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一种培养类脑模型的体外方法 

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申请/专利权人:中国医学科学院基础医学研究所

摘要:本发明涉及一种培养类脑模型的体外方法;具体地,本发明还涉及根据所述方法获得的类脑模型、及其用途。

主权项:1.一种培养类脑模型的体外方法,所述方法包括以下步骤:1将解离的iPSC细胞添加到含有EB接种培养基的平板中,在37℃下培养0-5天,直至形成拟胚体克隆,其中所述EB接种培养基为添加了10μM的Y-27632、2μM的多索啡Dorsomorphine和2μM的A83-01的EB形成培养基;2在步骤1中形成的拟胚体克隆直径大于300μm时,将形成的拟胚体转移到含有诱导培养基的平板中,在37℃下培养0-2天,形成含有神经上皮的克隆,其中所述诱导培养基为添加了2μM的多索啡和2μM的A83-01的EB形成培养基;3将步骤2中形成的含有神经上皮的克隆转移至硅胶板上,加入解冻的Matrigel,将硅胶板置于37℃培养箱中,以形成与Matrigel聚合的克隆;4将步骤3中的与Matrigel聚合的克隆转移到含有扩张培养基的平板中,在37℃继续培养0-3天,以形成显著扩张的神经管样结构,其中所述扩张培养基为添加了GSK-3b抑制剂CHIR99021和SMAD抑制剂SB-431542的EB形成培养基;5将步骤4中的培养基更换为添加了GSK-3b抑制剂CHIR99021和SMAD抑制剂SB-431542的类脑成熟培养基,在37℃继续培养0-3天;和6将步骤5中的培养基更换为添加了20μM的人参皂苷Rg1或Rb1的类脑成熟培养基。

全文数据:

权利要求:

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