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申请/专利权人：天根生化科技(北京)有限公司
摘要：本申请涉及DNA打断技术领域，具体公开一种降低DNA打断形成的发夹结构数量的片段化酶反应体系和DNA文库构建方法。所述片段化酶反应体系包括：组合酶和打断反应物；所述组合酶包括限制性内切酶和聚合酶类；所述打断反应物包括Mg2+和Ca2+，不含锰离子；在所述片段化酶反应体系之中，Mg2+的浓度为0.5~0.9mM，Ca2+的浓度为0.3~0.7mM。本申请通过筛选金属离子和辅助酶的种类和浓度，降低了限制性内切酶作用下的DNA回文序列暴露的频率，从而减少DNA打断过程中发夹结构的形成数量。
主权项：1.一种降低DNA打断形成的发夹结构数量的片段化酶反应体系，其特征在于，所述片段化酶反应体系包括：组合酶和打断反应物；所述组合酶包括限制性内切酶和聚合酶类；所述打断反应物包括Mg2+和Ca2+，不含锰离子；在所述片段化酶反应体系之中，Mg2+的浓度为0.5~0.9mM，Ca2+的浓度为0.3~0.7mM。
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权利要求：
百度查询： 天根生化科技(北京)有限公司 一种降低DNA打断形成的发夹结构数量的片段化酶反应体系和DNA文库构建方法
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