片进行洗涤；9将芯片置于PBS中保存备用；S3细胞准备：S3.1PBMC细胞准备：S3.2神经母细胞系准备：1神经母细胞培养：细胞培养基：MEMF12培养基、12～18％胎牛血清、0.3～1.5％双抗；培养条件：3～6％二氧化碳，35～39℃培养箱中使用T25细胞培养瓶对神经母细胞进行培养；2细胞计数：梯度稀释后使用显微计数仪对神经母细胞进行计数，将神经母细胞置于PBMC混合液中；S4，对神经母细胞捕获。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏汇先医药技术有限公司 一种神经母细胞瘤捕获方法

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