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一种基于微流控芯片的血脑屏障与脑胶质瘤共培养模型的建立方法及应用 

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申请/专利权人:中国人民解放军海军军医大学

摘要:本发明涉及生物技术领域,具体是一种基于微流控芯片的血脑屏障与脑胶质瘤共培养模型的建立方法及应用,所述芯片由血管通道、脑实质通道、三维肿瘤通道和介质通道组成。利用本方法提供的技术方案,成功整合了结构功能完整的血脑屏障与脑胶质瘤三维培养微环境,实现体外脑胶质瘤生长微环境重构,与其他肿瘤模型相比,该模型将血脑屏障引入脑肿瘤微环境,更适用于抗脑肿瘤药物筛选以及肿瘤行为研究等。

主权项:1.一种用于建立血脑屏障与脑胶质瘤共培养模型的微流控芯片,其特征在于,所述微流控芯片包括第一细胞培养室、第二细胞培养室、第三细胞培养室和培养基通道;在第一细胞培养室、第二细胞培养室、第三细胞培养室和培养基通道一侧均设有液体注入口;在第一细胞培养室和培养基通道的另一侧分别对应设置液体出口;第一细胞培养室用于注入人周细胞和脑微血管内皮细胞;第二细胞培养室用于注入星形胶质细胞的纤维蛋白原和凝血酶混合液;第三细胞培养室用于注入脑胶质瘤细胞的基质胶混合液;培养基通道用于注入细胞培养基;所述的微流控芯片的血脑屏障与脑胶质瘤共培养模型的建立方法,包括以下步骤:A芯片内细胞接种培养-血脑屏障:配制人脑微血管内皮细胞悬液、人星型胶质细胞悬液和人周细胞悬液,配制纤维蛋白原和凝血酶母液;将人星型胶质细胞混悬于纤维蛋白原与凝血酶的混合溶液中,注入芯片中的第二细胞培养室,恒温凝胶化;在第一细胞培养室依次加入人周细胞和人脑微血管内皮细胞,倾斜芯片使细胞粘附于第一细胞培养室与第二细胞培养室交界面,形成人脑微血管内皮细胞-人周细胞-人星型胶质细胞三细胞共培养的血脑屏障微结构;B芯片内细胞接种培养-脑胶质瘤:隔天配制脑胶质瘤细胞悬液,与预冷基质胶混合后加入第三细胞培养室;C在第一细胞培养室液体注入口注入细胞培养基以模拟体内血管动态微环境。

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