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申请/专利权人:青岛农业大学
摘要:本发明公开了一种忍冬叶孔菌粗提物在制备抗肿瘤药物中的应用,将保藏编号为CGMCCNO.40990的忍冬叶孔菌Phylloporialonecerae的液体发酵提取物用于制备抗肿瘤药物。制备胞外醇沉及胞外醇溶样品、胞内醇提及胞内水提样品。通过试验发现,本发明的忍冬叶孔菌胞内醇提样品能显著抑制A549细胞及Eca‑109细胞的存活,胞内醇沉样品对SKOV3细胞具有明显的抑制效果,可应用于制备抗SKOV3人卵巢癌细胞、A549人非小肺癌细胞及Eca‑109人食管癌细胞的药物或保健品。该用途为开发新的潜在抗肿瘤药物提供了有效途径,同时为开发忍冬叶孔菌这一宝贵资源提供了一定的理论基础。
主权项:1.一种忍冬叶孔菌提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1将平板活化的忍冬叶孔菌菌种转接到液体菌种培养基中,30-32℃、110-130rpm摇床中震荡培养15-20d后,作为液体菌种,以5-10%的接种量转接到液体发酵培养基中扩大培养4周。培养结束后,用200目纱网进行过滤,得到发酵液和菌丝;其中所述忍冬叶孔菌Phylloporialonecerae的保藏编号为CGMCCNO.40990;2将过滤的发酵液加热并浓缩至原始体积的110,后加入1-4倍70-95%乙醇进行醇沉,醇沉24-48h后,置5000rmin离心机中离心10min,所得沉淀经冷冻干燥后,即为胞外醇沉物;3取离心后的上清醇溶液用旋转蒸发仪进行乙醇回收后剩余液体经冷冻干燥后,即得胞外醇溶样品;4菌丝于50-60℃烘干,磨成粉末,按照1:10-1:20的比例,用70-95%乙醇以60-100Hz频率进行超声醇提,每次1h,重复3-4次,合并提取液用旋转蒸发仪进行乙醇回收后剩余液体经冷冻干燥后,即得胞内醇提样品;5经醇提后的菌丝残渣,以1:5-1:10的比例,用90-100℃热水提取3-4次,每次1h,合并提取液后浓缩至原体积的110,后进行冷冻干燥,即得胞内水提样品。
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权利要求:
百度查询: 青岛农业大学 一种忍冬叶孔菌粗提物在制备抗肿瘤药物中的应用
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