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一种香樟原生质体高效分离方法 

申请/专利权人:浙江农林大学

申请日:2024-03-28

公开(公告)日:2024-06-18

公开(公告)号:CN118207150A

主分类号:C12N5/04

分类号:C12N5/04

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.07.05#实质审查的生效;2024.06.18#公开

摘要:本发明公开了一种香樟原生质体高效分离方法,涉及植物细胞工程领域,所述分离方法步骤包括预处理、酶解和原生质体纯化,所述预处理为香樟无菌苗叶片浸于甘露醇溶液中,并抽真空;酶解为预处理后的叶片置于酶解液中,抽真空后避光酶解;原生质体纯化为酶解完成后加入等体积的W5溶液终止酶解,并冲洗酶解物,将混合液用细胞筛过滤后离心,取离心后的沉淀用W5溶液清洗,再次离心获得原生质体。上述方法易于操作,获得的原生质体产量多、活力高并且形状均一、纯度高,这为香樟种质资源创新、性状改良以及分子生物学研究提供了技术支撑。

主权项:1.一种香樟原生质体高效分离方法,其特征在于,所述分离方法步骤包括:预处理:香樟无菌苗叶片浸于甘露醇溶液中,并抽真空;酶解:预处理后的叶片置于酶解液中,抽真空后,避光酶解;原生质体纯化:酶解结束后,加入等体积的W5溶液冲洗酶解物,将混合液用细胞筛过滤后离心,取离心后的沉淀用W5溶液清洗,再次离心获得原生质体。

全文数据:

权利要求:

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